Panduan Praktikum Enzim Biokimia

Sep 17, 2024

Panduan Praktikum Biokimia: Mekanisme Kerja Enzim

Pengenalan

  • Penyampai: Imam Adrian Rahman, asisten dari Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin.
  • Tujuan: Memberikan panduan praktis tentang mekanisme kerja enzim.

Learning Objectives

  1. Memahami cara kerja enzim urease.
  2. Memahami cara kerja enzim skardinger pada susu.
  3. Memahami cara kerja enzim peroxidase pada susu.
  4. Mengetahui faktor-faktor yang mempengaruhi kerja enzim: suhu, pH, konsentrasi enzim, dan konsentrasi substrat.

Cara Kerja Enzim

Enzim Urease

  • Tujuan: Mengetahui kerja urease yang mengubah urea menjadi CO2 dan NH3 (amonia).
  • Reaksi: Urease mengubah urea menjadi NH3 dan CO2, menyebabkan alkalinitas dan perubahan pH.
  • Alat dan Bahan:
    • Larutan ureum 1%.
    • Larutan urease.
    • Phenolphthalein 1%.
    • Tabung reaksi dan pipet.
  • Prosedur:
    1. Siapkan tabung reaksi bersih, masukkan 5 ml larutan ureum 1%, tambahkan 1 tetes phenolphthalein dan 1 ml larutan urease, tutup.
    2. Ulangi dengan larutan urease yang telah dipanaskan-mendidih dan didinginkan kembali.

Enzim Skardinger

  • Tujuan: Mengidentifikasi kerja enzim Skardinger menggunakan susu segar.
  • Teori Dasar: Enzim dehydrogenase dapat mengambil hidrogen dari gugus aldehyde.
  • Alat dan Bahan:
    • Susu segar.
    • Larutan biru metil dan formaldehida.
    • Parafin cair.
    • Penangas air.
  • Prosedur:
    1. Isi tiga tabung reaksi dengan 5 ml susu, tambahkan biru metil dan formaldehida, kocok dan tambahkan parafin cair.
    2. Masukkan tabung ke penangas air pada suhu 37-40°C.

Enzim Peroksidase

  • Tujuan: Melihat mekanisme kerja enzim peroksidase pada susu segar.
  • Teori Dasar: Enzim peroksidase mengkatalisis reaksi dengan H2O2.
  • Alat dan Bahan:
    • Susu segar.
    • Larutan guaiak.
    • Larutan H2O2 3%.
  • Prosedur:
    1. Masukkan 3 ml susu ke dalam tabung reaksi, tambahkan larutan guaiak dan H2O2.

Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Kerja Enzim

Efek Suhu

  • Tujuan: Membuktikan suhu mempengaruhi kerja enzim.
  • Alat dan Bahan:
    • Liur sebagai sumber amilase, larutan pati, larutan iodium.
    • Inkubator dengan suhu bervariasi.
  • Prosedur: Menempatkan tabung pada suhu berbeda dan menambahkan liur, kemudian mencampur dan menambah iodium.

Efek pH

  • Tujuan: Membuktikan pH mempengaruhi kerja enzim.
  • Prosedur: Siapkan tabung dengan larutan pati pada pH berbeda, tambahkan liur, kerjakan pada suhu 37°C, tambahkan larutan iodium dan air suling.

Efek Konsentrasi Substrat dan Enzim

  • Tujuan: Membuktikan konsentrasi substrat dan enzim mempengaruhi kerja enzim.
  • Prosedur: Menambahkan liur dengan pengenceran berbeda dan mengukur absorbansi menggunakan spektrofotometer.

Korelasi dan Kinetika Michaelis-Menten

  • Memahami korelasi substansi enzim, substrat, dan kecepatan maksimum.
  • Menggunakan Vmax tinggi untuk efisiensi dalam industri.

Kesimpulan

  • Pentingnya menganalisis hasil perubahan warna dan absorbansi dalam tes enzim.
  • Harus memahami teori enzim untuk analisis yang akurat.

Assalamualaikum warahmatullahi wabarakatuh