本仪器服务为流逝细胞分选仪 我是技术员姚万树 接下来会给予简短的仪器简介 以及本仪器服务过的案例分析与分享 本单位所提供服务的仪器厂牌为BD 型号为Area3的CellSorter 接着会就三大部分介绍 首先在仪器原理的部分 会先进行荧光讯号的分析 接着会看后续实验的需求来评估是否进一步做分选 因此会先介绍FACTS核心技术原理、分选的设备 以及本仪器可协助到的领域与相关的案例分析及分享 分选仪的核心技术为FACTS 来自于Florescence Activated Cell Sorting 透过荧光讯号的分析进一步针对 特定细胞组群做分选 在前端分析的部分 透过影片做动态且简短的介绍 首先将细胞置备于均质化的悬浮状态中 上样前一定要经过40μm孔径大小的塞网过滤 在实验设计方面不一定仅局限于细胞 也可以取用壁 壁纸上可以设计认得特定结构的目标物 只要它整体 complex的大小落在仪器可以侦测的范围内 都是可以执行的 在仪器设备上 透过了翼流系统 镭射系统 分光滤片 光电倍增管 以及后端收集讯号的fiber 最后呈现在分析的图上 细看侦测的动态过程 透过一流聚焦的原理 将细胞依序地送至侦测区 每一个可能带有荧光讯号的细胞流过侦测区 透过镭射光的激发 在镭射光的前方以及侧方都会收集荧光讯号 再透过分光以及光电被增管转换的步骤 将讯号呈现并且累加在我们的分析图上 累積到我們所設定的數量目標之後 就可以呈現出上樣樣品中 螢光訊號強弱 以及比例上的分佈 那麼在整組 實驗的每一個樣本 就可以 做相對的分析以及比較 分选仪可以侦测的物体大小范围为0.5μm到50μm之间 随小至细菌分选仪也可以进行分析 本台仪器所搭配的是三支的镭射 除了物体大小以及复杂度的物理性特性之外 可以同时侦测9种荧光讯号 每秒最多可以侦测上万颗细胞 因此分选仪的优势在于 可以短时间内做高通量的侦测以及分析之外 还可以将目标细胞群落做分选跟存化 经过荧光讯号的分析 例如在右侧的分析图 如果希望将红色框框这群特性的细胞分选出来 就需要分选的功能 在左侧仪器设备中,样本通过黄色标示的上样管被送至侦测区后, 如果分析出符合我们分选条件的细胞, 就会经过下方电场被分选至下方的设备中。 在下方接收被分选出来的细胞的装置有很多种选择, 还是要看后续的实验的目的来搭配。 可以是15cc离心管,也可以是5cc tube。
或者是多孔盘的wellplay 比如说6well 12well 96well等等都没有问题 那又或者是在分选仪它的空间定位上 可以达成的一些客制化装置也都是可以的 那在分选模式本身也有四到五种选择 也是要看后续的实验需求 以及目标族群的比例来做决定 分选仪的应用 只要检测物或者是研究目标物,我一切可以侦测的大小范围 举凡细胞、病、肠道菌等等这些目标物 并且可以制备成悬浮且均质的状态 那么在目的上不管是要纯粹做分析 或者是有进一步分选的需求 以分选仪的功能都可以进行协助 这里先列举了几个大方向的应用 在临床上近年来正在积极地尝试所谓的自体免疫细胞疗法 主要的对象为癌症的病人 主要是将病人的免疫球细胞抽取并且分离出来之后 在体外的一些特殊环境中进行大量的培养 那培养到一定的数量以及活性之后呢 再输回病人的体内 借此提高病人的免疫力来达到抗癌的目的 另外在小分子药物开发 或者是说在药物研发过程中一些重要指 指标的一些观察或者是确效 以分选仪的功能也是可以协助到 纵观分选仪的应用其实相当广 在此简单的列出可以应用的范围 首先在学术研究方面 分选仪可以协助到细胞生物学 免疫学 海洋生物学等等 这些比较属于科学研究的部分 在临床医学部分,临床上常常会针对癌症细胞去做癌症的基因定序分析,或者是癌前的病变指标,很重要的应用在血液疾病方面的诊断等等,这些比较属于临床上面的应用。 最后在产业方面的应用,除了先前提到的药物研发的部分。 有一个比较有趣的应用就是在食品 也就是啤酒方面的应用 事实上在啤酒厂也有引进分选仪器 他们会用特定的标准来挑选出不同的酵母菌的品系 因为不同的品系 它所酿造出来的啤酒风味其实是不相同的 在这中间可能可以创造一些产业的商机 另外针对一些环境检测方面的应用 也是可以拿来协助 水質的一些檢測