Laboratorio di Estrazione del DNA dalla Frutta

Materiale Necessario

• Ingredienti:

  • 100 g di polpa di banana
  • 3 g di cloruro di sodio
  • 10 ml di detersivo liquido per piatti
  • 5 ml di etanolo per analisi (freddo)
  • 1 ml di succo d'ananas (freddo)
  • Acqua distillata

• Strumenti:

  • Provette da 15 ml con tappo
  • Pipetta graduata da 10 ml
  • 2 berte da 250 ml
  • Becker da 100 ml
  • 2 cilindri da 100 ml
  • Ghiaccio
  • Imbuto
  • Forchetta
  • Piastra scaldante
  • Carta da filtro
  • Bilancia di precisione

Introduzione al DNA

• Il DNA è una molecola a doppio filamento.
• È in grado di:
  • Riprodursi
  • Conservare e trasmettere informazioni genetiche
• Contiene informazioni vitali per lo sviluppo, la crescita e il metabolismo degli organismi viventi.
• Se srotolato, il DNA di una cellula può raggiungere una lunghezza di 2 metri.

Preparazione

1. Congelamento dell'etanolo:
   • Riporre 20 ml di etanolo in congelatore per 2 ore.
2. Preparazione della polpa:
   • Frullare la polpa di ananas e filtrare per ottenere il succo (1 ml di succo filtrato).
   • Pesare 100 g di polpa di banana e trasferire in una becher da 250 ml.

Soluzione di Estrazione del DNA

1. Pesare 3 g di cloruro di sodio e versarlo in un becker da 100 ml.
2. Misurare 80 ml di acqua distillata e aggiungerla al becker.
3. Aggiungere 10 ml di detersivo liquido per piatti.
4. Utilizzare una barra magnetica e agitare su piastra agitante fino a dissolvere i componenti.
5. Versare in un cilindro da 100 ml e aggiungere acqua distillata fino a raggiungere 100 ml di volume finale.
6. Mescolare la soluzione con la polpa di banana nella becher.
7. Scaldare a 60°C per 15 minuti, monitorando la temperatura.
   • Nota: Non superare il tempo di riscaldamento per evitare degradazione del DNA.

Filtraggio e Precipitazione del DNA

1. Dopo 15 minuti, mettere la becher nel ghiaccio.
2. Filtrare la soluzione attraverso un imbuto rivestito di carta da filtro in una becher pulita da 250 ml.
3. Prelevare 5 ml di soluzione filtrata con una pipetta graduata e trasferirla in una provetta da 15 ml.
4. Aggiungere 1 ml di succo d'ananas e mescolare.
5. Aggiungere lentamente 5 ml di etanolo freddo lungo le pareti della provetta.
   • Osservare la formazione di due fasi separate: l'etanolo galleggia sopra la soluzione acquosa.
6. Lasciare riposare la provetta per 5 minuti.
   • Si formerà una sostanza biancastra e lattiginosa all'interfaccia tra alcol e filtrato: il DNA.