Agilent MassHunter Unknowns Analysis

Descripción general

• Objetivo: Configurar un método en el software Agilent MassHunter para el cribado rápido de muestras desconocidas.
• Características clave:
  • Deconvolución para detectar componentes individuales.
  • Comparación de componentes con bibliotecas espectrales de masas.
  • Los resultados incluyen una lista de componentes de muestra, espectros deconvolucionados y factores de coincidencia.

Instalación del Software

• MassHunter Unknowns Analysis es parte del conjunto de software MassHunter.
• Se instala automáticamente con el software de análisis cuantitativo MassHunter.
• Acceso al programa:
  • Si no está en el escritorio, navegue a las herramientas de análisis cuantitativo de Agilent MassHunter.
  • Use la aplicación "Setup Desktop Icons" para habilitar MassHunter Unknowns Analysis.

Compuestos Co-eluyentes

• Los picos cromatográficos pueden consistir en múltiples compuestos co-eluyentes.
• Ejemplo: Un pico en el Cromatograma de Iones Totales (TIC) puede incluir tres compuestos.
• Objetivo de la Deconvolución:
  • Separa los componentes co-eluyentes.
  • Crea un espectro puro para cada componente.

Configuración de un Método

1. Abrir el Programa MassHunter Unknowns Analysis:
   • Haga doble clic en el icono para iniciar el software.
2. Crear Nuevo Análisis:
   • Haga clic en el icono de nuevo análisis en la esquina superior izquierda.
   • Navegue a la ubicación del archivo de datos brutos.
   • Ingrese un nombre para el análisis y haga clic en "Crear".
3. Agregar Muestras:
   • Seleccione las muestras para agregar a la tabla de muestras.
   • Use "Browse to Copy" para archivos de diferentes ubicaciones.
   • Cambie los tipos de archivo de datos según sea necesario (p. ej., de muestra a blanco de matriz).

Configuración de Parámetros del Método

• Método de Detección de Picos:

  • Enfoque en la deconvolución para identificar componentes.
  • Opciones para excluir valores de M/z del ruido de fondo.
  • Filtros para el área o altura del pico para excluir pequeños componentes.

• Parámetros de Deconvolución:

  • El factor del tamaño de la ventana de tiempo de retención controla la agrupación de señales de iones extraídas.
  • Valores más grandes producen menos componentes; valores más pequeños producen más.
  • El valor predeterminado para GC-MS generalmente se establece alrededor de 75.

• Configuraciones de Búsqueda en la Biblioteca:

  • Especifique las bibliotecas para el método.
  • Incluya bibliotecas personalizadas y comerciales (p. ej., NIST).
  • Ajuste configuraciones de la función de búsqueda (búsqueda directa/inversa).
  • Utilice criterios de tiempo de retención para reducir falsos positivos:
    • Requiere un archivo de calibración de retención (formato CSV).

• Configuraciones de Identificación de Compuestos:

  • Establezca el umbral mínimo de factor de coincidencia para la identificación.
  • Defina el límite inferior para los valores de M/z para coincidencias espectrales.
  • Especifique el proceso de búsqueda para múltiples bibliotecas.

• Configuraciones de Sustracción de Blancos:

  • Cambie el tipo de archivo de datos a blanco o blanco de matriz para sustraer compuestos encontrados en los blancos del análisis de muestra.

Análisis de Resultados

• Revisión de Resultados:

  • La tabla de muestras a la izquierda muestra los componentes identificados y las coincidencias de la biblioteca.
  • La tabla de componentes muestra tiempo de retención, nombre del compuesto, factor de coincidencia, y más.
  • El cromatograma a la derecha muestra la señal TIC y los componentes identificados.
  • Se muestran espectros deconvolucionados y espectros de biblioteca.

• Ejemplo de Uso de la Calibración del Tiempo de Retención:

  • Identifique si un compuesto (p. ej., isómero delta de hexaclorociclohexano) tiene una coincidencia pobre de índice de retención.
  • Use "Show Alternative Hits" para encontrar mejores coincidencias basadas en el tiempo de retención.

Exportación de Datos e Informes

• Opciones para exportar datos o generar informes:
  • Exportar a CSV, biblioteca, o realizar análisis cuantitativo.
  • Generar informes usando plantillas disponibles.

Conclusión

• Se proporcionó una introducción a la configuración y análisis de muestras desconocidas utilizando Agilent MassHunter Unknowns Analysis.