Prosedur Pengujian Mikroorganisme Aseptik

Aug 29, 2024

Prosedur Pengujian Mikroorganisme

Persiapan Alat dan Bahan

  • Reaksi steril: Pembakar spiritus, korek api, pipet mikro, petri, ukur steril, voltiped, mixer, inkubator oven, otoklas steril, dan media NA atau PDA.
  • Etanol 70% untuk membersihkan meja.

Langkah-langkah Prosedur

  1. Pembersihan Meja

    • Bersihkan meja kerja dengan etanol 70%.

  2. Persiapan Cawan Petri

    • Ambil cawan petri steril.
    • Tuliskan kode kelompok dan tanggal pada permukaan luar dasar cawan.
    • Beri nomor di bagian atas cawan.

  3. Penyiapan Tabung Reaksi

    • Ambil 6 tabung reaksi berisi air steril (masing-masing 9 ml).
    • Beri penomoran pada tabung reaksi.

  4. Pengocokan Campuran Bakteri

    • Setelah tabung berisi media cair, kocok tabung reaksi berisi suspensi campuran bakteri dengan gerakan ke samping.
    • Pastikan tutup tabung tidak basah.

  5. Pindah Campuran Biakan

    • Ambil 1 ml campuran biakan secara aseptik dengan pipet mikro.
    • Pindahkan ke tabung reaksi.
    • Lakukan pengocokan.
    • Ambil 1 ml dari tabung reaksi 1 dan pindahkan ke tabung reaksi 2, lalu lakukan pengocokan.
    • Ulangi proses ini hingga tabung reaksi ke-5.

  6. Pindah ke Petri Dish

    • Dari masing-masing tabung reaksi, pindahkan 1 ml campuran biakan secara aseptik ke 5 petri dish steril.
    • Beri penomoran dan keterangan pengenceran sesuai asal biakan tabung.

  7. Penambahan Agar Cair

    • Tambahkan agar cair bersuhu kurang lebih 40 derajat Celsius secukupnya ke dalam petri dish secara aseptik.

  8. Proses Pencampuran

    • Putar-putar cawan petri searah jarum jam sebanyak 5 kali.
    • Putar berlawanan arah jarum jam sebanyak 5 kali.
    • Putar hingga membentuk angka 8 sebanyak 5 kali.
    • Biarkan agar beku.

  9. Pembungkusan dan Inkubasi

    • Bungkus cawan petri dengan kertas pembungkus.
    • Inkubasi selama 2x24 jam dalam inkubator oven dalam keadaan terbalik (tutup di bawah) pada suhu yang sesuai.

Observasi Setelah Inkubasi

  • Ambil cawan petri dan buka dari pembungkusnya.
  • Amati:
    • Diameter koloni
    • Warna
    • Ketinggian
    • Kepian
    • Bentuk
    • Kontur

Dengan langkah-langkah di atas, kita dapat melakukan pengujian mikroorganisme secara sistematis dan aseptik.