Panduan Praktikum Biokimia: Mekanisme Kerja Enzim
Pengenalan
- Penyampai: Imam Adrian Rahman, asisten dari Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin.
- Tujuan: Memberikan panduan praktis tentang mekanisme kerja enzim.
Learning Objectives
- Memahami cara kerja enzim urease.
- Memahami cara kerja enzim skardinger pada susu.
- Memahami cara kerja enzim peroxidase pada susu.
- Mengetahui faktor-faktor yang mempengaruhi kerja enzim: suhu, pH, konsentrasi enzim, dan konsentrasi substrat.
Cara Kerja Enzim
Enzim Urease
- Tujuan: Mengetahui kerja urease yang mengubah urea menjadi CO2 dan NH3 (amonia).
- Reaksi: Urease mengubah urea menjadi NH3 dan CO2, menyebabkan alkalinitas dan perubahan pH.
- Alat dan Bahan:
- Larutan ureum 1%.
- Larutan urease.
- Phenolphthalein 1%.
- Tabung reaksi dan pipet.
- Prosedur:
- Siapkan tabung reaksi bersih, masukkan 5 ml larutan ureum 1%, tambahkan 1 tetes phenolphthalein dan 1 ml larutan urease, tutup.
- Ulangi dengan larutan urease yang telah dipanaskan-mendidih dan didinginkan kembali.
Enzim Skardinger
- Tujuan: Mengidentifikasi kerja enzim Skardinger menggunakan susu segar.
- Teori Dasar: Enzim dehydrogenase dapat mengambil hidrogen dari gugus aldehyde.
- Alat dan Bahan:
- Susu segar.
- Larutan biru metil dan formaldehida.
- Parafin cair.
- Penangas air.
- Prosedur:
- Isi tiga tabung reaksi dengan 5 ml susu, tambahkan biru metil dan formaldehida, kocok dan tambahkan parafin cair.
- Masukkan tabung ke penangas air pada suhu 37-40°C.
Enzim Peroksidase
- Tujuan: Melihat mekanisme kerja enzim peroksidase pada susu segar.
- Teori Dasar: Enzim peroksidase mengkatalisis reaksi dengan H2O2.
- Alat dan Bahan:
- Susu segar.
- Larutan guaiak.
- Larutan H2O2 3%.
- Prosedur:
- Masukkan 3 ml susu ke dalam tabung reaksi, tambahkan larutan guaiak dan H2O2.
Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Kerja Enzim
Efek Suhu
- Tujuan: Membuktikan suhu mempengaruhi kerja enzim.
- Alat dan Bahan:
- Liur sebagai sumber amilase, larutan pati, larutan iodium.
- Inkubator dengan suhu bervariasi.
- Prosedur: Menempatkan tabung pada suhu berbeda dan menambahkan liur, kemudian mencampur dan menambah iodium.
Efek pH
- Tujuan: Membuktikan pH mempengaruhi kerja enzim.
- Prosedur: Siapkan tabung dengan larutan pati pada pH berbeda, tambahkan liur, kerjakan pada suhu 37°C, tambahkan larutan iodium dan air suling.
Efek Konsentrasi Substrat dan Enzim
- Tujuan: Membuktikan konsentrasi substrat dan enzim mempengaruhi kerja enzim.
- Prosedur: Menambahkan liur dengan pengenceran berbeda dan mengukur absorbansi menggunakan spektrofotometer.
Korelasi dan Kinetika Michaelis-Menten
- Memahami korelasi substansi enzim, substrat, dan kecepatan maksimum.
- Menggunakan Vmax tinggi untuk efisiensi dalam industri.
Kesimpulan
- Pentingnya menganalisis hasil perubahan warna dan absorbansi dalam tes enzim.
- Harus memahami teori enzim untuk analisis yang akurat.
Assalamualaikum warahmatullahi wabarakatuh