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Testing for the Biochemical Identification of Bacteria

हाई गाइस इस वीडियो में हम Biochemical Identification of Bacteria इसके बारे में पढ़ेंगे देखिए बैक्टेरिया को हम Chemical Basis पे भी Identify कर सकते हैं इसके लिए हम Different Test परफर्म करते हैं जो test हम commonly use करते है all bacteria के case में उनके name है catalytic test and oxidase test अब है test for gram negative bacteria देखिए specifically हम gram negative bacilli के लिए ये test करते है इसका mnemonic से I cut I से आता है indole test C से citrate utilization test तो U से urea hydrolysis test और T से triple sugar ion test अब है test for gram positive bacteria इसमें भी भी स्पेसिफिकली ग्राम पॉजिटिव कोकाई के लिए किये जाते हैं उसमें आते हैं कोया गुलेट्स टेस्ट देन कैम टेस्ट देट इस क्रिस्टी एटकिंस मंच पिटरसन टेस्ट देन नेक्स्ट ए बाय एसक्यूलिन हाइड्रोलिसिट टेस्ट नेक्स्ट इस द लाइट टोलरेंट टेस्ट देन इनुलिन फर्मेंटेशन टेस्ट एंड लास्ट वन इस द बाय सोल्यूबिलिटी टेस्ट देखिए इस वीडियो में हम कॉमन टेस्ट एंड टेस्ट फॉर ग्राम निकेटिव बैक्टीरिया यह डिस्कस करेंगे और और जो हमारा next video आएगा उसमें हम पढ़ेंगे test for gram positive bacteria first common test हम use करते हैं वो है catalyst test ये दोनों bacteria के case में हम करते है gram positive and gram negative देखिए इसमें क्या होता है तो इसमें हम bacterial colonies को hydrogen peroxide के साथ mix करते है और यदि उस bacteria के अंदर catalyst enzyme present होता है तो वो इस hydrogen peroxide का oxidation करते हैं और वहाँ पे O2 produce करते हैं और क्या होता है जो smear होता है वहाँ से effervescence और bubbles appear होने लगते हैं तो जब effervescence और bubble appear होते हैं तो यह हम कहते हैं कि यह taste positive मतलब उन bacteria में catalyst enzyme present है ओके अब catalyst positive के जो example से वो है staphylococcus species मतलब staphylococcus aureus like this ओके and catalyst negative में आते हैं राजोबैक्टर एंड सर्पेंस ओके एग्जांपल से कैटलेज निगेटिव बैक्टीरिया की देखिए सेकंड कॉमन मेथड हम यूज करते हैं जो कि ऑक्सिडेज टेस्ट ओके तो इसमें क्या करते हैं इसमें हम डिटेक्ट करते हैं साइटोक्रोम ऑक्सिडेज एंजाइम क से उसे ऑक्सिडाइज करता है विद थे पॉइंट टोक्रम ऑक्सिडेज एंजाम अब यह टेस्ट कैसे परफॉर्म किया जाती है देखिए हम फिल्टर पेपर लेते हैं जो कि हम सोक करते हैं ऑक्सिडेज रिएजेंड में ओके ऑक्सिडेज रिएजेंड में हम सोक करते हैं और उसके बाद इस पेपर को हम स्मिए करते हैं बैक्टेरियल कॉलनीज के साथ तो क्या होता है जब हम ऑक्सिडेज रिएजेंड और बैक्टेरियल कॉलनीज स्मिए करते हैं तो यदि उस बैक्टीरिया में साइटोक्रम ऑक्सिडेज एंजाम पर्सेंट होता है तो जो स्मिए का कलर होता है वो डिप परपल हो जाता है 10 सेकंड के अंदर ये प्रोसेस हो जाती है देखिए positive के case में हमें दिखाई दे रहा है smear का color पूरा deep purple हो गया है तो इसमें एक compound form होता है जिसे हम कहते हैं endophenol blue ओके endophenol blue ये form होता है किससे जब हम oxidase reagent यूज़ करते है जो कि bacterial colonies के साथ complex form करता है उस complex का नाम है endophenol blue और ये form होता है because the activity of enzyme cytochrome ओक्सिडेज ओके नाओ देखिए ओक्सिडेज पॉजिटिव जो बैक्टीरिया है उनके नेम है सूडो मोनार्च तो वीब्रियो एंड बैसिलेस इन तीनों के स्पेसिस ओक्सिडेज पॉजिटिव टेस्ट दिखाते है और ओक्सिडेज निगेटिव है एंटेरो बैक्टीरि और एकिनेटो बैक्टर यह है जो ऑक्सीडिज टेस्ट निगेटिव आते हैं अब देखिए हमने कॉमनेट टेस्ट देख ली अब है जो टेस्ट हम ग्राम निगेटिव बैसिला के केस में करते हैं उसमें फर्स्ट है इंडॉल्ट टेस्ट तो इंडॉल्ट टेस्ट के किया जाते है क्या होता है in the test में हम mainly detect करते है जिस bacteria में enzyme present होता है जिसका नाम है tryptophanase ओके tryptophanase enzyme जिस bacteria में present होता है वो in the test से identify होती है अब देखे tryptophanase क्या करता है तो ये breakdown करता है amino acid tryptophan को into इंडॉल ओके यह है इंडॉल टेस्ट तो क्या होता है देखिए इस मेथड में हम कोवेक्स रियाजेंट यूज करते हैं जो कोवेक्स रियाजेंट होता है वो कॉम्प्लेक्स फॉर्म करता है इंडॉल के साथ और इस दोनों के कॉम्प्लेक्स के वज़े से जो हम टेस्ट ट� yellow color की दिखती है ओके तो इसके examples क्या है तो indole positive red color ring दिखायते है वो है E-coli then Vibrio cholerae and जो indole negative है yellow color ring वो form करते है उनका नाम है Klebsiella pneumoniae then Proteus mirabilis and Pseudomonas sp. इसमे second test है Citrate utilization test देखिए इसमे क्या होता है तो इसमे हम detect करते है जो bacteria utilize करते है Citrate को ओके तो वो Citrate as a source of carbon use करते है जो कि उनके growth के लिए IMP होता है और उसे utilize करने के बाद वो alkaline metabolic products form करते है तो क्या होता है देखिए ये test हम perform करते है Simpson's citrate medium वेबिबाउथ IMP है Simpson's citrate medium इस पे question आते है ओके और ये test positive है ऐसे कब दिखता है जब जो smear हम लेते है उसका color green to blue change होता है तो हम उसे कहते है citrate utilization test और ये test positive होती है देखिए green to blue color जब होता है तो ये positive होती है अब इसके जो example से देखिए citrate test positive है, klebsiella pneumonia, then citrobacter and enterobacter ये citrate test positive दिखाते हैं और negative दिखाते हैं E. coli and shigella, okay, third test है urea hydrolysis test इसमें हम जो bacteria urease enzyme produce करते है उनको identify करते है तो ये कैसे किया जाता है देखिए Urease enzyme Urea को split करता है और ये form करता है Ammonia और Ammonia के वज़े से ये medium alkaline हो जाता है ओके तो इसके basis पे हम Urea Hydrolysis test करते हैं ये principle है तो देखिए ये test हम करते है Christian Sen Urea medium के उपर तो इसमें क्या होता है तो इसमें Phenol indicator यूज़ करते है जो की red color का होता है और वो change हो जाता है pink color तो ये pink क्यों होता है क्योंकि जब हम यहां फॉर्म होता है तो उसके वजह से अल्कोलाइन मिडियम हो जाता है और यह जो रेड कलर इंडिकेटर था उसे कन्वर्ट करता है पिंक कलर में देखिए पॉजिटिव के केस में पिंक दिखाई दे रहा है अब इसके एग्जांपल से जो पॉजिटिव आते हैं वो है क् नम राम निगेटिव बैक्टरिया को आइडेंटिफाइड करने के लिए इसका जो टीएस आई मीडियम होता है वह फॉर्म होता है तीन शुगर से जो कि एक नुकोथ सुक्रोज एंड लैक्टोथ और इनका रेशियो होता है वन ऐसे टू टेन ओके और एक पार्ट्स में होती है अब ऐसे कंसिडर करते हैं अब देखिए इनिचियल जो टीएस आई मीडियम होता है उसका कलर होता है रेड और इसके साथ होता है स्लांट एंड बट स्लांट मतलब क्या देखिए इस टेस्ट में यह जो फॉर्म हुआ है लाइट कलर यह स्लांट और जो dark color है इसे हम कहते है but अब इस test से 3 properties of bacteria हम identify कर सकते हैं जो की है कौन से bacteria acid produce करते है कौन से gas produce करते है और कौन H2S produce करते है acid production acid producing bacteria को हम 3 types में divide करते है जो की आते है non fermenters और glucose only fermenters और greater than equal to sugar fermenters first ए glucose fermenter ये bacteria कोई कोई भी शुगर को फर्मेंट नहीं करते इसलिए जो मीडियम का कलर होता है वह रेडी रहता है और हमें पता है इनिशियल भूत बट एंड स्लांट दोनों भी अल्कालाइन होते हैं तो इस रिएक्शन में वह दोनों अल्कालाइन नहीं रहते हैं और इससे हम डिनोट करते हैं के से ओके इसके एग्जांपल से सुडो मोना एंड एक्सी नीटो बैक्टर सेकंड है ग्लुकोज ओनली फर्मेंटर यह ग्लुकोज को फर्मेंट करते हैं और इसके वजह से लिटिल एसिड फॉर्म होता है बट में ओके देखिए बट में एसिड फॉर्म होता है होता है लिटिल तो इससे क्या होता है जो अल्कालाइन बट होता है वह कन्वर्ट हो जाता है एसीडिक बट में इसलिए इस रिएक्शन को हम कहते हैं कि एडिएशन मतलब अल्कालाइन स्लांट एंड एसीडिक बट ओके इसके एग्जांपल से सैलमोनेला एंड शिगेला नाउ नेक्स्ट ए ग्रेटर थैन इक्वल टू शुगर्स फर्मेंटर मतलब वह दो या उससे ज्यादा सुगर को फर्मेंट करते हैं इसके वजह से क्या होता है लार्ज अमांट ऑफ एसीड फॉर्म होता है और वह दोनों में फॉर्म होता है स्लांट में भी और बट बर्ट में भी ये दोनों में वो form होता है और इसके वज़े से क्या होता है medium का color change होता है yellow क्योंकि यहाँ पे acid form हुआ है तो देखिए इसमें हम जो reaction को denote करते है वो AA से करते है इसके example से E.coli and Klebsiella अब second group में आते है gas producing bacterias ये क्या करते है तो ये gas produce करते है और हम यदि वो test tube में लेते है तो वो crack हो जाता है क्योंकि pressure increase होता है होता है गैस के वजह से इसके एग्जांपल से इकोला एंड क्लेपसेला एंड थर्ड वन है इस टू एज प्रोडक्शन यह बैक्टीरिया क्या करते हैं यह मीडियम का कलर चेंज करते हैं जो कि चेंज होता है ब्लैक में ओके इसके एग्जांपल से सैल्मोनेला टाइफी एंड प्रोटीएस वॉल्गेरीज ओके यह हो गए हमारे जो कि ग्राम निगेटिव बैसिलाई के एडेंटिफिकेशन से हम यूज करते हैं टेस्ट वह और जो कॉमनेश टेस्ट जैसे कि कैटलेस एंड ऑक्सिडेस इन सबके बारे में नेक्स्ट वीडियो में हम पढ़ेंगे जो कि पॉजिश पॉजिटिव ग्राम पॉजिटिव बैक्टेरियल और ग्राम पॉजिटिव को काई के लिए टेस्ट करते हैं वह पढ़ेंगे देखिए यह पीपीटी आपको चाहिए तो मुझे कमेंट सेक्शन में आप मेसेज कीजिए और वीडियो को लाइक कीजिए अमारे चैनल को सब्स