Împreună avem două categorii de obiective. Obiectivul A corespunde situațiilor profesionale de finețe. care necesită un minim strict de cunoștințe teoretice memorate, în care deciziile medicului veterinar pot avea consecințe grave, o eroare care constituie o conduită profesională inexcusabilă, sau în noțiuni de bază esențiale necesare pentru a putea răspunde unor scopuri sau pentru a îndeplini misiunile cerute unui medic veterinar cele din urmă fiind realizabile în timpul facultății. Obiectivul B se referă la deprinderea aptitudinii de a raționa din punct de vedere medical și a lua decizii în consecință. În cazul tuberculozei animale aceste obiective cuprind 1. Prezentați protocolul de realizare al diferitelor tehnici de tuberculinare intradermică la bovine 2. Tu și te cese cauzele unor erori, metodele de interpretare și aplicații la un studiu de cad 2. Descrieți evoluția situației epidemiologice a tuberculozei bovine Situația inițială Situația observată pentru ultimul an cunoscut 3. Prezentați principiile luptei împotriva tuberculozei bovine, factorii de succes sau eșec și justificați evoluția acestora, de la screening până la controlul factorilor de risc. 4. Prezentați măsurile de reglementare care urmează să fie puse în aplicare și aplicați-le la un studiu de caz. Într-o fermă de bovine fără tuberculoză pentru obținerea și menținerea calificării acesteia. Într-o fermă de bovine în care există dovezi ale suspiciuni de tuberculoză, pentru a confirma sau infirma această suspiciune Într-o fermă de bovine recunoscută ca infectată cu tuberculoză Într-o fermă de bovine în care exista suspiciunea de probabil infectată 5. Prezentați elementele de suspiciune de tuberculoză și mijloacele de confirmare, profilaxie și combatere Prezentare generală Agentul patogen Patogeneza Istorie Epidemiologie Transmitere Tuberculoza umană Tuberculoza mamiferelor Diagnostic suspiciune Tutecese Diagnostic confirmare Prevenire și control Acțiuni care trebuie întreprinse Exemple de test întrebări Familia micobacteriace Gen Micobacterium Colorat Silnilsen Acidoalcooloalcaloresistent De formă bacilară. 0,2 până la 0,5 micron în diametru și 2 până la 4 micron în lungime. Acidul micolic prezent în peretele bacilului conferă acestuia. Rezistență la decolorarea cu acid și alcool. Aerob și imobil. Se multiplică lent și poate rămâne în. Hipobioza decenii Rezistență mare în mediu până la zeci de ani Condițiile favorizante sunt reprezentate de Mediile reci, umede, întunecate Majoritatea micobacteriilor, cu excepția men Smegmatis și men Fortuitum Nu pot crește pe medii obișnuite și necesită utilizarea unor medii speciale de cultură Mediul leovenșțaienlien sen Niveluri scăzute de penicilină și acid nalidixic sunt, de asemenea, prezente în mediul lege pentru a inhiba creșterea bacteriilor gram-pozitive negative, pentru a limita creșterea doar la speciile Mycobacterium. Prezența verdelui de malachit în mediu inhibă majoritatea celorlalte bacterii. Este dezinfectant și solidificant al mediului de cultură. Prezența glicerinei favorizează creșterea meni. Tuberculosis Pentru cultivarea lui mebovis, se omite glicerina și se adaugă piruvatul de sodiu Mediul apare verde, opac și opalescent Unele culturii se pot dezvolta într-un interval de timp mai lung, cuprins între 10 zile până la 2 luni, denumite culturii cu creștere disgonică mebovis, se diferențiază, astfel în funcție de timpul necesar creșterii, de micobacteriile cu creștere rapidă, ce formează colonii în 7 zile, denumite culturii cu creștere eugonică. Micobacteriile sunt sensibile la căldură. Rezistă 20 de minute la 60 de grade Celsius, 20 de secunde la 75 de grade Celsius. Lumina soarelui, razele X și razele UV le distrug. Ele sunt rezistente la frig, uscare și rămân viabile timp îndelungat în produsele contaminate. Micobacteriile sunt mult mai rezistente la antisepticele bacteriene obișnuite și dezinfectanți chimici. Bacilii tuberculozei sunt rezistenți la aciz și baze diluate. Bacilii sunt totuși sensibili la iod și alcool, la 70 de grade sau 90 de grade. Cultivarea micobacteriilor este utilizată pentru diagnosticul infecțiilor micobacteriene, pentru a testa sensibilitatea la antibiotice a izolatelor. Pentru a diferenția diferite specii micobacteriene, în funcție de morfologia coloniei, rata de creștere, caracteristicile bioimice și microscopice. Micobacteriile sunt rezistente la antibiotice obișnuite, peniciline, tetracicline, chloramfenicol. Bacilul tuberculozei este totuși sensibil la anumite medicamente, cum ar fi streptomicina, tratamentul tuberculozei umane, combinând întotdeauna trei antibiotice, pentru a reduce riscul de rezistență antimicrobiană. Riscul dezvoltării rezistenței antimicrobiene duce la rezervarea exclusivă a tratamentelor cu antibiotice numai în terapia tuberculozei umane. Animalele nu se tratează. Patogenitatea principalelor micobacterii pentru diferite specii de animale și oameni Consecințe Epidemiologice Evoluția tuberculozei animale depinde de tipul de micobacterii implicat. Profilactice Profilaxia trebuie să implice toate speciile de animale ce funcționează ca un releu de contagiozitate. Diagnostic Oricare ar fi bacilul determinant al infecției, acesta poate fi cauza unii reacții fals pozitive la testul alergic cu tuberculână intreidermică. De aici și interesul diferențierii prin tuberculinare între idermică comparativă simultană, TCS, și sau titrarea gama interferonului. Micobacteriile sunt bacterii aerobe, imobile, cu excepția speciilor Mycobacterium marinum, care s-a dovedit a fi mobilă în macrofage, sunt în mod caracteristic rezistente la acid. Micobacteriile au o membrană exterioară. Ele posedă un perete celular acidoresistent și majoritatea nu formează endospori. Caracteristica distintivă a tuturor speciilor de Mycobacterium este aceea că peretele celular este mai gros decât la multe alte bacterii, fiind hidrofob, ceros și bogat în acizi micolici micolați ce dau rezistența crescută. Peretele celular este format din stratul hidrofob de micolat și un strat de peptidoglican ținut împreună de un polizaharid, arabinogalactan, ce au rol în generarea fenomenelor de sensibilizare alergică. Peretele celular are o contribuție substanțială la rezistență în mediu și în organismul afectat. Căile biosintetice de formare a componentelor peretelui celular sunt ținte potențiale pentru noile medicamente împotriva tuberculosei. Trebuie să înțelegem faptul că micobacteriile sunt printre primele forme de viață ce au apărut pe pământ, iar evoluția ulterioară a vieții pe pământ s-a realizat în prezența micobacteriilor. astfel încât în cursul procesului evolutiv, de la eucariote la organismele pluricelulare actuale, micobacteriile s-au adaptat fiecarei specii noi, evoluând împreună cu aceasta. Analizele comparative ale genomurilor micobacteriene au identificat mai multe similitudini genetice și proteine de semnătură care se regăsesc în mod unic în toate speciile secvențiate din genul Micobacterium. În plus, 14 proteine se regăsesc numai în speciile din genurile Micobacterium și Nocardia, ceea ce sugerează că aceste două genuri sunt strâns legate. Genomul unor micobacterii este destul de mare în comparație cu alte bacterii. De exemplu, genomul lui M. Vulneris codifică 6653 de proteine, genom mai mare decât cel al eucariotelor mici, m-ar fi drojdia, care codifică doar 6000 de proteine. În ceea ce privește arborele evolutiv, putem observa că M. Ulceran s-a evoluat din M. Marinum. Testele fenotipice pot fi folosite pentru a identifica și a distinge diferitele specii și tulpini de micobacterii. În sistemele mai vechi de clasificare, micobacteriile sunt grupate în funcție de aspectul și rata de creștere. Peste 100 de specii sunt recunoscute în prezent pe baza unei clasificări recente, cel mai recent strămoș comun. Oneil și colegii au prezentat recent o analiză filogenetică, cuprinzătoare bazată pe o aliniere a genomilor de bază a 57 de tulpini de bacterii, inclusiv toate micobacteriile disponibile. Pentru a înțelege complexitatea secvențierii și clasificării pe baza studiilor genetice în imagine este prezentată berculoharta circulară a cromozomului lui M. tuberculosis H37RV. Cercul exterior arată scal al megabaze, unde 0 reprezintă începerea replicării. Clasificarea micobacteriilor pe baza vitezei lor de creștere pe medii de cultură le diferențiază în Micobactericul Creștere lentă disbonică Complexul micobacteriului un tuberculosis Membrii complexului măcobacteriului un tuberculosis, MTBC, sunt agenți cauzali ai tuberculosei umane și animale. Speciile din acest complex includ Me africanum, me bovis, me bovis bcg, me caneti, me caprae, me microti, me mungi, me origis, me pinipedi, me suricatae, me tuberculosis, principala cauza a tuberculosei umane. Micobacterii cu creștere lentă disbonică Complexul Micobacterium avium Complexul Mycobacterium avium, MAC, este un grup de specii, în infecția diseminată, nu în infecția pulmonară, cauză semnificativă de deces la pacienții imunosupresați. Specia M. Indicus pranii, pare a fi de bază în acest complex. Speciile acestui complex includ M. avium M. avium paratuberculosis, implicat în boala crohnă la omsii causal al boligion B. O. M. avium silvaticum Mea viui un homini suis. Me colombiense. Me indicus prani mei intacelulare. Micobacterii cu creștere lentă disbonică. Diferențiate pe baza apartenenței la una din clade. Micobacteriul un gordon a e clade. Micobacteriul un cansas e clade. Micobacteriul un non-chromogenic untera e clade. Producătoare de micolactone. Micobacteriul un simlia e clade. Micobacteri cu creștere lentă disbonică. Încă neclasificate. Micobacterii cu raport de creștere intermediară Meintermedium Micobacterii cu creștere rapidă eugonice Micobacteriul un Chelona eclade Micobacteriul un Fortuit un clade Micobacteriul un Mucogenic un clade Micobacteriul un Parafortuit un clade Micobacteriul un Vaca eclade Micobacterii cu creștere rapidă eugonice încă neclasificate Principalele micobacterii actual recunoscute, specii receptive. Micobacterii al tuberculozei bovine. Micobacteriul unbovis, MB. Bacterii acid rapide zilnilsen în complexul MTB. Specii gazdă, bovine, căprioare, bizonii, elani. Multe țări dezvoltate sunt libere de mebovis, răspândit în Africa, Asia și Orientul Mijlociu. Relațiile de înludire filogenetică ale MTBC Distribuția filogenetică a men Canetii, liniile L1-L7 de men Tuberculosis și speciile adaptate animalelor Figura arată distribuția geografică a fiecărei descendențe și a gazdei preferate. Potrivit celui mai recent raport al OMS, tuberculoza TB este responsabilă pentru 1,8 milioane de decese și provoacă 10,4 milioane de cazuri noi de tuberculoză în întreaga lume în fiecare an. Datele cumulate indică faptul că tuberculoza a ucis 1 miliard de oameni în ultimii 200 de ani, ceea ce o face cel mai mare ucigaș în comparație cu alte boli infecțioase precum ciuma, gripa, variola, malaria, cholera, sida sau covid. Tuberculozala om este cauzată în principal de bacilul Mycobacterium tuberculosis. Cu toate acestea, alte specii de Mycobacterium sunt, de asemenea, capabile să infecteze oamenii. Acestea includ men, canetii și men. Africa nu, responsabile pentru cazurile umane limitate geografic la țările din Africa de Est și, respectiv, de Vest. Mai mult, o serie de specii de Mycobacterium sunt, de asemenea, capabile să provoace tuberculoză la mamifere, ceea ce reprezintă o problemă economică, precum și un risc zunotic pentru oameni Împreună, aceste specii constituie complexul MEN Tuberculosis, MTBC Câteva imagini cu bacilii acidoalcolo-alcaloresistenți, sau acid rapizi, acid fast Metuberculosis este cultivat pe un mediu selectiv cunoscut sub numele de mediul Leuvenstein-Jensen, folosit în mod tradițional în acest scop. Cu toate acestea, o metodă lentă, deoarece acest organism are nevoie de 6 până la 8 săptămâni pentru a crește, ceea ce întârzie raportarea rezultatelor. Acum se poate obține un rezultat mai rapid folosind mediul Middlebrook sau Bactec. Micobacteriul un tuberculosis se dezvoltă pe mediul Leovenstein-Ienzen după 6 săptămâni de cultivare, la 37 de grade Celsius. Se pot vedea colonii tipice nepigmentate, aspre, uscate. Culoarea verde a mediului se datorează prezenței verdelui de malachid, care este unul dintre agenții selectivi pentru a preveni creșterea majorității celorlalți contaminanți. Spre deosebire de multe alte medii solide de cultivare utilizate în microbiologia clinică, mediul Leuvenstein-Liensen nu conține agar. Consistența solidă este obținută prin coagularea la căldură a albuminei din nul de găină. Micobacterium fortuitum pe agar sânge Cultivat 9 zile în atmosferă aerobă, la 37 de grade Celsius Micobacterium fortuitum are o distribuție mondială și poate fi găsit în apa naturală și procesată, în canalizare și în ape murdare Este mai puțin frecvent ca acesta să provoace boli pulmonare Micobacterium fortuitum poate cauza boli cutanate locale, osteomielită, infecții articulare și boli oculare după traumatisme Este o cauză rară a linfadenitei. M. fortuitum poate fi o boală nosocomială, dobândită în spital. Plăgile chirurgicale se pot infecta după cerana este expusă direct sau indirect la apa de la robinet contaminată. Alte surse posibile de infecție cu M. fortuitum includ dispozitivele implantate, cum ar fi catetelele, accesele la locul de injectare și endoscoapele contaminate. Micobacterium fortuitum pe mediul ogaua Un exemplu de micobacteriul cu creștere rapidă Micobacteriul în vacaie este din același gen cu mycobacteriul în tuberculosis, bacteria care provoacă tuberculoză umană. Primele studii au indicat că expunerea la mycobacteriul în vacaie ar ameliora simptomele tuberculozei. Cu toate acestea, o analiză din 2002 nu a constatat niciun beneficiu de pe urma imunoterapiei cu meni. Vacaie la persoanele cu tuberculoză Se pare că există rezultate diferite din cauza două forme diferite de bacterie, netedă și aspră, plus răspunsul individual diferit la vaccinare. Micobacteriul în gordonel Un exemplu de micobacterii școtocromogene Bacteriile școtocromogene dezvoltă pigmentul în întuneric. Micobacteriile netuberculoase precum Runion grup 2 sunt un exemplu, dar termenul se poate aplica multor altor organisme. Micobacteriul în cansaș pe mediu lege Un exemplu de micobacterii fotocromogene Organismele fotocromogene au o creștere lentă și produc un pigment galben-portocaliu atunci când sunt expuse la lumină. Grupul include Micobacterium kansas, Micobacterium marinum, Micobacterium asiaticum și Micobacterium simie. Micobacterium zurgai este un fotocromogen atunci când este crescut la 24 de grade și un scotocromogen la 37 de grade. Condițiile de infecție Pot fi împărțite în două categorii, calitative și cantitative. A calitative. Factori dependenți de bacil. Specia bacilului, infecția cu meaviu împrovoacă leuni mici, rar calcificate, care progresează rapid spre sâcleroză. Patogenitatea bacilului, bacilii cu patogenitate scăzută determină tuberculoză localizată, adesea limitată la complexul primar. Doi factori care se referă la receptivitatea și sensibilitatea gardei. Specia de animale special este implicată în sensibilitate. De exemplu, rumegătoarele mici sunt mai puțin sensibile decât cele mari lame. Boviz. Legati de vârstă, sunt mai frecvente și mai grave le iunile la tinereți sau la animale în vârstă decât la adulți. Stare generală Factorii care duc la scăderea stării generale cresc susceptibilitatea la bacilul tuberculozei, prin reducerea generală a apărării, deficiențe, subnutriție sau chiar condiții de reproducere intensivă. Factorii de țesut local Structura țesutului, bogăția vascularizației și sistemul macrofagic local intervin în morfologea leiunilor. Leiunile exudative sunt mai frecvente în țesuturile libere, plămân și în cavitățile preformate, seeroase. Existența leiunilor preexistente de altă natură, leiuni pulmonare, leiuni mamare, pot favoriza implantarea bacilului tuberculozei. B. Cantitative. Depind de doză și de repetarea dozelor de bacil, condițiile de expunere. Doza Numărul de particule infecțioase Este necesară o doză minimă infectantă, variabilă în funcție de specia inoculată și de calea de intrare. Exemple, traseul S.C. Trist-Cobai, 5-10 bacili viabili, vaci, câteva sute, oi, câteva mii. Nu există o doză maximă, există o paralelă între cantitatea de bacterii și severitatea cursului. De exemplu la bovine, infecție multibacilară, 0,25 g de bacil tuberculoș administrați pe calea Săce Provoacă tuberculoză fatală generalizată în 1 lună, 0,05 g produc tuberculoză fatală în 2-3 luni Infecția paucii bacilară, de obicei nu are impact clinic, de fapt, rezultatele pot varia în funcție de sensibilitatea individuală a animalului 2. Dozele repetate În timp ce inocularea unei doze unice de bacil tuberculoș poate duce la leuni ușoare care progresează spre stabilizare, dozele mai mici care se repetă în timp favorizează dezvoltarea tuberculozei active. Inalarea micobacteriilor în cazul animalelor adulte și ingestia prin lapte la viței tineri sunt principalele moduri de infecție. Infecția umană se realizează prin consumul de lapte contaminat cu micobacteriul unbovis, acum rară în țările dezvoltate, deoarece laptele este tratat termicul HT. Mea viumintra celulare sunt mult mai puțin virulenți decât me. Tuberculosis, Mycobacterium bovis și cauzează rareori boli la indivizii imunocompetenți. Bacilii sunt aerobii obligați a căror creștere lentă este întâzviată de pH sub 6,5, prin urmare nu se găsesc în centrul granulomului. Granulomele cazeoase și cavitația sunt rezultatul hipersensibilității destructive a țesuturilor, care este parte integrantă a răspunsului imun al gazdei. Macrofagele alveolare pulmonare fagociteaza bacteriile. Manipularea endozomala de catre bacteriile din interiorul macrofagului afecteaza formarea fagolizozomului, permitand multiplicarea micobacteriilor. Aceasta leiune se numeste afect primar. Macrofagele transporta bacilii in ganglioni linfatici regionali. Afectul primar si linfonodurile afectate formeaza complexul primar. Proliferarea bacilară în macrofagele alveolare pulmonare și în spațiile aeriene, duce la bacteriemie și însămânțarea mai multor organe, numit afect secundar, care împreună cu localizarea în linfonodurile adiacente formează complexe secundare. Dezvoltarea imunității imediate celular are loc în aproximativ 2-3 săptămâni după prima expunere, respectiv afectul primar. Macrofagele transportă bacilii în ganglioni linfatici regional și bacilii sunt prezentați de către celulele dendritice macrofage, APC, către celulele TCD4. Gama interferonul, IFN, eliberat de celulele TCD4 din subsetul TH1 este crucial pentru activarea macrofagelor și pentru metodele de diagnostic bazate pe detectarea IFN. Gamma interferonul, IFN, va conduce, de asemenea, la diferențierea macrofagelor în celule epiteloide, sau chiar la celule gigantice. Acestea sunt celulele Langans, fiind un răspuns granulomatos caracteristic. Macrofagele alveolare pulmonare fagocitează bacteriile. Manipularea endosomală de către bacterii a macrofagului modifică formarea fagolizozomilor, permițând micobacteriilor să prolifereze nestingerite. În interiorul acestora, la nivel alveolar, această leiune se numește afect primar. Macrofagele transportă bacilii către ganglioni linfatici regionali. Afectul primar și linfonodurile afectate formează complexul primar. Gama interferonul IFN produs determină, de asemenea, diferențierea macrofagelor în celule epiteloide, sau chiar celule gigant, acestea sunt denumite celule Langans un răspuns granulomatos caracteristic. Macrofagele transportă bacilii către ganglioni linfatici drenanți și sunt prezentați de către celulele dendritice macrofage, APC, către celulele TCD4. IFN eliberat de celulele TCD4 ale subsetului TH1 este crucial pentru activarea macrofagelor și pentru metodele de diagnostic bazate pe detectare IFN. IFN a dus, de asemenea, la diferențierea macrofagelor în celule epiteloide sau ca celule gigant Langans. Proliferarea bacilară în macrofage, alveole pulmonare și spații aeriene, duce la bactermie și însămânțarea mai multor organe numită afect secundar. Proliferarea bacilară în organism și linfonodurile adiacente și localizarea infecției în organe și linfonoduri se numește complex secundar. Dezvoltarea imunității imediate celular are loc la aproximativ 2-3 săptămâni după expunere. 15 zile identificarea IDR-TUT-CT Cazificarea granulmelor SID după caz și aparitia cavernelor sunt rezultatul hipersensibilității testutului de electie pulmonar, mamar, procese ce fac parte integrantă cu răspunsul imun al gazdei. Inalarea aerosolilor cu MEB la animalele adulte și ingestia prin lapte la viței tineri sunt principalele moduri de contaminare. Infecția umană prin consumul de lapte contaminat cu Mycobacterium bovis este acum rară în țările în care laptele este tratat termicul HT. Mea vium intracelulare este mult mai puțin virulent decât mea. Tuberculosis, Mycobacterium bovis, bacilii sunt aerobi obligatoriu, a căror creștere lentă este întâzliată de un pH sub 6,5, deci nu pot fi găsiți în centrul granul omului. La începutul secolului al XVIII-lea tuberculozai era considerată o boală misterioasă tratabilă cu balsam de cireșe sălbatice și untură de elan. Apoi a venit. Robotco. Poate că nu mă mai țineți minte. Pariez că ați auzit de postulatele mele. Microrganismul trebuie găsit în toate organismele care suferă de boală, dar nu și în organismele sănătoase Microrganismul trebuie izolat de la organismul bolnav și cultivat în cultură pură Microrganismul cultivat trebuie să reproducă boala atunci când este reintrodus într-un organism sănătos Microrganismul trebuie izolat din organismul inoculat experimental, apoi microorganismul trebuie identificat ca fiind identic cu cel care a cauzat boala Epidemiologie Rumegătoarele mari sunt receptive și fac tuberculoză cu meni Boviz Infecția cu alte micobacterii produce restructurări imunologice pasagere Oaia și caprase imbolnăvesc excepțional Calul este rezistent natural, excepțional celelalte solipede Factorii favorizanți Dependenții de gazdă, specie, rasă, vârstă, sex, individ, genetic Dependenții de management, animalele exploatate intensiv prezintă un risc crescut. Dependenții de agentul cauzal, doza, calea. Dependenții de mediu microclimat, stabulația. Sursele de infecție Primare, animalele infectate, nu neapărat bolnave, elimină bacteriile prin fecale, aerosol și expectorat, lapte, produsele animaliere de la animalele tuberculoase Micobacteriile se elimină prin toate secrețiile organice în funcție de stadiul evolutiv și localizarea procesului infecțios Secundare, ambient obiecte contaminate Căi de transmitere Calea respiratorie, calea digestivă Fiecare categorie sau specie recunoaște o cale preponderentă de transmitere. Calea de pătrundere condiționează evoluția ulterioară. Dinamica epidemiologică În efective indemne diseminează insiglios în 2-3 ani cuprinzând 85-90 din efectiv. Tendința de permanentizare la animalele în stabulație Tuberculoza primară Evoluție stadială Granul omul la poarta de pătrundere este denumit afect primar. Afectul primar granul om în linfonodul regional complex primar complet. La 15 zile post timp. Sensibilizare specifică. Consecințe. Animalele infectate sunt descoperite cu mult înaintea apariției oricărui semn clinic. Funcție de localizarea complexului primar complicat sursă primară de infecție. Complexul primar complicat se poate vindeca prin sterilizare. Celulele. Calcificare. Staționare sau generalizare. În acest proces, micobacteriile sunt vii și viabile. Induchim unitate de infecție premoniție. Deși tuberculozabovina a fost prezentă cândva în întreaga lume, programele de control au eliminat sau aproape eliminat această boală de la animalele domestice în multe țări. Națiunile clasificate în prezent drept indemne de tuberculoză includ Australia, Islanda, Danemarca, Suedia, Norvegia, Finlanda, Austria, Elveția, Luxemburg, Letonia, Slovacia, Lituania, Estonia, Republica Cefă, Canada, Singapore, Jamaica, Barbados și Israel. Programele de eradicare sunt în desfășurare în alte țări europene, Japonia, Noua Zeelandă, Statele Unite ale Americii, Mexic și unele țări din America Centrală și de Sud. Deși tuberculozabovina a fost eradicată din majoritatea statelor din SUA, câteva efective infectate continuă să fie raportate, iar câteva state își pot pierde periodic statutul de indemne de boală. În special, un focar de infecție la cerbul sălbatic cu coadă albă a complicat eforturile de eradicare în Michigan. Probleme similare există cu bursucii infectați în Regatul Unit și Ilanda, și cu oposumii infectați din Noua Zeelandă. Tuberculoza bovină este încă răspândită în Africa, în unele părți ale Asiei și în unele țări din Orientul Mijlociu. Această hartă, de la Organizația Mondială pentru Sănătatea Animalelor, OIE, arată distribuția tuberculozei bovine din ianuarie până în iunie 2011. Roșu indică un eveniment actual de boală, violetul indică o boală limitată la una sau mai multe zone. Verde închis indică o boală care nu este raportată în această perioadă și verde deschis indică boala niciodată raportată. Măsuri de control al tuberculozei bovine bazată pe politica de screening, sacrificare și notificare a bolii în Africa. Evoluția focarelor de tuberculoză bovină în Regatul Unit Se observă că în ciuda măsurilor susținute de supraveghere, profilaxie și control, numărul focarelor de tuberculoză bovină a crescut. Motivul acestei creșteri fiind existența purtătorilor și vehiculatorilor de micobacterii, aparținând faunei sălbatice. Mebovist se poate transmite și infecta oamenii în primul rând prin ingestia de produse lactate nepasturizate, dar și prin aerosoli și prin plăgi la nivelul pielii. Carnea crudă sau insuficient gătită poate fi, de asemenea, o sursă de micobacterii. Transmiterea de la persoană la persoană este rară în rândul indivizilor imunocompetenți, dar men. Bovis s-a transmis ocazional printre grupuri mici de oameni, în special alcoolici sau persoane infectate cu HIV. Rare ori, oamenii au infectat vite prin aerosol sau urină. Transmiterea la vânători se poate realiza datorită Lipsei mânușilor la tranșarea vânatului Lipsei cunoașterilei unilor de tuberculoză Consumului de carne de vânat Evitării testării Braconajului Transmiterea la animale mebovis Modelul explicativ al originii tuberculozei într-o fermă de bovine Introducere, fluxul de animale introdus de fermier ca parte a activității sale agricole, cumpărare, împrumut, reeturnarea unui animal, îmbarcare, aceste elemente pot fi urmărite în timpul anchetei epidemiologice în documentele de transport și proprietate operaționale. Vecinătate, flux continuu de contaminanți, rezultat din numeroase evenimente care nu sunt adesea înregistrate în documentele de operare, dar pot fi urmărite prin investigație. 1. Meticuloasă, împrumut, schimb de servicii, echipamente, animale, vizite, apropiere, contacte directe sau indirecte. 2. Reemergență, după un focar anterior de tuberculoză, recidivă legată de persistența infecției sau, după introducerea unui animal infectat, dar nerecunoscut ca atare, după o fază care poate avea câțiva ani, trecerea de la infecția latentă la excreția și propagarea în fermă. Majoritatea speciilor de animale pot fi considerate gazde. Populațiile gazdă răspândite nu mențin mebovis pe termen nelimitat, în absența gazdelor de întreținere, dar pot transmite infecția între membrilor sau către alte specii pentru o perioadă de timp. Unele gazde de overflow pot deveni gazde de întreținere, dacă densitatea populației lor este mare. Tuberculoza bovină se menține în general la populațiile de bovine, dar alte câteva specii pot deveni gaz de rezervor. Bovinele excretă mebovis în secrețiile respiratorii, fecale și lapte și uneori în urină, secreții vaginale sau spermă. Un număr mare de organisme pot fi eliminate în stadiile târzii ale infecției. Apar purtători asimptomatici și energici. În cele mai multe cazuri, mebovist se transmite între bobine, sub formă de aerosoli, în timpul contactului apropiat. Unele animale se infectează atunci când ingerează micobacterii, această cale poate fi deosebit de importantă la viței ei care alătează de lavaci infectate. Au fost observate infecții cutanate, genitale și congenitale, dar sunt rare. Nu toate bovinele infectate pot transmite boala. Mebovist se poate transmite prin inalarea de aerosoli, prin ingestie sau prin plăgi la nivelul pielii. Importanța acestor rute variază în funcție de specie. Ingestia pare să fie principala cale de transmitere la porci, dihori, pisici și probabil căprioare. În plus, pisicile pot fi infectate pe cale respiratorie sau prin transmitere percutanată prin mușcături și zgârieturi Primatele sunt de obicei infectate prin inalare Transmiterea cu aerosoli pare a fi, de asemenea, principala cale de răspândire la bursuci, dar transmiterea prin mușcături poate fi importantă Bursucii cu boală avansată pot elimina men Bovis în urină Iar micobacterii au fost găsite în fecale Datorită schimbărilor de comportament, bursucii și oposumii sunt cel mai probabil să transmită bovinelor mebovis Identificarea și întreruperea lanțurilor de transmitere a micobacteriilor între purtătorii și eliminatorii silvatici și cei de interes economic este deosebit de importantă în profilaxia tuberculozei bovine Aplicarea măsurilor de biosecuritate, de testare și supraveghere, înaintea mișcărilor de animale, de pastorizare al laptelui, au rolul de a reduce incidența bolii precum și prezența amicobacteriilor în produsele de origine animală, ce ajung în consumul uman. Identificarea și întreruperea lanțurilor de transmitere a amicobacteriilor între purtătorii și eliminatorii existenți, într-o exploatație de tip individual, gospodăresc este de asemeni de mare importanță. Un rol de vector îl pot juca animalele existente în curțile crescătorilor de bovine crescute împreună cu pisici, căței, găini, surse atât de mebovis, cât și meavium, cel din urmă generând apariția de reacții para-alergice, fals pozitive la testările alergice cu rol de supraveghere. Tuberculoza umană cauzată de me Bovist a devenit rară în țările cu programe de eradicare și folosire a laptelui pastorizat UHT. Cu toate acestea, această boală continuă să fie raportată în zonele în care tuberculoza bovină este slab controlată la animale. Incidența este mai mare în rândul fermierilor, lucrătorilor în abator și al altor persoane care lucrează cu animale. Unele infecții umane sunt asimptomatice. În alte cazuri, boala localizată sau diseminată se poate dezvolta fie la scurt timp după infecție, fie câțiva ani mai târziu, când scăderea imunității permite reactivarea infecției. Boala localizată poate afecta ganglionii linfatici, pielea, oasele și articulațiile, sistemul genitourinar, meningele sau aparatul respirator. Lymphadenopatia cervicală, scrofula, care afectează în principal amigdalele și ganglioni linfatici preauriculari, a fost cândva o formă foarte comună de tuberculoză la copiii care au băut lapte infectat. În unele cazuri, acești ganglioni linfatici pot abceda. Ocazional poate rezulta o boală cronică de piele. Lupus vulgaris Oamenii infectați transcutan pot dezvolta o boală localizată a pielii, neci de măcelar, o formă considerată în general ușoară și autolimitantă. Boala pulmonară este mai frecventă la persoanele cu infecții reactivate. Simptomele pot include febră, tuse, durere în piept, cavitație și hemoptizie. Boala genitourinară poate duce la insuficiență renală. Tuberculoza bovină poate fi tratată cu succes cu medicamente antimicrobiene, dar infecțiile netratate pot fi fatale. La om pot fi observate simptome constituționale, febră, scădere în greutate, transpirații nocturne. Radiografia arată tuberculoza bilaterală avansată, cu infiltrate pulmonare și cavitație. Bobinele sunt principalele gazde ale meli. Boviz, dar pot fi infectate și alte mamifere domestice și sălbatice. Gazdele de întreținere cunoscute includ oposumi și posibil dihorii, din Noua Zeelandă, bursucii din Marea Britanie și Ilanda, zimbrini și elani în Canada, cudul și bivoli din Africa. Ce erbul cu coada albă din Statele Unite, Michigan, a fost clasificat drept gazdă de întreținere? Cu toate acestea, unii autori cred acum că această specie poate fi o gazdă contagioasă care întreține organismul doar atunci când densitatea populației sale este mare. Speciile raportate ca și gazde de contagiune includ oi, capre, cai, porci, câini, pisici, dihorii, cămile, lame, multe specii derumegătoare sălbatice, inclusiv căprioare și elani, elefanți, rinoceri, vulpi, coioți, nurgi, primate, oposums, vidre, foci, lei de mare, iepuri de câmp, raton, urși, facocei, feline mari, inclusiv lei. Tigri, leoparzii, gheparzii și râși și mai multe specii de rozătoare Majoritatea mamiferelor sunt sensibile la infecția cu meboviz Tuberculoza este o boală infecțioasă cronică Evoluția sa este lentă, treptată și evoluția sa se întinde pe luni sau chiar ani Cu toate acestea, pot apărea evoluții acute care accelerează și agravează cursul bolii Formele clinice tăcute sunt frecvente, există mai mulți infectați decât bolnavi La om și bovine, starea de infecție tuberculoză poate persista ani de zile sau chiar toată viața. La alte specii, porci, cai, carnivore, păsări, infecția cu micobacterii determină de obicei boală în câteva luni. Când tuberculoza provoacă semne clinice, aceste semne pot fi foarte variate. Toate țestuturile și organele pot fi implicate în proces, în funcție de specie și de modul de contaminare, nu sunt caracteristice, în afară de câteva localizări specifice. La sfârșitul cursului bolii, acestea merg mână în mână cu o afectare semnificativă a stării generale dominată de pierderea în greutate a animalelor, emeaciere, scăderea producției de lapte. Extinderea leziunilor nu se corelează cu intensitatea manifestărilor clinice observate Consecințe Diagnosticul clinic este foarte dificil Prin urmare, este necesar să se recurgă la mijloace experimentale pentru a depăși neajunsurile diagnosticului clinic Semnele clinice ale tuberculosei bovine apar de obicei în luni de zile la bovine De asemenea, infecțiile pot rămâne latente ani de zile și se pot reactiva în perioadele de stres sau la bătrânețe Infecțiile precoce sunt adesea asimptomatice. În stadiile avansate, simptomele comune includ emiaciere progresivă, febră fluctuantă, slăbiciune și inapetență. Animalele cu leziu în pulmonare au de obicei o tuță umedă care este mai gravă dimineața, pe vreme rece sau în timpul exercițiilor fizice și bovinele pot prezenta dispne sau tahipne. În stadiul terminal, animalele pot deveni extrem de emiaciate și pot dezvolta boală respiratorie acută. La unele animale, linfonodurile retrofaringiene sau alți ganglioni linfatici se măresc și pot abceda și drena. Ganglioni linfatici mult măriți în volum pot bloca și vasele de sânge, căile respiratorii sau tractusul digestiv. Dacă tractul digestiv ei este implicat, pot fi observate diaree intermitentă și constipație. La cerb, tuberculoza bovină poate fi o boală subacută sau cronică, iar rata de incidență este variabilă. La unele animale, singurul simptom vizibil sunt accesele de origine necunoscută în ganglioni linfatici, iar simptomele pot să nu se dezvolte timp de câțiva ani. În alte cazuri, boala poate fi diseminată, cu o evoluție rapidă și fulminantă. La pisici, simptomele pot include pierderea în greutate, febră ușoară persistentă sau fluctuantă, deșidratare, scăderea apetitului și posibile episoade de vărsături sau diaree. Dacă sunt implicate căiile respiratorii, pisica poate prezenta tuse, dispne și raluri. În forma abdominală, ganglionii linfatici mezentericei măriți pot fi palpabili. Infecțiile cutanate sunt, de asemenea, frecvente la pisici și pot apărea ca o ușoară tumefiere sau ulcer plat, cel mai frecvent pe față, gât sau spete. Se pot observa fistule sau travee de drenaj. La unele pisici, tuberculozabovina apare ca o deformare a frunții sau a podului nasului. În stadii avansate, aceste infecții pot expune și distruge oasele nasului și feței. O formă neobișnuită de tuberculoză la pisici afectează în ochii. La oposumul cu coadă perie, tuberculozabovina este de obicei o boală pulmonară care durează două până la șase luni. În stadiul final al bolii, animalele sunt dezorientate, incapabile să se cațere și pot fi văzute rătăcind la lumina zilei În schimb, majoritatea bursucilor infectați nu au leiu învizibile și pot supraviețui mulți ani Fiind o boală respiratorie. Leziuni Pentru mai multe informații, vă rugăm să revizuiți cursul de anatomie patologică. Leziunile macroscopice caracteristice tuberculozei pot fi Fie localizate și bine definite, tubercul granulomen. Sau extinse și slab delimitate, infiltrații tuberculoase. Cea mai reprezentativă leziune microscopică, considerată specifică este Granulomul tuberculos langans, format din Un centru necrotic omogen, caseum. Un prim inel de celule, histiocite, macrofage. A două coroană pur limfocitară. Evoluția acestei leziuni poate avea loc în direcția caseificarii granulomului cu fibroză periferică și chiar calcificare. Leziunile ce sunt în contact cu orificii naturale precum bronchiole, bronchi, canal galactofor își pot drena conținutul în exteriorul organismului, lăsând în loc caverne. Tuberculoza bovină se caracterizează prin formarea de granulome, tuberculi, unde bacteriile s-au instalat. Aceste granulome sunt de obicei gălbui și cazeoase, cazeocalcaroase sau calcificate. Ele sunt adesea încapsulate. La unele specii, cum ar fi căpriorele, leziunile timp să se mene mai degrabă cu abcesele decât cu tuberculii tipici. La bobine, tuberculii se găsesc în ganglionii linfatici, în special cei de la nivelul capului și toracelui. De asemenea, sunt frecvente în plămâni, splină, ficat și suprafețele cavităților corpului, unde au aspect de perle, fiind denumită tuberculoză perlată. Leziunile se găsesc uneori pe organele genitale ale femelelor, dar sunt rare pe organele genitale ale taurilor. La căprioare, tuberculii sunt cel mai frecvent în ganglioni linfatici ai capului și toracelui, în special în ganglioni linfatici retrofaringieni mediali. Tuberculii de men Bovizi nu sunt calcificați la pisici sau câini. La pisici, aceștia pot fi găsiți în ganglioni linfatici, plămâni și alte organe. De asemenea, pot fi observate pleurite, peritonite și pericardite. La câini, tuberculii sunt obișnuiți în ganglioni linfatici, plămâni, ficat, rinichi, pleura și peritoneu, iar lichid ascitic de culoare galben pai poate fi găsit în torace. Deși unii bursuci infectați au boală diseminată, mulți alții pot avea leziuni minime, localizate. Spre deosebire de aceasta, oposumii cu coadă în perie au tendința de a prezenta caziație pulmonară extinsă și necroză. Comparație între un uger de bovină sănătoasă, stânga, și unul cu tuberculoză, dreapta Săgețile indică granulomele, palpabile și la suprafața ugerului Cerg cu leziun tuberculoză în peritoneu, afectată fiind seroasa peritoneală tuberculoză aperlată cu micobacteriul un bovit Leziun similare cu cele observate la bovinele aflate în stadii avansate de tuberculoză Alte entitați care pot provoca semne clinice similare cu tuberculoză a bovină sunt Reticulita traumatică Pasteoreloza cronică Neumonia de corp străin sau de aspirație Obstrucția faringiană Actinobaciloza Infecția cu arcanobacterium piogenes Infecția cu corinebacterium Mastite cauzate de alte microorganisme În timpul autopsiei sau inspecției carcaselor în abatoare, leziunile granulomatoase ale tuberculozei pot fi confundate cu Cele cauzate de agenții infecțioși precum miceți, stafilococi, arcanobacterium și actinobacillus SPP Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis Neumonie cu corp străin Tuberculosa perlată se confundă cu cancerul mezoteliomul pleural sau peritoneal Diagnosticul tuberculozei Diagnosticul de suspiciune Clinică anatomopatologic-epidemiologic B. Depistare animalelor infectate prin tuberculinare Tuberculinarea este metodă de supraveghere activă screening. Tuberculinarea evidențiază sensibilizarea specifică apărută la 15 zile de la producere afectului primar. Tuberculinarea nu este metodă de confirmare. Folosește extract proteic purificat, purified protein derivated PPD, este o tuberculoproteină. Tuberculinarea se execută prin două metode. Testul de tuberculinare unic, TUC, și testul comparativ simultan, TCS. PPD bovin, 100.000 unități tuberculânice pe mililitru, practic identic cu PPD tuberculosis sau PPD mamifer. PPD aviar, 25.000 unități tuberculânice pe mililitru, înrudit cu PPD paratuberculosis. PPD mamifer este net distint față de PPD aviar. Tuberculina se inoculează 0,1 ml strict între idermic iar citirea reacției locale se face la 72 ore de la inocularea tuberculinei. În România se folosesc două tehnici de tuberculinare. Testul unic, TU, presupune numai utilizarea tuberculinei mamifere. Se aplică efectivelor indemneni. Este metodă de profilaxie ofensivă supraveghere activă. Rezultatul ei poate genera suspicionarea tuberculozei. Animalele tuberculinate sunt identificate în reagente dubioase, negative. Deoarece există determinanții antigenici comuni între mebovis, meavirum, meparatuberculosis pot apare reacții fals pozitive sau dubioase astfel încât animalul nu este declarat tuberculos, el este supus în continuare la alte metode de confirmare a tuberculozei. Testul comparativ simultan, TCS, utilizat conform recomandărilor ANSVSA Inocularea simultană a tuberculinei mamifere și acelei aviare în puncte separate, cu citire la 72 de ore Reacția mai intensă la PPD mamifer față de PPD aviar confirmă MEN BOVIS Reacția mai intensă la PPD aviar față de PPD mamifer confirmă alte micobacterii, avium, paratuberculosis Citirea reacției cutanate în urma tuberculănării Se apreciază grosimea cutisului rezultată din diferența. Pliul final, minus pliul inițial, vacile sunt grupate în funcție de grosimea diferenței în reagente, pozitive dubioase sau negative. Se apreciază inclusiv reacția locală care poate fi edem moale, edem păstos, edem dur sau nodul, împreună cu măsurarea pliului pielii, inițial și final. Manopera se execută de către același operator, cu același instrument cutimetru Aplicație și realizare în funcție de situația epidemiologică a efectivului Intreidermichide cu tuberculână mamiferă supraveghere Depistarea de reagenți în focare declarate Reacții fals negative, antialergice, energie, PPD săbdozat, supresie imună, fătare, postalergice Reacții fals pozitive, paralerge, sensibilizări nespecifice Pseudoalergice, alte granulomatoze, tulburări neuroendocrine citirea reacției cutanate în urma tuberculănării. Se apreciază grosimea cutisului rezultată din diferența. Pliul final minus pliul inițial, vacile sunt grupate în funcție de grosimea diferenței, de la stânga la dreapta imaginii în reacție negativă, reacție dubioasă, reacție pozitivă sau reagente. Tuberculina este un extract proteic purificat de perete bacterian, dintr-o cultură de micobacterii. Tuberculina este capabilă să evidențieze hipersensibilitatea întârziată, HSI, a unui organism infectat, la doze care nu provoacă nici o altă reacție, adversă, organismului animal. Tuberculina este o alergohaptenă, numită și PPD, purified proteine derivate. Tuberculinele folosite la bovine sunt tuberculina bovină sau mamiferă preparată din mebovis și tuberculina aviară preparată din me-avium. Tuberculina umană preparată din me-tuberculosis nu este utilizată la bovine. Tuberculina bovină normală autorizată în prezent în EU sub 20.000 UIML-UI, unități internaționale. Titrul de tuberculină aviară este de 25.000 UIML-UIML. Proprietăți Toxicitate, niciuna pentru un organism sănătos, la dozele recomandate Pe de altă parte, doza toxică este redusă la un subiect sensibilizat, vaccinat sau tuberculos, exemplu, aproximativ 200.000 ui pentru o vacă și 10.000 ui întâi La om Consecințe Injectarea accidentală de tuberculină bovină la oameni, infectați sau vaccinați cu BCG, poate genera reacții alergice importante. Proprietăți imunologice PPD Puterea antigenică scăzută Puterea imunogenă Nu Puterea alergenică Nu Tuberculina nu poate provoca starea de HSI, are doar proprietatea de a o dezvălui. Fenomene uzuale Administrarea intraider mică a unei doze obișnuite pe cale intraider mică scade, iar anulează reactivitatea alergică a bovinelor. Acest fenomen persistă aproximativ o lună. Depozitare Tuberculina trebuie păstrată la rece, 5 grade Celsius, 3 grade Celsius, ferită de îngheț și lumină. Perioada antealergică Figura stadiul 1 corespunde timpului dintre pătrunderea bacilului în organism și când hipersensibilizarea devine detectabilă, prin tuberculână. În general, variază de la 15 zile la 6 luni, durata medie, 3 până la 8 săptămâni, dar infecția poate rămâne latentă și nu se dezvăluie decât după câteva luni sau ani de la contaminare. Consecințe Un animal recent infectat poate scăpa de screening-ul alergic, de unde necesitatea repetării tuberculânărilor, pentru a permite depistarea cât mai devreme a animalelor infectate în fermele unde se practică sacrificarea selectivă. Perioada alergică Figura etapele 2, 3, 4 Instalarea alergei este de scurtă durată, probabil de 2 până la 4 săptămâni, etapa 2 Durata alergei este variabilă, în funcție de condițiile de infecție și de reacția gazdei Poate persista mult timp, cațiva ani, sau din potrivă poate fi scurtată la cateva săptămâni în cazul unei evoluții rapide Intensitatea alergei, etapa 3, poate fluctua, etapa 3 și 3 Aceste fluctuații sunt legate de diversii factori Factorii fiziologici Animalele tinere sau animalele mai în vârstă reacționează mai puțin decât adulții În mod similar, femelele aproape de fătare, șase săptămâni înainte, șase săptămâni după Factorii patologici Bolile intercurente pot duce la scăderea capacității de răspuns a organismului Factorii terapeutici Ingrediente active imunosupresoare Corticosteroizi Vaccinuri Fenomene de aclimatizare La inocularea de tuberculână Rezultând energie prelungită Până la 6 săptămâni Consecințe Importanță pentru alegerea metodelor de screening al alergiilor Întârzierile minime între două tuberculânări Interpretarea rezultatelor pozitive și negative și deciziile luate Perioada de energie post-tuberculoză, figura etapa 5 trist în această fază, nu mai este posibil de a detecta tuberculoză printr-o metodă alergică. Acest eșec se explică prin starea de progres a bolii, care saturează capacitatea de reacție a organismului. 6. Consecințe. Cei mai periculoși subiecti pot scăpa de scrininul cu tuberculână. 7. Energie. Alergia poate fi lipsi, figura, stadiul 6, în funcție de un determinism necunoscut. Acest fenomen privește o proporție foarte limitată de indivizi, probabil în jur de 1 până la 5%. Relatia alerge-leiuni tuberculoase Există o relație între alerge și dezvoltarea leiunilor tuberculoase. Într-o populație infectată cu tuberculoză de lungă durată, majoritatea subiectilor cu o reacție alergică prezintă și leiuni tuberculoase. Dar relația nu este liniară. Intensitatea ridicată a reacției alergice este mai probabil să semnaleze un proces într-un stadiu incipient, și mai ales la adulții tineri, și deci leuni discrete În schimb, un animal cu reactivitate alergică scăzută sau chiar nu lă poate avea leuni semnificative Consecințe Dacă există relația dintre alerge și prezența leiunilor, aceasta nu este nici sistematică, nici liniară PPD injectat la bovinele cu tuberculoză provoacă o reacție cutanată locală, la locul de inoculare. Reacție vizibilă după 24-48 de ore, treptat, cu un vârf la 72 de ore, persistă câteva zile și se estompează treptat în aproximativ 8 zile. Sensibilizare fiind prezentă peste 5 săptămâni motiv pentru care repetarea tuberculănării se va face după 42 de zile. Citirea reacției locale la 72 de ore testul unic. Citirea calitativă sau subiectivă. Rezultatul este pozitiv dacă observăm semne clinice de natură inflamatorie, edem moale, edem dur, edem păstos, exudație, nodul, necroză, durere, adenită. Citirea cantitativă sau obiectivă. Evaluare cantitativă a creșterii Grosimii pliului pielii la locul injectării tuberculinei bovine, db. milimetri Pozitivă dacă a diferența intre pliul final minus pliul inițial este mai mare sau egală cu 4 milimetri Citirea reacției locale la 72 de ore testul comparativ simultan Citirea trebuie efectuată în câteva ore, măsurând grosimea pliurilor cutanate la fiecare loc de inoculare A1, aviar final, A0, aviar inițial și B1, bovin final, B0, bovin inițial. Îngroșările pliurilor cutanate sunt apoi calculate prin diferențe. DB, B1-B0 grosimea pliului cutanat în MM la locul de inoculare de tuberculână bovină. Da, A1-A0 grosimea pliului cutanat în MM la locul de inoculare de tuberculână aviară. Rezultatele sunt interpretate folosind tabelul. Reprezentarea grafică a rezultatelor obținute cu TCSDB egal îngroșoare la tuberculină bovină, da egal îngroșoare la tuberculină aviară. Interpretare Rezultatele trebuie interpretate la scara efectivului folosind o reprezentare grafică. Figura îngroșarea cutanată măsurată la locul de injectare a tuberculinei bovine, DB, este reprezentată grafic pe abscisă, iar îngroșarea cutanată măsurată la locul injectării tuberculinei aviare, DA, este reprezentată pe ordonată. Apoi trageți două linii de ecuații Y egal X1 și Y egal X4. Permițând să distingem trei sectoare în funcție de natura rezultatului, negativ, dubios sau pozitiv, figura Reprezentarea grafică a rezultatelor obținute cu TCS într-o turmă cu tuberculoză, G, și într-o turmă cu paratuberculoză, D Un diagnostic confirmativ poate fi realizat prin histopatologie și sau demonstrarea microscopică a bacililor acidoresistenți. Frotiurile directe ale probelor clinice sau de țesut pot fi colorate cu coloratie țilnilsen, colorare fluorescentă acidoresistentă sau tehnici de imunoperoxidază. Diagnosticul este confirmat prin izolarea mei. Bovis pe medii de cultură selective Micobacteriile cresc încet și culturile sunt incubate timp de 8 săptămâni Creșterea devine de obicei vizibilă în 3 până la 6 săptămâni Identitatea organismului poate fi confirmată prin teste bioimice și caracteristicile culturii sau prin teste de reacție în lanț a polimerazei, PCR Alte teste sunt, în general, utilizate ca teste auxiliare la testul la tuberculână Testele de proliferare a linfocitelor și gamma interferon sunt teste de sânge care măsoară imunitatea celulară. Testul interferon gamma este deosebit de util la animalele care sunt dificil de capturat sau manipulat, deoarece acestea trebuie capturate o singură dată, mai degrabă decât de două ori pentru testul intraidermic cu tuberculână. Testul de proliferare a linfocitelor este rar folosit la bovine, dar poate fi util la animalele sălbatice și în grădini zoologice. Testele imunologice enzimatice ELISA Măsoară titlurile de anticorpi împotriva meni BOVIS Cu toate acestea, testele de imunitate umorală sunt în general de utilizare limitată la bovine, deoarece titlurile sunt inconsecvente și cresc doar în stadiile târzii ale infecției La căprioare, titlurile pot crește mai devreme în cursul bolii și pot fi mai previzibile ELISA pot fi utile și la alte animale sălbatice și de la grădina zoologică Razele 10 sunt folosite pentru diagnostic la câini și pisici, precum și culturile Tehnicile bazate pe PCR, reacția în lanț a polimerazei, sunt indispensabile pentru detectarea directă Diferențierea precisă a speciilor de micobacterii și investigațiile epidemiologice moleculare ale transmiterii tuberculozei Pentru informații tehnice detaliate pe această temă cititorul se adresează literaturii specifice Deci tehnicile bioimice permit, de asemenea, diferențierea între specii distincte de micobacterie. Aceste metode necesită foarte multă muncă, consumă mult timp. PCR poate fi utilizat pentru orice material de probă în teorie, dar are unele probleme proprii, de exemplu, unele probe pot conține inhibitori PCR, care ar putea duce la rezultate fals negative. În schimb, generarea unui număr mare de ampliconii ADN poate duce rapid la rezultate false pozitive Mai mult, tehnica necesită un laborator relativ sofisticat și tehnicien bine pregătiți Confirmarea 1. Examen bacteriologic Se realizează Frotiuri din granulome, colorate ZFNL-SEN, evidențiază bacil acid oalcal oalcoolo rezistenți, puțin numeroși Izolări pe medii speciale după decontaminarea și îmbogățirea probelor 2. Examen histopatologic granulome cu celule gigante de tip Langans sau la colorare prin metoda ZFNL-SEN se evidențiază bacil 3. Bioproba pe cobai, iepure, găinăle iunile apar după 3-8 săptămâni Examenul bacteriologic propriu zis are ca dezavantaj intervalul mare de așteptare Se execută simultan cu bioproba pe cobai, fiind obligatoriu pentru că numai acesta permite depistarea tipului de mycobacterium Obținem confirmarea și declarăm oficial boala numai dacă la toate aceste metode obținem rezultat pozitiv Supravegherea activă În exploatații calificate oficial ca indemne de tuberculoză bovină, cu atestat de indemnitate, pentru menținerea statusului de exploatație oficial indemnă de boală, o tuberculinare prin testul comparativ simultan pe an, la toate bovinele și bubalinele peste șase săptămâni precum și la caprinele care sunt crescute în exploatațiile de bovine de la care se livrează lapte crud către procesare. Supravegherea activă În exploatații calificate oficial ca indemne de tuberculoză bovină, cu atestat de indemnitate, pentru menținerea statusului de exploatație oficial indemnă de boală, se interzice utilizarea pentru tuberculinare întreidermică a tuberculinelor neînregistrate, netestate, alterate sau cu termen de valabilitate expirat, precum și a instrumentalului de lucru defect. Supravegherea activă În exploatații calificate oficial ca indemne de tuberculoză bovină, cu atestat de indemnitate, pentru menținerea statusului de exploatație oficial indemnă de boală, se execută cu cel puțin două săptămâni înaintea acțiunilor imunoprofilactice. Nu vor fi supuse testări prin tuberculinare intraidermică. a. Animalele aflate în ultima lună de gestație și cele în primele 30 de zile după naștere. b. Animalele bolnave, aflate în tratament sau cele în convalescență. Dacă rezultatul testului comparativ simultan este pozitiv, animalele se izolează, carantinează timp de 30 de zile și apoi abatorizează pentru a evita diseminarea unor eventuale micobacterii și a confirma sau nu tuberculoza Supravegherea activă În exploatații calificate oficial ca indemne de tuberculoză bovină, cu atestat de indemnitate, pentru menținerea statusului de exploatație oficial indemnă de boală Dacă rezultatul testului comparativ simultan este neconcludent, se repetă peste 42 de zile. Și dacă și acesta este neconcludent, animalele se izolează, carantinează timp de 30 de zile și apoi abatorizează pentru a evita diseminarea unor eventuale micobacterii și a confirma sau nu tuberculoza. În laboratoarele sanitar-veterinare județene Supravegherea activă în exploatații calificate oficial ca indemne de tuberculoză bovină, cu atestat de indemnitate, pentru menținerea statusului de exploatație oficial indemnă de boală, până la clarificarea situației epidemiologice a exploatației. Dacă rezultatul testului comparativ simultan este pozitiv sau neconcludent, statusul de exploatație oficial indemnă de tuberculoză este suspendat. Supravegherea activă în exploatații calificate oficial ca indemne de tuberculoză bovină. Cu atestat de indemnitate. Pentru menținerea statusului de exploatație oficial indemnă de boală. Introducerea de animale din exploatație calificată oficial ca indemnă de tuberculoză se face fără testare în prealabil. Introducerea de animale din exploatație care nu este oficial indemnă pentru tuberculoză doar cu un TCS negativ și carantină de 30 de zile. Supravegherea activă În exploatații în curs de calificare Care nu au îndeplinit criteriile pentru calificare în urma testelor efectuate în anul anterior, dar care au rezultate negative la testarea din decembrie a anului anterior Se face un test unic pe an, la taurine și bubaline, peste șase săptămâni, la șase luni de la testul efectuat în decembrie Supravegherea activă În exploatații în curs de calificare Care nu au fost calificate oficial indemne și care au fost testate în altă lună decât decembrie anul anterior Se fac două teste unice pe an, la taurine și bubaline Peste șase săptămâni, o tuberculinare intraidermică printu la interval de șase luni Supravegherea activă În exploatații în curs de calificare Nou înființate Un test unic la 60 de zile de la alcătuire La taurine și bubaline peste 6 săptămâni Dacă efectivul a fost alcătuit doar din animale originare din exploatații calificate indemne de tuberculoză Supravegherea activă În exploatații în curs de calificare Nou înființate Dacă rezultatul testului unic este negativ se continuă spre calificare Dacă rezultatul testului unic este neconcludent sau pozitiv, va fi urmat la 42 de zile de un test comparativ simultan Dacă acesta din urmă este negativ se continuă spre calificare Dacă testul comparativ simultan este pozitiv, animalele sunt îndreptate spre abatorizare și confirmarea tuberculozei în laboratoarele județene Dacă testul comparativ simultan este dubios, este urmat la 42 de zile de un al doilea test comparativ simultan care dacă și el va fi dubios, sau pozitiv, după o izolare și carantinare de 30 de zile, animalele sunt îndreptate spre abatorizare și confirmarea tuberculozei în laboratoarele județene Supravegherea activă În exploatații în curs de calificare Laptele crud În cazul oricărui test pozitiv nu se dă în consum laptele și este distrus În cazul unor teste cu rezultat dubios sau negativ, cu autorizația autorității competente, după tratament termic și testul de fosfatează negativ, poate fi dat în consum Supravegherea activă Exploatații suspecte de contaminare În cazul oricărui test alergic pozitiv, bovinele sunt abatorizate. Medicul veterinar oficial elaborează și controlează aplicarea planului de măsuri până la clarificarea situației. Dacă examenele de abator și laborator sunt negative, se revine la statutul de exploatație oficial indemnă de boală. Supravegherea activă Exploatații contaminate Bovinele cu reacție pozitivă la testul alergic au fost eliminate iar testul de abator și laborator au confirmat tuberculoză 2 TCS pe an, la taurine și bubaline peste 6 săptămâni O tuberculinare intraidermică prin TCS la interval de 6 luni Supravegherea activă Exploatații contaminate Bovinele cu reacție pozitivă la testul alergic au fost eliminate iar testul de abator și laborator au confirmat tuberculoză. Se interzice Menținerea animalelor pozitive în efectiv Constituirea de centre de izolare pentru tuberculoză Livrarea animalelor pozitive sau acelor din exploatațiile suspecte ori contaminate către alte exploatații Supravegherea activă Exploatații contaminate Responsabilitate Medicul veterinar de liberă practică împuternicit pentru execuția tuberculănării Medicul veterinar oficial în a cărui responsabilitate este exploatația efectuează Anchetă epidemiologică Întocmirea programului de asanare Comunică în scris deținătorului de animale restricțiile privind circulația animalelor și condițiile de valorificare a produselor de origine animală provenite de la acestea. Monitorizează reagentele. Implementează măsurile de eradicare. Supravegherea activă. Exploatații contaminate. Pozitivele la TCS și testarea gama interferon sunt abatorizate în Partidă separată și se confirmă prin expertiză de abator. Și examene de laborator. Supravegherea activă Centre de colectare pentru export sau pentru comerț intra comunitar Bovine din exploatații calificate ca libere de tuberculoză Sunt îndreptate către centrul de colectare bovine D.C.A. au cel puțin un rezultat negativ la testul comparativ simultan efectuat cu 30 de zile înainte de livrare Supravegherea activă Tăierea de control a animalelor pozitive la testele tuberculânice sau imunologice E.A.C.F.N.N. Medicului veterinar oficial din abator. Prelevează probe individuale pentru X. Laborator. A. Linfonodurile capului, retrofaringiene stâng și drept, mandibulare stâng și drept, parotidiene stâng și drept. B. Linfonodurile traheobronchic stâng și drept, mediastinal anterior și posterior. C. Linfonodurile hepatic, iliac intern și extern, retromamar superior și inferior și poplitei. D. Porțiuni de țesuturi și organe, pleură, pulmon, ficat, splină, rinichi, organe genitale, glandă mamară Confirmare la laboratoarele județene, morfopatologic bacterioscopic Test biologic pe cobai Genotipare-fenotipare la Institutul de Diagnostic și Sănătate a Animalelor Supraveghere activă Inspecția în abator a animalelor vii Medic veterinar oficial face această inspecție conform procedurilor La abator, antemortem și postmortem Supraveghere activă Inspecția cărnii și a organelor Medic veterinar oficial face inspecția oficială postmortem a animalelor pozitive la testele tuberculânice sau și imunologice Dacă nu sunt leuni vizibile se recoltează a. Linfonodurile. Submaxilare, retrofaringiene, bronchice. b. Linfonodurile. Mediastinale, mezenterice, dacă sunt măriți în volum, portale și retromamare. dacă sunt leuni, pentru examenul morfopatologic și bacteriologic. a. Probe de organe cu leuni lenel. Aferente. b. Combaterea. Consecutiv buletinelor de analiză pozitive. Infecția cu Mycobacterium bovins. Se declară oficial boala. Anunțarea de către DSV local a Agenției Naționale. Carantină de gradul 2. Se aplică programul de combatere. Se execută testul unic. Asanarea prin extracție pe baza rezultatelor la tuberculinare repetată sau lichidarea efectivului. Tuberculinarea secundă se realizează la 42 zile. Sensibilizarea în funcție de prezența sau absența bacilului viu, în timp dispare, dar dacă agentul este în organism ea se menține în timp 3. Se distrug sursele de infecție și se înlătură, se întrerup căile de transmisie Declararea indemnității exploatatiei după 2 tecese succesiv negative, la interval de 6 luni, executate la 6 luni de la eliminarea ultimului animal reagent, cel mai devreme după 1,5 ani Interzis tratamentul tuberculozei animale riscul zunotic, tuberculostaticele pot duce la selecția de suși antibiorezistente Profilaxia Respectarea măsurilor de filtru Carantina profilactică înainte de introducerea în efectiv și tuberculinare Evitarea contactului între efective Tuberculinarea periodică Unul data an în efectivele indemne prin TCS Nu se introduc decât animale provenite din efective indemne care au fost supuse tuberculinarii în efectivul de origine și ținute în carantină profilactică. Se evită introducerea de surse secundare de infecție. Se evită exploatarea în contact cu abitarea interspecii. Personalul trebuie controlat periodic, trebuie să fie sănătos și nereagent la tuberculoză. Îndepărtarea câinilor și pisicilor. Deratizarea. Se evită sursele de reacții paralergice Starea de indemnitate trebuie confirmată Data ultimei tuberculinări, în data de animalul respectiv a fost negativ Tuberculinările cu test unic sunt dictate de frecvența și evoluția focarelor de boală din vecinătate Se verifică situația epidemiologică În România tuberculinarea este obligatorie la toate bovinele S-a încercat evidențierea capacității celulelor seriei albe sensibilizate cu Mycobacterium bovis pentru ca la un nou contact cu tuberculina acesteia să-și crească activitatea de sinteză a interferonului. Proba de țânge se pune în contact cu tuberculina, iar după 24 ore se măsoară cantitatea de interferon prin intermediul unei tehnici de tip ELISA, anticorp monoclonal anti-interferon cuplat cu o enzimă. Citirea se face spectrofotometric, densitatea optimă în care se situează subiectii pozitivi și cei negativi.