Metode Total Plate Count (TPC)
Prinsip TPC
- Menumbuhkan mikroba pada media agar
- Mikroba berkembang biak dan membentuk koloni
- Koloni dapat dihitung langsung dengan mata tanpa mikroskop
Persiapan Alat dan Bahan
- Cawan petri: 3 buah
- Tabung reaksi bertutup: 3 buah
- Beaker gelas 100 ml
- Batang pengaduk
- Sendok spatula
- Pipet ukur 1 ml
- Gelas ukur 50 ml dan 10 ml
- Pipet filler atau pipet PAM
- Kawat Ose
- Kaca arloji
- Erlenmeyer
- Botol semprot berisi aquadest
- Hotplate
- Pembakar spirtus
- Etanol 70%
- Botol sampel
- Media tanam: Platcon Agar (PCA)
Persiapan Area Kerja
- Bersihkan meja kerja dengan alkohol 70%
- Letakkan pembakar spirtus yang menyala
- Tata rapi semua peralatan di meja steril
Pembuatan Media Biakan
- Timbang PCA 2 gram
- Siapkan aquades 50 ml untuk melarutkan PCA
- Larutkan PCA dengan aquades, aduk hingga homogen
- Didihkan media di dalam Erlenmeyer tanpa membuka tutup
Persiapan Cawan Petri
- Sediakan 3 cawan petri berlabel:
- Blangko
- Pengenceran 10^-2
- Pengenceran 10^-3
- Tuang media PCA yang mendidih ke dalam cawan petri secara aseptis
- Biarkan media memadat
Sampling
- Sampel: Air keran
- Sterilkan ujung keran dengan membakar
- Biarkan air keran mengalir beberapa menit
- Ambil sampel air keran menggunakan botol sampel steril
Pengenceran Bertingkat
- Siapkan 3 tabung reaksi berlabel 10^-1, 10^-2, dan 10^-3
- Isi masing-masing tabung dengan 9 ml aquades
- Ambil 1 ml sampel air keran:
- Tuang ke tabung 10^-1, homogenkan
- Ambil 1 ml dari tabung 10^-1 ke tabung 10^-2, homogenkan
- Ambil 1 ml dari tabung 10^-2 ke tabung 10^-3, homogenkan
Proses Inokulasi
- Ambil 1 ml dari tabung 10^-2, tanamkan ke media berlabel 10^-2
- Gunakan metode spread plate dengan kawat Ose berbentuk L atau glass rod
- Sebar sampel merata
- Ulangi dengan sampel dari pengenceran 10^-3
Inkubasi
- Tempatkan cawan petri terbalik dalam inkubator
- Inkubasi selama 24 jam pada suhu 30°C
Perhitungan Mikroba
- Hitung koloni mikroba secara langsung atau dengan koloni konter
- Catat hasil pengamatan
Kesimpulan
- Proses praktikum TPC selesai
- Metode ini berguna untuk menghitung jumlah mikroba tanpa mikroskop
Catatan Tambahan
- Like dan subscribe untuk lebih banyak informasi
Sampai jumpa di pertemuan berikutnya!