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बायोटेक्नोलॉजी के सिद्धांत और प्रक्रियाएँ

हेलो मेरे सभी नादान परिंदों कैसे हैं आप लोग आई वेलकम यू ऑल इन अनदर लेक्चर उम्मीद सीरीज के अंदर आज हम बायोटेक प्रिंसिपल एंड प्रोसेसेस के चैप्टर को अपनी मुट्ठी में करेंगे यह बहुत इंपॉर्टेंट यूनिट है और बहुत स्कोरिंग यूनिट है बहुत प्यारी सी यूनिट है रटने का कम समझने का ज्यादा है और दोनों चैप्टर से मिलाकर 7 8 ना क्वेश्चंस तक आ जाते हैं यानी बहुत ज्यादा स्कोरिंग यूनिट है तो क्या आप तैयार है मेरे साथ तो आइए चेहरे पे माइल आंखों में चमक मन में फुल पॉजिटिविटी उस स्टेथोस्कोप के लिए आशीर्वाद लेते हैं अपनी बायोलॉजी माता का बोलो बायोलॉजी मैया की जय हो आइए समझे सबसे पहले बायोटेक्नोलॉजी का मतलब क्या है बायो का मतलब लिविंग और टेक्नोलॉजी मतलब तकनीक कोई भी तकनीक जिससे लिविंग ऑर्गेनिस्ट मस का यूज करके ह्यूमन बेनिफिट कराया जाए उसे बायोटेक्नोलॉजी कहेंगे इस चैप्टर में हम ये तकनीकें करने के पीछे के सिद्धांत प्रिंसिपल और प्रक्रिया प्रोसेस पढ़ेंगे और नेक्स्ट चैप्टर में कहां-कहां यूज होता है उसे पढ़ेंगे अब यह बहुत पुरानी विद्या है यह कोई आज की नई साइंस नहीं है सालों से हमारी दादी नानिया परदादी पर नानिया दही जमाती आ रही है दही में हम क्या करते हैं दूध के अंदर जो लैक्टोबैसिलस बैक्टीरिया है वो हमें हेल्प कर रहा है कर्ड मेकिंग में ब्रेड बियर इसमें सालों से जीस्ट का यूज होता आ रहा है यहां एक लिविंग ऑर्गेनिस्ट म को यूज करकर ह्यूमन बेनिफिट किया जा रहा है तो यह सब बायोटेक्नोलॉजी के अंदर ही आता है आइए अब हम बायोटेक्नोलॉजी को स्टार्ट करते हैं तो बायोटेक्नोलॉजी का सिंपल सा मतलब है वो सभी टेक्निक्स जिसमें हम लाइव ऑर्गेनिस्ट म या एंजाइम्स को यूज करेंगे ताकि हम इसे प्रोडक्ट्स या प्रोसेसेस बना सके जो ह्यूमंस के लिए यूजफुल है जैसे कर्ड बनाना ब्रेड बनाना वाइन बनाना इन सब में माइक्रोब्स यूज होते हैं अब एक्चुअली पहले होल ऑर्गेनिस्ट म यूज होता था पूरा बैक्टीरिया यूज हो रहा है पूरा यीस्ट यूज हो रहा है पर अब हम उसका वो जीन यूज करेंगे जो एक्चुअली एमआरएनए और वो पर्टिकुलर डिजायर्ड प्रोडक्ट बनाने के लिए जिम्मेदार है आप इसको ऐसा समझिए कि मान लीजिए कि इंसान का ह्यूमन इंसुलिन बनाने वाला जो जीन है हमने उसे कट कर लिया अब इतना इजी नहीं है वही तो हमें सीखेंगे हम कैसे कट करेंगे तो हमने इंसुलिन बनाने वाले जीन को कट करा उसे मैंने प्लाज्मिड के साथ जो जोड़ दिया बैक्टीरिया के अंदर जो प्लाज्मिड होता है क्योंकि वो सेल्फ रेप्ट केटिंग अपनी कॉपीज बना सकता है इसे जोड़ा ये बन गया आरडीएनए वेक्टर प्लस डिजायर्ड जीन ये बन गया आर डीएनए र कॉमिनेशन डीएनए और मैंने इसे एक इकलाई बैक्टीरिया में डाल दिया क्योंकि बैक्टीरिया बहुत फास्ट मल्टीप्लाई करते हैं उसके अंदर मेरा आरडीएनए भी फास्ट मल्टीप्लाई करेगा और मेरा जो डिजायर्ड जीन है वो एक्सप्रेस होकर प्रोटीन यानी इंसुलिन बनाएगा उस ई कोलाई के अंदर तो मुझे बहुत कम टाइम में ढेर सारा इंसुलिन मिल जाएगा और वो भी ह्यूमन जीन से प्रोड्यूस्ड तो कोई इम्यूनोलॉजिकल फॉरेन रिएक्शंस भी नहीं होंगी कितना जबरदस्त तरीका है ये मैंने आपको एक एग्जांपल दिया यहां पर वो जो इ कोलाई है जिसके अंदर मैंने अपना फॉरन जीन डाला है आर डीएनए डाला है कहीं ना कहीं मैंने उसके जेनेटिक्स को बदलाव कर दिया है तो उस इकलाई को कहेंगे होस्ट या जेनेटिकली मॉडिफाइड ऑर्गेनिस्ट म तो अगर हम रिसेंट ऐसे बात करें तो यहां पर हम जेनेटिकली मॉडिफाइड ऑर्गेनिस्ट मस का यूज करेंगे लार्ज स्केल पर उस प्रोडक्ट को पाने के लिए और भी एग्जांपल्स दिए हुए हैं जैसे आईवीएफ टेस्ट ट्यूब बेबी हमने रिप्रोडक्टिव हेल्थ में पढ़ा है एक जीन बनाना जीन थेरेपी हम पढ़ेंगे कैसे यहां पे माइक्रोब्स का यूज होगा डीएनए वैक्सीन बनाना या किसी डिफेक्टिव जीन को करेक्ट करना तो ये एग्जांपल जो है एनसीआरटी के हमें आने चाहिए ईएफबी ये फुल फॉर्म आपको आना चाहिए यूरोपियन फेडरेशन ऑफ बायोटेक्नोलॉजी इन्होंने कहा कि कभी-कभी पूरा ऑर्गेनिस्ट म यूज करना पड़ता है जो ट्रेडिशनल व्यू है और कभी-कभी हम सिर्फ डिजायर्ड जीन को यूज करेंगे जो नया व्यू है यानी इन्होंने ट्रेडिशनल व्यू और मॉडर्न मॉलिक्यूलर बायोलॉजी दोनों को जॉइन कर कर एक परिभाषा दी है परिभाषा यह दी है कि हमें हो सकता है पूरा ऑर्गेनिस्ट म यानी सेल उसका कोई पार्ट उसका कोई मॉलिक्यूल यूज करें और उसमें फिजिक्स केमिस्ट्री भी लगेगी टेक्नोलॉजी लगेंगी बायो रिएक्टर्स बनेंगे कई टेक्निक्स लगेंगी तब जाकर कोई प्रोडक्ट या सर्विस मिलेगी मैनकाइंड के लिए यानी इट इज इंटीग्रेशन ऑफ नेचुरल साइंस नेचुरल साइंस मतलब फिजिक्स केमिस्ट्री मैथमेटिक्स और साथ में होल ऑर्गेनिस्ट म या उसका सेल या उसका मॉलिक्यूल ताकि डिजायर्ड प्रोडक्ट जैसे इंसुलिन मिल रहा है दही बन रहा है या कोई सर्विस जैसे हम सीखेंगे अलाइज वगैरह हमें मिले तो अब आइए हम बात करते हैं कि आखिर बायोटेक्नोलॉजी का सिद्धांत क्या हो होगा देखो बहुत सिंपल है एक सिद्धांत है जेनेटिक इंजीनियरिंग ऐसा समझो कोई बच्चा होता है छोटा हम उसे कब कहते हैं कि ये बड़ा इंजीनियर टाइप का है ये तो ये तो लगता है इंजीनियर बनेगा जब उसको खिलौने लाके दो और वो फटाफट से सब कुछ खोल देता है तोड़ देता है इधर उधर कर देता है बोल ये तो बड़ा इंजीनियर टाइप का है तो यहां पर हम क्या कर रहे हैं हम हम वो जो इ कोलाइज जिसके अंदर हम अपना फॉरन डीएनए डाल रहे हैं हम उसके जेनेटिक्स को अल्टर कर रहे हैं चेंज कर रहे हैं इंजीनियरिंग कर रहे हैं तो जेनेटिक इंजीनियरिंग है पहला सिद्धांत जेनेटिक इंजीनियरिंग का मतलब वो सभी टेक्निक्स जिससे हम बदलाव करेंगे उसके जेनेटिक मटेरियल के अंदर मोस्टली डीएनए सम टाइम्स आरएनए और फिर हम इस फॉरन डीएनए को होस्ट के अंदर डालेंगे और होस्ट का फेनोटाइप भी हम चेंज कर रहे हैं क्योंकि होस्ट के अंदर इ कोलाई के अंदर अब ह्यूमन इंसुलिन बन रहा है जो नॉर्मल नहीं होता तो पहला सिद्धांत है जेनेटिक इंजीनियरिंग जहां पर हम डीएनए आरएनए जेनेटिक मटेरियल की केमिस्ट्री को को चेंज कर रहे हैं उसे होस्ट के अंदर डाल रहे हैं और होस्ट का फेनोटाइप भी चेंज हो रहा है अब जब मैंने ई कोलाई के अंदर मेरा आर डीएनए डाला जिसमें मेरा फॉरन जीन है इंसुलिन बनाने वाला अब मुझे इस ई कोलाई को कल्चर करना है लार्ज स्केल पे ताकि बहुत कम टाइम में बहुत सारे ई कोलाई बने उन सबके अंदर आरडीएनए आ जाए उन सबके अंदर ह्यूमन इंसुलिन बन जाए मान लो मैंने इसे एक रिएक्टर में डाला बायोरिएक्टर में पर वह पहले से कोई दूसरा बैक्टीरिया भी मौजूद था उसने सारा खाना पना यूज कर लिया उसकी ग्रोथ हो गई हमारा ही कोलाई बेचारा मर गया ये तो सब वेस्ट हो जाएगा तो केवल जेनेटिक इंजीनियरिंग करने से काम नहीं चलेगा मुझे इसे स्टराइल यानी कंटेम फ्री एंबिएंस वातावरण भी देना पड़ेगा ताकि सिर्फ ग्रोथ हो डिजायर्ड वाले माइक्रोब की ताकि लार्ज क्वांटिटी में मुझे प्रोडक्ट मिले जो भी प्रोडक्ट है एंटीबायोटिक वैक्सीन एंजाइम हार्मोन जो भी इसे कहते हैं बायो प्रोसेस इंजीनियरिंग उस प्रोसेसिंग के टाइम भी मुझे इंजीनियरिंग करनी पड़ेगी इसमें हम बायो रिएक्टर्स की बात अभी करेंगे यानी हम यह समझ गए हैं कि दो सिद्धांत है एक जेनेटिक इंजीनियरिंग और दूसरा बायोप्रोसेस इंजीनियरिंग बायोप्रोसेस इंजीनियरिंग में हम प्रोसेस को कंटेम फ्री बनाएंगे ताकि सिर्फ डिजायर्ड माइक्रोब की ग्रोथ हो जिसके अंदर हमारा आर डीएनए फॉरन जीन है बाकियों की ना हो अब यहां पर यह बात लिखी हुई है कि जब हम सेक्सुअल रिप्रोडक्शन की बात करते हैं तो सेक्सुअल रिप्रोडक्शन जो है उससे चेंजेज आते हैं क्योंकि सेक्सुअल रिप्रोडक्शन में आपको पता है क्रॉसिंग ओवर होती है वेरिएशंस होते हैं बट अगर एसेक्सुअल रिप्रोडक्शन की बात करें तो इट प्रिजर्व्स दी जेनेटिक इंफॉर्मेशन क्योंकि वहां तो मयोसिस होगा ही नहीं तो वहां पर क्रॉसिंग ओवर होगी ही नहीं तो सेक्सुअल रिप्रोडक्शन जो होता है यह वेरिएशंस परमिट करता है और एसेक्सुअल रिप्रोडक्शन जो है वह जेनेटिक इंफॉर्मेशन को प्रिजर्व करता है ट्रेडिशनल हाइब्रिडाइज्ड इइ जेशन का मतलब एक गाय है बहुत अच्छी दूध देने वाली पर बीमार हो जाती है एक बैल है बड़ा स्ट्रांग हमने उनकी मीटिंग कराई हम एक्सपेक्ट कर रहे हैं कि जो बछड़ा होगा वो होगी वो मां की तरह दूध भी बढ़िया दे और पिताजी की तरह उसकी लट भी ज्यादा हो जाए रेजिस्टेंस इम्युनिटी भी अच्छी हो जाए पर इसमें कोई गारंटी नहीं है कि ऐसा होगा हो सकता है दोनों के नेगेटिव कैरेक्टर्स भी आ जाए ये तो चांस की बात है तो जो ट्रेडिशनल हाइब्रिडाइज्ड इट ऑफें लीड टू इंक्लूजन एंड मल्टीप्लिकेशन ऑफ अनडिजायरेबल जीन अलोंग विद डिजायरेबल जीन यह लिमिटेशन है और इस लिमिटेशन को हम काटेंगे जेनेटिक इंजीनियरिंग से बायोटेक्नोलॉजी से क्योंकि यहां पर अगर मुझे वो गाय का अच्छी क्वांटिटी में गुड क्वालिटी में दूध बनाने वाला जीन पता चल जाए तो मैं उस जीन को उस गाय से निकाल के या लैब में आर्टिफिशली बनाकर सिर्फ उसे ही इंट्रोड्यूस करूंगी नेक्स्ट और ऑर्गेनिक मुझे 100% केवल अच्छा कैरेक्टर मिले तो ये जो टेक्निक्स है इसमें सबसे पहले हम आर डीएनए बनाएंगे फिर हम उसे ट्रांसफर करेंगे इससे हम इस लिमिटेशन को ओवरकम करेंगे केवल डिजायर्ड जीन ही हमें मिलेंगे और अनडिजायर्ड जीन को तो हम ट्रांसफर ही नहीं करेंगे तो डिफरेंस समझ आया ट्रेडिशनल हाइब्रिडाइज्ड चलिए अब हम बात करते हैं कि यह जो पीस ऑफ डीएनए है जो आपने डाला है होस्ट के अंदर इट शुड बी एबल टू मेक इट्स मल्टीपल कॉपीज मान लो आपने आरडीएनए बनाया आपने इकलाई होस्ट के अंदर डाला पर वो मल्टीप्लाई नहीं हो रहा होस तो मल्टीप्लाई हो रहा है पर प्लाज्मिड जिसके अंदर आपका फॉरेन डीएनए भी है वेक्टर के साथ जुड़ा हुआ वो मल्टीप्लाई नहीं हो रहा तो ये सब वेस्ट हो जाएगा यानी इट इज वेरी वेरी इंपॉर्टेंट दैट दैट वो होस्ट के नम के साथ जुड़े और मल्टीप्लाई हो और फिर उसके बच्चों में जो और इ कोलाई बन रहे हैं उनमें ट्रांसफर भी हो तभी जाकर हमारा पूरा पर्पस सॉल्व होगा और यही कारण है कि जिस वेक्टर के साथ आप फरन डीएनए जोड़कर भेजोगे उसके पास ओरिजन ऑफ रेप्ट साइट होनी चाहिए यानी उसके पास वो जीनस होने चाहिए जिससे कि रेप्प यानी मल्टीपल कॉपीज बनाना शुरू हो सके आया समझ में यानी अगर कोई शॉर्ट में पूछे तो हम यह कह सकते हैं कि बेसिकली हमें क्या करना है हमें अपना फॉरन डीएनए कट करा एक ऐसे वेक्टर के साथ जोड़ो जिसमें काबिलियत है अपना रेप्स करने की मल्टीपल कॉपी बनाने की तो हमारे फॉरन जीन की भी मल्टीपल कॉपी बन जाएंगी यानी उसके पास मौजूद है एक स्पेसिफिक जीन सीक्वेंस जिसे ओरिजिन ऑफ रेप्ट केशन कहते हैं तभी वो अपने आप को मल्टीप्लाई करें होस्ट के अंदर और अपनी मल्टीपल आइडेंट कल कॉपीज बनाएगा और जब कार्बन कॉपीज बनेंगी और होस्ट मल्टीप्लाई करेगा डिवाइड करेगा नेक्स्ट जनरेशन बनाएगा उसमें भी पहुंचेंगी तभी हमें लार्ज स्केल पर प्रोडक्ट मिलेगा बताओ मुझे कार्बन कॉपी बनाने को क्या बोलते हैं एसेक्सुअल रिप्रोडक्शन और क्लोनिंग तो यही तो है जीन क्लोनिंग जीन की मल्टीपल कॉपीज बनेगी जो धीरे धीरे धीरे हम सब सीखेंगे तो आइए सबसे पहले बात करते हैं कि पहला आर डीएनए किन्होला था चलिए आइए लिखिए मेरे साथ सबसे पहले दो साइंटिस्ट हुए हैं स्टैनले कोहन एंड हरबर्ट बोयर हरबर्ट बोयर इंपॉर्टेंट है दोनों के नाम एनसीआरटी में बात है 1972 की और कुछ हुआ था क्या 1972 में एनसीआरटी की बायोलॉजी में दिया हो जो वेरी गुड प्लाज्मा मेंब्रेन का सिंगर एंड निकोलसन जी का फ्लूइड मोजाइक मॉडल भी 1972 में दिया गया था तो कोहन और बोयर ने 1972 में क्या किया इन्होंने पहला आर डीएनए बनाया फर्स्ट आर डीएनए क्रिएटेडॉक्युमेंट्सफ्रैगमेंट मरियम इंपॉर्टेंट है एनसीआरटी में दिया है साल्मोनेला टाइफी मूरियंकारा डबल स्ट्रैंडेड जो इस बैक्टीरिया की लाइफ चलाने के लिए रिप्रोडक्शन में डॉटर सेल्स में वो सब जाएगा लेकिन आपको पता है कि कुछ बैक्टीरिया में छोटे-छोटे और भी पीस होते हैं क्या कहते हैं इन्हें प्लाजमिड्स तो इस साल्मोनेला टाइफी यूरियम के अंदर भी प्लाज्मिड मिलते हैं प्लाज्मिड क्या होता है प्लाज्मिड मेन डीएनए के अलावा यानी एक्स्ट्रा क्रोमोसोमल होता है हां यह भी सर्कुलर है यह भी डबल स्ट्रैंडेड डीएनए है एक-एक वर्ड इंपॉर्टेंट है और इसके पास एक काबिलियत है एक एबिलिटी है कि खुद अपनी मल्टीपल कॉपीज बना सकता है इसके पास खुद का ओराई है ओरिजिन ऑफ रेप्ट खुद रेप्ट कर सकता है यानी ऑटोनोमस या सेल्फ रेप्ट है तो हम इसे वेक्टर की तरह यूज करेंगे यूज्ड एस वेक्टर अभी समझाती हूं इसका मतलब अभी समझाती हूं अब आपको पता है कि जब भी प्लाज्मिड होता है कोई भी तो वो डीएनए है तो उस कुछ जीनस होंगे स्पेशल कैरेक्टर के लिए इस साल्मोनेला टाइफी मूरियूड है सपोज मैं एक प्लाज्मिड बाहर निकाल के दिखाती हूं आपको सपोज ये प्लाज्मिड है तो इसके पास कुछ स्पेशल जीनस थे जो पर्टिकुलर एंटीबायोटिक से रेजिस्टेंस देते थे एंटी बायोटिक रेजिस्टेंट जीन इसका क्या मतलब है समझो इसका मतलब ये है मान लो अगर ये एमपी सिलिन एंटीबायोटिक रेजिस्टेंट जीन है तो ऐसे साल्मोनेला टाइफी मरियम को अगर हमने एंपीसिलीन एंटीबायोटिक के मीडियम में डाला तो वो रेजिस्टेंट रहेगा मरेगा नहीं जिंदा रहेगा तो यही मेरा डिजायर्ड जीन है डिजायर्ड जीन बेटा डिजायर्ड जीन को फॉरन जीन भी कहते हैं डिजायर्ड जीन फॉरन जीन या यही मेरे काम का है मेरी पसंद का है तो इसे ही जीन ऑफ इंटरेस्ट भी कहते हैं जीन ऑफ इंट रेस्ट उन्होंने क्या किया एक साल्मोनेला टाइफ मरियम बैक्टीरिया लिया उसका एक प्लाज्मिड निकाला और यह पीस कट कर दिया यह पीस कट कर दिया यह कट कर दिया कट अब ये कट करना क्यों पॉसिबल हुआ क्योंकि कैची ढूंढ ली गई थी जो हम अभी आगे पढ़ेंगे रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लीज की खोज ऑलरेडी हो गई थी तो हम यहां लिख सकते हैं कि दिस कटिंग बिकम पॉसिबल ड्यू टू डिस्कवरी ऑफ रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लीज जी हां रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस जो है यह 1963 में ही खोज लिए गए थे मैं अभी बताऊंगी जबकि यह 1972 में कंस्ट्रक्ट हो रहा है तो उन्होंने यह पीस कट किया और यह बचा हुआ पीस जो है इसे भी यूज करेंगे वेक्टर की तरह और इन दोनों को जोड़ दिया अब एक बड़ी इंपोर्टेंट बात सुनना इन्हें जोड़ दिया जोड़ा किससे इन्होंने डीएनए लागेज एंजाइम से आपको पता है लाइ गज का मतलब ही होता है जो जॉइन करता है अब आप कहोगे मैम अगर जॉइन ही करना था तो काटा क्यों भाई वो यही तो देखना चाह रहे थे कि क्यासे कट करके वापस भी जुड़ता है फिर हम भले ही कहीं भी और का किसी एक बैक्टीरिया का सपोज इंसान का ह्यूमन इंसुलिन वाला जीन कट किया साल्मोनेला टाइफी रियम के प्लाज्मिड में से यह हिस्सा काट के अलग फेंक दिया और ह्यूमन इंसुलिन वाला जीन यहां फिट कर देंगे वो आगे एक्सपेरिमेंट हुए इन्होने इसीलिए इसे बेटा नेटिव प्लाज्मिड कहते हैं नेटिव प्लाज्मिड खुद का उसी बैक्टीरिया का जीन ऑफ इंटरेस्ट लिया और उसी बैक्टीरिया का वेक्टर लिया कट करा फिर वापस डीएनए लाइ से जोड़ दिया जब जोड़ दिया तो ये ऐसा बन गया इसमें इधर तो है अपना डिजायर्ड जीन या फॉरेन जीन या जीन ऑफ इंटरेस्ट इधर है वेक्टर बस इन दोनों को मिलाकर जो बना उसे कहते हैं आरडीएनए व्ट इज आरडीएनए डिजायर्ड जीन जब वेक्टर के साथ जुड़ जाएगा अब इन्होंने क्या किया इस आर डीएनए को ई कोलाई के अंदर डाला यह है इ कोलाई बैक्टीरिया इ कोलाई के पास एक तो खुद का जेनेटिक डीएनए य इसका खुद का जेनेटिक डीएनए है जिनोमिक डीएनए और इसके अंदर उन्होंने इंट्रोड्यूस कर दिया इस प्लाजमैक्लस्टर ट्रांसजेनिक क्योंकि इसकी जेनेटिक्स चेंज हुई है इसके अंदर आपने बाहर से कोई जेनेटिक्स ऐड करी है या जेनेटिकली मॉडिफाइड ऑर्गेनिस्ट म जेनेटिकली मॉडिफाइड ऑर्गेनिका जीएमओ ट्रांसजेनिक ऑर्गेनिकली मॉडिफाइड ऑर्गेनिस्ट इसे ही कहेंगे अब होगा क्या के अंदर जाने के बाद इसकी मशीनरी को यूज करके यह प्लाज्मिड अपनी मल्टीपल कॉपीज बनाएगा क्योंकि प्लाज्मिड खुद से रेप्ट कर सकता है और जब प्लाज्मिड की कॉपीज बनेंगी तो हमारा जो जीन है फॉरन जीन एंटीबायोटिक रेजिस्टेंट जीन वो भी मल्टीप्लाई होने लगा साथ में इस बैक्टीरिया के अंदर भी डिवीजन हुआ रिप्रोडक्शन यानी बाइनरी फिजन हुआ तो फिर एक से दो दो से चार ऐसे बनने लगे और उन सबके अंदर भी हमारा जो डिजायर्ड जीन है वो आने लग गया और यह सारे इ कोलाई भी एंटीबायोटिक रेजिस्टेंट हो गए नॉर्मली एंटीबायोटिक रेजिस्टेंस नहीं मिलता इ कोलाई में नॉर्मली इ कोलाई एंटीबायोटिक में डालने प मर जाते हैं पर अब ये इ कोलाई एंटीबायोटिक में डालने पर जिंदा रह रहे थे तो इस तरह से पहला आरडीएनए बनाया फर्स्ट आरडीएनए बनाया हरबर्ट बोयर एंड स्टैनले कोहन ने 1972 में साल्मोनेला टाइफ मरियम बैक्टीरिया लिया था एंटीबायोटिक रेजिस्टेंट जीन लिया था नेटिव प्लाज्मिड यूज किया था एस वेक्टर इ कोलाई यूज किया था एस होस्ट बस यह सारे क्वेश्चन बनेंगे यहां डन तो यह पूरा मैंने आपको बता दिया किसकी कटिंग हो रही है भाई कटिंग ऑफ डीएनए ऑफ कोर्स प्लाज्मिड क्या है पूरा डीएनए ही तो है तो ये सारा कुछ आई हैव एक्सप्लेंड यू एवरीथिंग एवरीथिंग क्लोनिंग हो रही है हमारे डिजायर्ड जीन की इनसाइड इकोला यानी अब अगर कोई पूछे आपसे कि बताइए तीन बेसिक स्टेप्स क्या है अगर आपको किसी ऑर्गेनिस्ट म को जेनेटिकली मॉडिफाइड बनाना है तो पहला स्टेप ये है कि आप डिजायर्ड जीन को आइडेंटिफिकेशन सा फॉरेन प्रोडक्ट चाहिए उसका फॉरेन जीन कौन सा है फिर वो जो आइडेंटिफिकेशन जनरेशन तो उसमें ट्रांसफर भी होना चाहिए कितना इजी तो है बताओ मुझे कहां रटना है तो सबसे पहले आइडेंटिफिकेशन होस्ट के अंदर मेंटेन करो और ट्रांसफर होना चाहिए टू प्रोजन हो गए तीनों बेसिक स्टेप्स आनंद आ गया मजे आ गए चलिए अब आइए हम बात करते हैं हम यह तो समझ गए कि इसके सिद्धांत क्या है अब हम बात करते हैं कि आखिर इसके लिए हथियार क्या लगेंगे अजार क्या लगेंगे क्योंकि यहां पर आप इंजीनियर बन रहे हैं तो आपके पास टूल्स होने चाहिए अब यहां पर लगने वाले हैं थ्री टूल्स तीन हथियार लगेंगे थ्री टूल्स प पले कुछ एंजाइम्स लगेंगे जिनकी हम बात करेंगे फिर जैसे रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लीज लग गया कट करने के लिए डीएनए लागेज लग गया जॉइनिंग के लिए दो एंजाइम तो हमने अभी देख लिए हैं फिर वेक्टर्स की बात करेंगे यानी वो टैक्सी बस जिसमें बिठाकर हम फॉरेन डीएनए को भेजेंगे और फिर होस्ट भाई ऐसा थोड़ी ना है कि किसी भी बैक्टीरिया में मैं वो आर डीएनए प्लाज्मिड वाला वेक्टर वाला डाल देती तो मल्टीप्लाई कर ही लेता तो उनके बीच में भी एक सामंजस्य होना चाहिए यानी कंपैटिबल होस्ट बस अब हमें इन तीन हथियारों के बारे में बात करनी है तो सबसे पहले हम बात करेंगे एंजाइम्स की एंजाइम्स एंजाइम्स में पहला एंजाइम जो लगेगा वह होंगे लाजस या लाइजिंग एंजाइम बेटा लाजस का मतलब क्या होता है बताओ तोड़ना ब्रेक करना किसे ब्रेक कर करेंगे समझो देखो मान लो मुझे ह्यूमन इंसुलिन जीन निकालना है इंसान के सेल में से तो सेल के अंदर एनिमल सेल है ये इंसान का ह्यूमन तो प्लाज्मा मेंब्रेन होगी न्यूक्लियर मेंब्रेन होगी फिर न्यूक्लियस आएगा फिर न्यूक्लियस के अंदर डीएनए अकेला नहीं है डीएनए आरएनए और हिस्टोन प्रोटीन नॉन हिस्टोन प्रोटीन यानी प्रोटीन ये सब मिलकर क्रोमेटिंग धागे के रूप में है तो मुझे पहले न्यूक्लियर मेंब्रेन तोड़नी पड़ेगी पहले प्लाज्मा मेंब्रेन न्यूक्लियर मेंब्रेन फिर आरएनए तोड़ना पड़ेगा हटाना पड़ेगा प्रो जीन हटाना पड़ेगा तब जाकर मुझे मेरा डीएनए मिलेगा अगर मान लो मैं प्लांट का कोई जीन लेना चाहती हूं तो उसमें तो सेल में सेल वॉल को भी तोड़ना पड़ेगा अगर फंगस का जीन है तो वहां पर भी मुझे सेल वॉल को भी तोड़ना पड़ेगा एलगी का है तो भी इवन बैक्टीरिया का अगर मैं लेना चाहती हूं जैसे अभी यहां पर बैक्टीरिया का लिया है तो वहां पर भी मुझे सेल वॉल को तोड़ना पड़ेगा यानी मुझे सेल को पूरा खोलना पड़ेगा डीएनए तक पहुंचना पड़ेगा फिर प्योर डीएनए को निकालना पड़ेगा तभी तो फिर मैं उसकी कटिंग बटिंग करूंगी आगे यानी टू ब्रेक सेल ओपन टू ब्रेक सेल ओपन मुझे सेल को पूरा खोलना है तोड़ना है खोलना है ताकि मेरा डीएनए मिल सके फॉर आइसोलेशन ऑफ प्यूरीफाइड डीएनए पहले मुझे डीएनए तो मिले फिर मैं उसकी काटा पीटी जोड़ा जाड़ी करूंगी इसमें जितने भी एंजाइम्स लगेंगे उन्हें कहते हैं लाइ चलो कौन ककन से लगेंगे सबसे पहले टू ब्रेक सेल वल सेल वल चलो सेल वल में क्या क्या हो जाएगा भाई आओ देख लेते हैं अगर प्लांट की सेल वॉल हुई प्लांट मतलब एलगी ब्रायोफाइट्स एंजियोस्पर्म वो मेनली सेलुलोज और पेक्टिन की बनी होती है तो एंजाइम लगेंगे सेल्यूले एंड पेक्टिस सेल वॉल हुई तो फंगल सेल वॉल मेनली काइटिंग की बनी होती है तो एंजाइम लगेगा काइट निज और अगर वो बैक्टीरिया की सेल वॉल हुई जो पेप्टाइडोग्लाइसन लाइसो जाइम क्लियर है ये सारे एंजाइम्स लगेंगे मार्केट में अवेलेबल होते हैं ये जैसे मान लो आपको गाजर का कोई जीन निकालना है तो क्या करते हैं गाजर को क्रश करके पानी में घोल देते हैं फिर बाजार में सेल्यूले ज आता है नेज आता है वो डाल देते हैं तो अपने आप सेल वॉल टूट जाती है फिर इसके बाद में प्लाज्मा मेंब्रेन तोड़नी है ब्रेक या डाइजेस्ट एक ही बात प्लाज्मा मेंब्रेन एंड न्यूक्लियर मेंब्रेन ये एनसीआरटी में नहीं दिया है बेटा आपको पता है यह मेनली लिपिड्स की बनी है लिपिड एंड प्रोटींस तो इसमें डिटर्जेंट्स डाले जाते हैं मार्केट में सब आता है जैसे ही डिटर्जेंट्स डालोगे प्लाज्मा मेंब्रेन टूट जाएगी न्यूक्लियर मेंब्रेन टूट जाएगी हां बैक्टीरियल सेल है तो न्यूक्लियर मेंब्रेन नहीं होती फिर इसके बाद आपको को डाइजेस्ट करना पड़ेगा आरएनए क्योंकि आपको तो डीएनए चाहिए तो आरएनए तोड़ना पड़ेगा आरएनए तोड़ने के लिए क्या डालोगे आरएनए देखो ये ये नहीं है यह मतलब होता है बहुत सारे आरएनए टेबल टेबल्स चेयर चेयर्स आरएनए आरएनए ये आरएनए है राइबो न्यूक्लियस यानी राइबोन्यूक्लिक एसिड को तोड़ने वाला एंजाइम जैसे ये डालोगे आरएनए टूट जाए डाइजेस्ट हो जाएगा फास्फो डाइटर बंड उसके टूट जाएंगे फिर अभी भी हिस्टोन प्रोटीन है नॉन हिस्टोन प्रोटीन है या बैक्टीरिया है तो अलग अलग प्रोटीन है इसके लिए एंजाइम डालेंगे प्रोटस प्रोटस अब डीएनए अकेला बचा अभी भी दिखाई कुछ नहीं देगा अब आप उसके अंदर ठंडी ठंडी बियर डालोगे या चिल्ड इथेनॉल डालोगे क्या करोगे इसके बाद यह सब डाल दिया सेल वॉल टूट गई प्लाज्मा मेंब्रेन क्लियर मेंब्रेन आरएनए प्रोटीन अब आप क्या करोगे इस टेस्ट ट्यूब के अंदर चिल्ड इथेनॉल डालोगे क्या डालोगे बेटा चिल्ड इथेनॉल इस बहुत क्वेश्चन आता है नीट में कई बार पीवा क्य आया है चिल्ड इथेनॉल जैसे ही आप चिल्ड इथेनॉल डालोगे आपको ऐसे सफेद सफेद धागे धागे जैसा रुई जैसा डीएनए दिखेगा ि इथेनॉल डालते ही डीएनए जो अभी घुला हुआ था सॉल्युबल था प्रेसिपिटेटिंग एस फाइन थ्रेड्स पतले पतले धागे दिखेंगे इन सस्पेंशन इस तरीके से यह प्रेसिपिटेटर अभी तक तो छिपा हुआ था डीएनए अब एक स्पेशल चम्मच आती है ये एनसीआरटी की थ्योरी में कहीं नहीं लिखा डायग्राम में लिखा है इससे इस डीएनए को बाहर निकाल लेंगे तो नाउ डीएनए इज टेकन आउट बाय चम्मच चम्मच क्यों बोल रही हूं क्योंकि चम्मच को बोलते हैं स्पून और इस प्रोसेस को बोलेंगे स्पूलिंग सो यह जो पूरा डीएनए है आइसोलेटेड डीएनए या ये जो प्योर डीएनए मिला है इसके साथ कोई आरएनए प्रोटीन नहीं जुड़ा हुआ है आइसोलेटेड डीएनए इज रिमूव्ड बाय अब हम इसे बाहर निकालेंगे बाय कलिंग इस पे बहुत क्वेश्चन आता है स्टूडेंट्स मैं आगे पढ़ाऊंगा होता है जहां जेल इलेक्ट्रो फोसिस में जेल का पीस कट करके उससे डीएनए का टुकड़ा निकालते हैं उसे इल्यूजन कहते हैं यहां पूरा का पूरा डीएनए निकालते हैं इसे स्पूलिंग कहते हैं इंपोर्टेंट है तो स्पूलिंग पे भी क्वेश्चन कॉमनली पूछते हैं और चिल्ड इथेनॉल पे भी कॉमनली पूछते हैं मजे आ गए ये थे पहले एंजाइम अब हम बात करेंगे सेकंड एंजाइम की की सेकंड एंजाइम जो है वो है बहुत ही इंपॉर्टेंट रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लीज अभी-अभी हमने बात की थी इन्हें ही शॉर्ट में आरई कहते हैं आरई इसी से हम एक्चुअली डीएनए के टुकड़े करेंगे अभी तो हमें पूरा डीएनए मिला है अब हम उसमें भी फास्फ डाइटर बॉन्ड्स को कट करेंगे यानी इन्हें बोलते हैं मॉलिक्यूलर सीजर्स अब आप सिजर बोलो यानी कैची नाइफ बोलो चाकू या स्कैल्प जिससे आप सर्जरी करेंगे आगे जाकर ये है सेकंड कैटेगरी इससे हम क्या करेंगे हम डीएनए के टुकड़े करेंगे अभी हमें पूरा डीएनए मिला है यानी टू कट डीएनए इनटू पीसेज यानी फ्रेगमेंट्स बोलो या पीसेज बोलो यानी बॉन्ड कौन सा टूटेगा बोलो वही 3 फ फास्फो डाई ईस्टर बॉन्ड है ना उन्हीं से तो जुड़ी रहती है आपस में न्यूक्लियोटाइड इतना तो सबको क्लियर है ना बायोटे मॉलिक्यूलर बायोलॉजी अब इनको समझने के पहले हमें न्यूक्लियस समझना पड़ेगा क्या होता है बेटा न्यूक्लियस से क्या समझ रहे हो आप भाई प्रोटस जो प्रोटीन तोड़े तो न्यूक्लियस जो न्यूक्लिक एसिड को तोड़े न्यूक्लिक एसिड को तोड़े मतलब कोई भी डीएनए या आरएनए तो ये डाइजेस्ट करते हैं न्यूक्लिक एसिड को डीएनए को भी या आरएनए को भी कोई भी न्यूक्लिक एसिड को डाइजेस्ट करते हैं मतलब यही इसे ब्रेक करते हैं न्यूक्लियस तीन तरीके के होते हैं न्यूक्लियस तीन तरीके के होते हैं एक होता है जिसे कहते हैं एजो न्यूक्लियस देखो समझो आपको पता है डीएनए डबल स्टैंडर्ड है एजो न्यूक्लियस क्या करेगा मान लो अगर ये डीएनए है सपोज यहां पर एटी सी जी जीी है आपस में फास्फ डाइटर बॉन्ड से जुड़ी है आपको मालूम है यहां पर कॉम्प्लीयंट सीजी एंड टू हाइड्रोजन बॉन्ड बिटवीन ए एजो क्या करता है बाहर कट लगाएगा और एक ही स्ट्रैंड पर कट करेगा कट एट टर्मिनल एंड मतलब सबसे आखिरी वाले तोड़ेगा एंड ओनली वन स्ट किसी भी एक स्ट्रैंड को कट करेगा बस इसे बोलते हैं एजो न्यूक्लियस एक ही स्ट्रैंड को कट करेगा एंड में यह फर्स्ट कैटेगरी एजो न्यूक्लियस अगर एंडो न्यूक्लियस की बात करू एक एगो है तो एक एंडो न्यूक्लियस भी होगा तो एंडो न्यूक्लियस कहीं भी बीच में कट करेगा बीच में हो सकता है यहां कट लगाए पर एक ही स्ट्रैंड पर कट करेगा कट इन बिटवीन लेकिन ओनली वन स्ट्रैंड वन स्ट्रैंड ओनली वन स्ट्रैंड ओनली यह बायोटेक्नोलॉजी में काम नहीं आते यह बायोटेक्नोलॉजी में काम नहीं आते रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस का मतलब आप समझो न्यूक्लियस मतलब ये न्यूक्लिक एसिड डीएनए को कट करेगा एंडो न्यूक्लियस मतलब साइड एंड में नहीं कहीं बीच में करेगा और रिस्ट्रिक्शन मतलब एक स्पेशल तरीके से करेगा रिस्ट्रिक्टेड वे में करेगा एंडो न्यूक्लियस का ही एक स्पेशल टाइप समझ लो रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस यह दोनों स्टंड्स प कट लगाता है बोथ स्टंड्स प कट लगाता है और एक पर्टिकुलर डीएनए की जगह पर कट लगाता है यह क्या करता है यह पूरे डीएनए का इंस्पेक्शन करेगा और देखेगा कहां प पलिंड्रोम एक डीएनए है पलिंड्रोम अभी समझाऊ उल्टा सीधा एक समान से पढ़ो तो भी जी एए टीटीसी उधर से पढ़ो तो भी जी एए टीटीसी तो रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस ऐसे ही कहीं भी कट नहीं लगाते अंदर तो लगाएंगे पर जहां पलिंड्रोम में वहीं लगाएंगे और दोनों स्टैंड्स प कट लगाएंगे ऐसा समझ लो एंडो न्यूक्लियस का ही एक स्पेशल टाइप है सो कट डीएनए एट कट डीएनए एट पलिंड्रोम साइट पलिंड्रोम साइट ऑन बोथ स्ट्रैंड नॉर्मल एसो न्यूक्लियस एंडो न्यूक्लियस वन वन स्ट्रैंड पर कट लगाते हैं पर ये दोनों स्टंड्स प कट लगाएंगे और स्पेसिफिक जगह प कट लगाएंगे रिस्ट्रिक्टेड जगह प कट लगाएंगे इसीलिए रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस इतना क्लियर हुआ अब आइए हम समझते हैं आखिर रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस है क्या क्या यह नेचुरली प्रेजेंट है या इन्हें आर्टिफिशली लैब में बनाया गया तो मैंने आपसे अभी अभी क्या कहा की रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस पहले पूरे डीएनए का इंस्पेक्शन करेंगे इंस्पेक्ट होल डीएन पूरे डीएनए का इंस्पेक्शन करेंगे एंड देन कट एट पलिंड्रोम साइ एंड कट एट पलिंड्रोम साइड सवाल उठता है पहले कीय पलिंड्रोम क्या है पलिंड्रोम साइ ठीक है इतना तो क्लियर हो गया बेटा पलिंड्रोम एक इंग्लिश वर्ड है यह कोई बायो का शब्द नहीं है पलिंड्रोम एक इंग्लिश वर्ड होता है पलिंड्रोम का मतलब होता है बचपन में खेलते थे उल्टा सीधा एक समान जैसे डालडा आप ऐसे पढ़ो डालडा ऐसे पढ़ो डालडा जैसे जहाज मैं लिख नहीं रही हूं जैसे मलयालम मलयालम ऐसे पढ़ोगे मलयालम ऐसे पढ़ोगे मलयालम और भी बहुत सारे होते हैं तो यहां पर पलिंड्रोम डीएनए का क्या मतलब है अब समझो पलिंड्रोम डीएनए का क्या मतलब है पलिंड्रोम डीएनए का मतलब है देखो डीएनए में दो स्टैंड्स होते हैं एंटी पैरेलल होते हैं ये अगर 5 टूथ है तो ये 3 टू फ होगा सपोज करो मैंने यहां पे लिखा वही लिखती हूं पहले जी ए ए टीटी सी कॉम्प्लीयंट कारण से यहां पर ऐसा आएगा अब मैं कह रही हूं कि ये पलिंड्रोम डीएनए है मतलब आप 523 ऐसे पढ़ो या 523 ऐसे पढ़ो जी ए ए टीटीसी जी ए ए टीटीसी ऐसा नहीं एक स्टैंड 5 टूथ पढ़ रहे हो और एक 3 टू 5 पढ़ रहे हो तो नहीं बात बनेगी रीडिंग ऑफ ओरिएंटेशन ओरिएंटेशन ऑफ रीडिंग शुड बी सेम अगर इसे 3 टू फ पढ़ोगे सी टी टी ए ए जी तो इसे टू फ पढ़ो सीटीटी ए ए जी सेम आएगा तो ही पलिंड्रोम डीएनए होगा सो पलिंड्रोम डीएनए रीड्स द सेम इन बोथ स्टंड्स वन ओरिएंटेशन ऑफ रीडिंग इज केप्ट सेम सो इट रीड्स सेम ऑन बोथ स्ट्रैंड वेन यह बड़ा इंपॉर्टेंट है वन ओरिएंटेशन ऑफ रीडिंग इज केप्ट सेम दोनों या तो आप 5 टू 3 रीड करोगे या दोनों आप 3 टू 5 रीड करोगे अगर सेम आ रहा है उल्टा सीधा एक समान तो आप कहोगे कि यह पलिंड्रोम डीएनए है जैसे बताओ मुझे यह पलिंड्रोम है या नहीं है बताइए c स सी जी जी जी सोचो पलिंड्रोम पहचानने को एग्जाम में आते हैं बहुत आसान है अगर कम्प्लीनोस अगेन 523 एंड 325 प सीटी ए एजी इधर आएगा सी ए ए नहीं सॉरी सी ए टीटी सी बोलो पैलेडम है या नहीं सीटी ए सीटीटी नहीं ये पलिंड्रोम नहीं है पलिंड्रोम पहचानने का तरीका समझ में आया 5 टूथ पढ़ के देखो या 325 पर दोनों पे सेम तरीके से रीडिंग होनी चाहिए ये इंपॉर्टेंट है तो ये प्रीवियस ईयर क्वेश्चन है ये आया हुआ है चलिए अब आइए हम देखते हैं कि आखिर ये रिस्ट्रिक्शन एंजाइम्स क्या है स्टूडेंट्स रिस्ट्रिक्शन एंजाइम लेब रेटरी में कभी नहीं बनाए जाते जी हां ये नेचुरली बैक्टीरिया से मिलते हैं नेचुरली प्रकृति ने बैक्टीरिया के अंदर ये एंजाइम्स दिए हैं क्यों दिए हैं उनकी रक्षा करने के लिए किससे रक्षा करने के लिए वायरस से और जो वायरस बैक्टीरिया को अटैक करते हैं बोलिए उन्हें क्या कहते हैं बैक्टीरियोस्टैटिक सबने चलो देखो सपोज करो ये एक बैक्टीरिया है ठीक है इसके ऊपर य एक वायरस आकर बैठा ठीक है ये यह बैक्टीरिया का खुद का डीएनए है जिनोमिक डीएनए है आपको पता है वायरस कभी पूरा अंदर नहीं घुसता वायरस केवल अपना जेनेटिक मटेरियल अंदर डालता है तो ये सपोज वायरस का डीएनए है वायरल डीएनए अब आपको मालूम है वायरस अपनी मल्टीपल कॉपीज बनाएगा और अल्टीमेटली इस बैक्टीरिया को मार देगा यही होता है तो नेचर ने बैक्टीरिया को प्राकृतिक रूप से खुद को प्रोटेक्ट करने के लिए बैक्टीरिया के पास एक नेचुरल डिफेंस मैकेनिज्म दिया है नेचुरल डिफेंस मैकेनिज्म किससे रक्षा करनी है वो भी भाई पता होना चाहिए टू प्रोटेक्ट अगेंस्ट बैक्टीरियोस्टैटिक करता है मैं एक बार लिख देती हूं वायरस समझो इस बैक्टीरिया को नेचर ने दो एंजाइम का एक सिस्टम दिया क्या दिया है बेटा दो एंजाइम का सिस्टम इसे कहते हैं टू एंजाइम कॉप्लेक्स दिए हैं टू एंजाइम कॉम्प्लेक्शन है रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस जो अभी हम बात कर रहे हैं पहला एंजाइम है रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस ये क्या करेगा यह डीएनए को कट करता है यह क्या करेगा मान लो अगर ये इको r1 वाला है तो ये वायरल डीएनए में ढूंढेगा इंस्पेक्शन करेगा जहां भी जी एटीटीसी मिलेगा वहां जी और ए के बीच में कट लगा देगा यानी यह डीएनए को कट कर देगा और जब वायरस का डीएनए ही कट हो जाएगा तो वायरस मल्टीप्लाई नहीं कर पाएगा और नुकसान नहीं पहुंचा पाएगा लेकिन गड़बड़ यह है कि यह खुद के डीएनए को भी तो इंस्पेक्ट करेगा और उसमें भी कहीं ना कहीं जी एए टीटीसी होगा ये वहां भी कट कर देगा तो पता पड़ा यह भी मर गया तो वायरस से तो नहीं मरा लेकिन खुद ही सुसाइड हो गया खुद ही निपट गया खुद भी मर गया तो नेचर इतना बेवकूफ नहीं है नेचर ने एक और एंजाइम दिया है इसे कहते हैं मिथाइलेशन एजेंट यह क्या करता है यह क्या करेगा बेटा यह पहले ही जो बैक्टीरिया का डीएनए है उसपे जगह-जगह पर मिथाइल ग्रुप ऐड कर देगा अब ये जो इको आरव है ये जी एए टीटीसी पहचानता है पर उसमें कहीं-कहीं पर मिथाइल भी लगा है ये उसे थोड़ी ना पहचाने का ये तो केवल प्योर जीए टीटीसी हो तो ही पहचानता है तो ये बैक्टीरिया के डीएनए को नहीं कट करेगा तो इसने बैक्टीरिया का सुसाइड होने से बचा लिया बैक्टीरिया को मरने से बचा लिया सो इट एड्स मिथाइल ग्रुप टू बैक्टीरियल डीएनए बैक्टीरियल डीएनए तो एक तो है जो वायरस के डीएनए को काट देगा कट कर देगा मार देगा और एक है जो बैक्टीरिया का सुसाइड बचाएगा ताकि बैक्टीरिया का डीएनए कट ना हो क्योंकि उसमें जगह जगह पर मिथाइल ग्रुप ऐड हो गया तो साइंटिस्ट इसे स्टडी कर रहे थे और उन्हें ये बड़ा इंटरेस्टिंग लगा उन्होंने कहा कि अगर नेचर ने तो इसको वायरस के डीएनए को कट करने के लिए इन बैक्टीरिया के अंदर दिया है पर हम इनसे अपने दूसरा कोई भी डीएनए कट कर सकते हैं तो उन्होंने इन एंजाइम्स को रिस्ट्रिक्शन एंजाइम्स को बैक्टीरिया से निकालना शुरू करा और आज 230 स्ट्रेस ऑफ बैक्टीरिया से मोर देन 900 रिस्ट्रिक्शन एंजाइम्स हम आइसोलेट कर चुके हैं रिस्ट्रिक्शन एंजाइम कभी भी लेबोरेटरी में नहीं बनता है सो मोर देन 900 रिस्ट्रिक्शन एंजाइम्स आइसोलेटेड फ्रॉम मोर देन 230 स्ट्रेस ऑफ बैक्टीरिया स्ट्रेंस क्यों कह रही हूं क्योंकि बैक्टीरिया के अंदर एक जीनस होगा स्पीशीज होगी और जो सब स्पीशीज होती है उसे हम क्या कहते हैं उसे हम स्ट्रेन कहते हैं क्या कहते हैं स्ट्रेन कहते हैं टिल नाउ ऑफकोर्स टिल नाउ अभी तक बोला मैंने तो ये इंपॉर्टेंट डाटा है 230 स्ट्रेंस ऑफ बैक्टीरिया से मोर देन 900 रिस्ट्रिक्शन एंजाइम्स आइसोलेट हो चुके हैं अब इनका नामकरण कैसे होता है नॉम क्लेचर देखो बहुत इजी है फिर हम बात करेंगे कि पहला फर्स्ट कौन सा था देखो समझो नमन क्लेचर मैं एक एग्जांपल से ही बताती इको आरव मैंने इसका बारबार नाम लिया है कोई भी रिस्ट्रिक्शन एंजाइम जब बाहर निकालो तो जो पहला अल्फाबेट होता है फर्स्ट लेटर यह जीनस को डिनोट करता है जीनस और यह हमेशा कैपिटल में लिखते हैं कैपिटल जैसे यहां पर यह है एस चचिया एस चचिया ठीक है अगले टू लेटर्स जो होते हैं सेकंड और थर्ड सेकंड एंड थर्ड लेटर ये स्पीशीज को डिनोट करते हैं स्पीशीज और यह हमेशा लोअर केस में यानी स्मॉल में लिखे जाते हैं स्मॉल लेटर्स में जैसे यहां पर कोलाई कोलाई का को ले लिया तो एस चचिया का ई ले लिया कोलाई का को ले लिया नेक्स्ट जरूरी नहीं है सब में हो हो सकता है कोई बैक्टीरिया हो जिसकी स्पीशीज के अंदर कोई एक ही स्ट्र और स्ट्रेन है ही नहीं तो वहां पर ये फोर्थ वाला लेटर गायब हो जाएगा बट अगर स्ट्रेन है तो फोर्थ लेटर स्ट्रेन के बारे में बताएगा यानी सब स्पीशीज कह लो एनिमल में सब स्पीशीज बोलते हैं प्लांट्स में वैरायटी बोलते हैं और प्रोकैरियोटिक यानी जैसे ही आप इतना नाम देखोगे आपको पता है कि यह रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस एंजाइम जो है य ए चचिया कोलाई आरवा 1 बैक्टीरिया से निकाला है जीनस ए चचिया स्पीशीज है कोलाई और आरवा 1 स्ट्रेन है अब यह क्या है व्ट इज दिस दिस इ जो फिथ लेटर नहीं है एक्चुअली य न्यूमेरिकल है यह है ऑर्डर ऑफ डिस्कवरी समझो मा मान लो इ कोलाई बैक्टीरिया के आरवा 13 से मैंने पांच रिस्ट्रिक्शन एंजाइम्स निकाले तो जो सबसे पहले निकाला खोजा डिस्कवर किया वो इको r1 फिर इको r2 इको r3 इको r4 इको r5 ऐसे लिखा जाएगा नोमेन क्लेचर समझ में आ गया फर्स्ट अल्फाबेट जीनस कैपिटल सेकंड थर्ड अल्फाबेट स्मॉल स्पीशीज फोर्थ अल्फाबेट मे बी प्रेजेंट और नॉट कैपिटल और स्मॉल स्ट्रेन एंड फिफ्थ इज द नंबर तो अब सवाल उठता है कि पहला आइसोलेटेड या डिस्कवर्ड रिस्ट्रिक्शन एंजाइम कौन सा है रिस्ट्रिक्शन एंजाइम स्टूडेंट्स इसकी खोज कब हुई है बताओ 1963 अभी मैंने आपको बताया था 5 साल बाद एनसीआरटी कहती है कि 1963 में तो साइंटिस्ट को यह सब कुछ पता चला था इसके फा इयर्स लेटर यानी 1968 एनसीआरटी में 1968 नहीं लिखा फाइ इयर्स लेटर करके लिखा हुआ है तो 63 लिखा है एनसीआरटी में और फव इयर्स लेटर लिखा है पहला रिस्ट्रिक्शन एंजाइम खोजा गया जिसका नाम है हिंद टू हिंद टू चलो एच का मतलब हीमो फिलस ये इसका जीनस है हीमोफीलिया देन आई एन का मतलब है इनफ्लुएंस हीमो फिलस इन फ्लुएंसी इन्फ्लुएंस इसकी स्पीशीज है और यह है आरडी स्ट्रेन तो यहां से य स्मॉल वाला ले लिया आरडी स्ट्रेन और सेकंड हिंद टू अब एक जबरदस्त बात बताती हूं आपके दिल में घंटियां बज जाएंगी सुनना मेरी बात भाई अगर मैं कह रही हूं ये पहला डिस्कवर्ड है तो इसका नाम तो हिंद वन होना चाहिए था ना हिंद टू कैसे है एक्चुअली स्टूडेंट्स रिस्ट्रिक्शन एंजाइम भी बहुत तरीके के होते हैं टाइप वन टाइप टू टाइप थ्री हम डिटेल में नहीं जा रहे हैं इनमें से टाइप टू वाले बायोटेक में यूज होते हैं बाकी बायोटेक में यूज नहीं होते तो जो बायो जो हिंद वन जो इसके पहले खोजा गया था वो बायोटेक में यूज नहीं होता तो बायोटेक में यही यूज होता है इसीलिए यह पहला है हिंद टू चलिए अब ये जो इको आरव है इको आरवन इसका पलिंड्रोम जिसे पहचानता है ये इसका पलिंड्रोम जो है वो है जी ए एटीटीसी जी ए ए टीटी सी दूसरे में भी हो जाएगा वही सेम स्ट्रेन जी ए एटीटीसी है ना 523 523 जी ए एटीटीसी इसी तरह से हिंद टू का एक तो इको आव का तो एनसीआरटी में है ही इसके लिए लिखा हुआ है रिकॉग्नाइज सीक्वेंस ऑफ सिक्स न्यूक्लियोटाइड या बेस पेयर न्यूक्लियोटाइड एक एक स्ट्रेन प न्यूक्लियोटाइड कहोगे दोनों पर मिला के बेस पेयर कहोगे स्पेसिफिक सीक्वेंस स्पेसिफिक सीक्वेंस ऐसा नहीं कोई भी छह भाई छ तो यहां भी है जी ए ए टीटीसी पर यहां कौन से हैं अब यह इतना लिखा है एनसीआरटी में मैं बताऊ गौरव टावर करके एक बढ़िया फेमस है जयपुर में भी है बैंगलोर में भी है तो गौरव टावर में सेंट्रल गवर्नमेंट ने एसी लगाया देख लो गौरव टावर में सेंट्रल गवर्नमेंट ने एसी लगाया देखो 523 523 कॉम्प्लीयंट का स्पेसिफिक सीक्वेंस अब आइए हम देखते हैं आखिर ये काम कैसे करेगा चलो अब आओ हम वर्किंग सीखते हैं वर्किंग ऑफ रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस हमने ये समझ लिया कि रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस नेचुरली मिलते हैं बैक्टीरिया में मिलते हैं प्रोटेक्ट करते हैं उन्हें बैक्टीरियोफेज इम का कॉम्प्लेक्शन एंडो और एक जो मिथाइल ग्रुप को ऐड करेगा फिर हमने बात की इनका नोमेन क्लेचर कैसे होता है और फिर हमने बात की कि फर्स्ट डिस्कवर्ड कौन सा हिंद टू और हिंद टू और इको आरव की पलिंड्रोम कौन से हैं अब ये काम कैसे करते हैं देखो जैसे सपोज करो यह है जी ए टीटी सी ये कौन सा बॉन्ड है ये फास्फो डाई ईस्टर बॉन्ड है और यह पूरी न्यूक्लियोटाइड की चेन है ऐसे ही सेम यहां पर भी जी ए एटी सी और ये आपस में फास्फो डाइटर बॉन्ड से बंधे हैं यह कौन सा बॉन्ड होगा बेटा ये हाइड्रोजन बॉन्ड होंगे आपको पता है ए के बीच में टू हाइड्रोजन बॉन्ड होता है और सीजी के बीच में थ्री हाइड्रोजन बॉन्ड होता है अगर मैं पर्टिकुलर इको आरव की अभी एग्जांपल लेके बात करूं तो इको आरव जो है ये दोनों स्टैंड्स पे कट लगाएगा फॉफो डाई ईस्टर बॉन्ड को तोड़ेगा जी और ए के बीच में जी और ए के बीच में कट लगाएगा इस बंड को तोड़ेगा फास्फोर डाई ईस्टर बॉन्ड को तोड़ेगा और दोनों स्टंड्स पर लगाएगा मैंने क्या कहा कट बिटवीन सेम न्यूक्लियोटाइड सेम न्यूक्लियोटाइड ऑन बोथ स्टंड्स दोनों स्टंड्स पर जी और ए के बीच में कट किया है एग्जांपल की तरह हो गया बिटवीन जी एंड ए ऐसा नहीं है कि यहां जी और ए के बीच में कट लगाएगा याय ए और टी के बीच में कट लगाएगा नहीं बिटवीन सेम न्यूक्लियोटाइड लगाएगा एंड दोनों स्टैंड्स प लगाए पहली चीज दूसरी चीज देखो सेंटर में अच्छा कौन सा बंड ब्रेक करेगा ब्रेक ब्रेक 35 फास्फो डाई ईस्टर बॉन्ड फास्फो डाई ईस्टर बॉन्ड अब समझो है ना ये तो सिंपल हो गया ी तो न्यूक्लि है च अब ये सेंटर में कट नहीं कर रहा सेंटर क्या होता ए और टी के बीच में ये सेंटर से स्लाइटली अवे कट कर रहा है यह भी बड़ा इंपॉर्टेंट होगा क्यों अभी समझ आएगा सो कट स्लाइटली अवे फ्रॉम सेंटर यह बड़ा इंपोर्टेंट पॉइंट है क्यों है अभी समझ आएगा लिखो इतना कट स्लाइटली अवे फ्रॉम सेंटर या अ लिटिल अवे स्लाइटली अवे बोलो या अ लिटिल अवे बोलो फ्रॉम सेंटर ऑफ़ पलिंड्रोम इसे क्या होगा समझो समझो अ लिटिल अवे फ्रॉम सेंट इससे क्या होगा कि देखो यह अलग हुआ लेकिन यह इससे तो जुड़ा है अभी भी यह इससे जुड़ा है यह इससे जुड़ा है इससे जुड़ा है यह इससे जुड़ा है ऐसे ही यह इससे अलग हो गया पर यह इससे जुड़ा है जो इससे जुड़ा यानी जी के साथ अभी भी सी टी टी ए ए यह तो है और इस जी के साथ भी अभी भी सीटी टी ए ए है हां यह आपस में अलग हो गए हैं मतलब एक टुकड़ा यह हो गया वन पीस और एक पीस यह हो गया यह दो पीस अलग हो गए ठीक है अब गौर से देखो एक्चुअली जब ये खींचेगा ये खींचेगा तो हाइड्रोजन बॉन्स खुद ही टूट जाएंगे हाइड्रोजन बंड्स बनते भी बहुत जल्दी है टूटते भी बहुत जल्दी है पर इसने मेनली क्या तोड़ा है फास्फो डाई हीस्टर बॉन्ड अब देखो ये तो अभी भी जोड़ीदार है पार्टनर्स है सी और जी ये भी सी और जी पार्टनर्स है पर इनको देखो इनको या इतने पार्ट को देखो ये सिंगल स्ट्रैंडेड हो गए हैं ये अपने पार्टनर्स ढूंढेंगे इसे बोलते हैं लटकता हुआ स्टैगरिंग एंड सिंगल स्ट्रैंडेड पीस बच गया है और अभी अपने पार्टनर्स को ढूंढेंगे और जैसे ही पार्टनर मिलेगा कॉम्प्लीयंट से बन जाते हैं और जब दो टुकड़े पासपास आएंगे तो डीएनए लाइ गज को हेल्प होगी लाइ गज क्या करता है फास्फो डाइटर बॉन्ड वापस बना देगा तो ये क्यों हुआ क्योंकि स्लाइटली अवे कट करा है उसके कारण से यहां पे स्टैगरिंग एंड्स बने स्टैगरिंग एंड्स ये अभी समझाऊ उसी और अच्छे से चिपकने में भी हेल्प करेंगे इन्हे स्टिकी एंड्स भी बोलते हैं स्टिकी एंड्स ये सिंगल स्ट्रैंडेड पीसेज हैं वेरी वेरी इंपॉर्टेंट डबल स्ट्रैंडेड तो खुद ही सेटिस्फाइड है ऐसा समझो वो तो शादीशुदा है वो नहीं ढूंढ रहा है पार्टनर ये सिंगल स्ट्रैंडेड वाले जो हैं स्टैगरिंग एंड इन्हें कभी-कभी लटकता हुआ ओवर हैंगिंग स्टैंड्स भी बोलते हैं ओवर हैंगिंग यह हाइड्रोजन बंड बना लेंगे झट से फम हाइड्रोजन बॉन्स विथ विथ बेटा ध्यान से सुनो पास पास आने से सिर्फ हाइड्रोजन बंड बनता है फास्फ डाइर बंड बनाने के लिए तो डीएनए लाइज एंजाइम अभी चाहिए सो फॉर्म हाइड्रोजन बॉन्स विथ देर कॉम्प्लीयंट विथ देयर कॉम्प्लीयंट पार्ट्स कम्प्लीनोस पास आ गए हैं तो डीएनए लाइज फिर से इनमें फास्फो डाई ईस्टर बॉन्ड बना देगा यानी दिस फैसिलिटेट एक्शन ऑफ डीएनए लाइ ग डीएनए लाइ गस क्या काम होता है डीएनए लाइ गस का फर्म फास्फो डाई ईस्टर बंड डाई ईस्टर बंड कट किसने किया रिस्ट्रिक्शन एंजाइम ने डाई ईस्टर बंड बनाएगा कौन डीएनए लागेज और जैसे ही यह बनाएगा दो पीसे जुड़ जाएंगे अब आपके दिमाग में एक सवाल आना चाहिए कि मैम जोड़ना था तो तोड़ा क्यों सुनो ध्यान से मैंने क्या किया मान लो मुझे ह्यूमन इंसुलिन का जीन चाहिए तो ह्यूमन इंसुलिन का जब जब मेरे को पूरा मैंने क्या किया पहले वो लाजस एंजाइम डाले प्लाज्मा मेंब्रेन न्यूक्लियर मेंब्रेन आरएनए प्रोटीन हटा दिया चिल्ड इथेनॉल डाला और स्पूलिंग से पूरा डीएनए निकाल लिया अब मैंने इको आरव डाला इको आरव को जहां जहां जीए ए टीटीसी मिला उसने जी और ए के बीच में कट्स लगा दिए तो मुझे बहुत सारे पीसेज बहुत सारे टुकड़े मिल गए अब मैंने क्या किया मुझे वेक्टर की तरह प्लाज्मिड को यूज करना था मान लो साल्मोनेला टाइफी मरियम के प्लाज्मिड को यूज करना था तो मैंने उसमें भी पहले लाजस डाले होंगे यानी उसमें भी मैंने सब सेल वॉल प्लाज्मा मेंब्रेन सब ब्रेक करा डीएन आरएनए प्रोटीन और अल्टीमेटली पूरा डीएनए बाहर निकाला उसको भी मैंने इ को r1 से कट किया उसमें भी जहां-जहां जीए ए टीटीसी थे वहां पर कट लगा दिया यानी अब जब मैं इन्हें कॉमन मिक्सचर में डालूंगी तो प्लाज्मिड में भी भी इस तरह के टुकड़े मिलेंगे ये क्योंकि वहां भी जी और ए के बीच में कट लगा है दोनों दोनों स्टैंड्स पे और ह्यूमन इंसुलिन वो जो पूरा ह्यूमन डीएनए उसमें भी ऐसे कट्स मिलेंगे अब मैं उसमें डीएनए लाइ गज भी डाल दूंगी तो अ ये आपस में एक दूसरे को ढूंढेंगे क्योंकि कुछ पीसेज देखो ऐसा भी हो सकता है कि दोनों पीस ह्यूमन वाले डीएनए के जुड़ जाए तो ये फेल है फिर दोबारा एक्सपेरिमेंट करना पड़ेगा दोनों पीस वेक्टर वाले के जुड़ जाए तो भी फेल है पर ऐसा भी तो हो सकता है कि एक टुकड़ा वेक्टर वाला और दूसरा पीस ह्यूमन वाला आपस में जॉइन हो जाए तो बन गया ना आरडीएनए तो यह बन गया आरडीएनए आरडीएनए लेकिन इसमें शर्त क्या है कि टुकड़े सेम होने चाहिए यानी सेम रिस्ट्रिक्शन एंजाइम होना चाहिए तो जो फॉरन डीएनए है जैसे इंसान का ह्यूमन मान लो इस केस में एंड जो वेक्टर का डीएनए है फॉर एग्जांपल प्लाज्मिड दे शुड बी कट विथ सेम रिस्ट्रिक्शन एंजाइम तभी तो सेम पीसे मिलेंगे तभी तो सेम टुकड़े बनेंगे तभी तो चांस है कि कम्प्लीनोस झट से फास्फ डाइटर बॉन्ड बना के इन्ह जोड़ देगा आ रहा है समझ में मजे आ रहे हैं मजे आ रहे हैं राइट तो ये जो स्टिकने है ना ये जो सिंगल स्ट्रैंडेड पीस बने हैं ना इसने फैसिलिटेट किया है एक्शन को दिस स्टिकी नेस फैसिलिटेट इसने अदर वाइज क्या होता समझो अदर वाइज क्या होता समझो अभी तो क्या हुआ है जैसे ये जी इसके साथ जुड़ा था इधर भीय जी इसके साथ जुड़ा था जी ए एटी टी सी ये ऐसा था पीस इधर भी ए एटी टी ये ऐसा था पीस ठीक है ओ ओ ओ एक सेकंड एक सेकंड हां एक सेकंड हम एक मिनट जी जी और ए के बीच में तो कट लगा दिया मैं एक मिन गड़बड़ कर रही हूं एक सेकंड रुको जी ए के साथ कट कर दिया ए ए टी टी सी जी ए ए पटी सी हां अब ठीक है तो एक पीस तो ये था एक पीस ये था अगर मान लो इसमें ऐसे सिंगल स्टैंडर्ड पोर्शन नहीं बन पाते तो ये आपस में एक दूसरे को ढूंढते नहीं हाइड्रोजन बॉन्ड नहीं बनता पासपास नहीं आ पाते तो डीएनए लाइ गज भी फिर इनके बीच में बॉन्ड नहीं बना पाता जो कि अब बना पाएगा मैं इसका एक एग्जांपल देके आपको बताती हूं एक्चुअली जैसे एक होता है स्मा वन सराशि मार्सिस बैक्टीरिया से मिलता है यह क्या करता है सी सी सी जी जीी जीी इस पैलेडम को पहचानता है यह भी पलिंड्रोम है देख लो उल्टा सीधा एक समान और यह क्या करता है यह सेंटर में कट करता है बेटा सेंटर में यहां तो ये ऐसे जुड़े हुए हैं ना हाइड्रोजन बॉन्स देखो थ्र हाइड्रोजन बॉन्ड और आपस में फास्फो डाई ईस्टर बॉन्ड से जुड़े हुए हैं इसने यहां बीच में कट लगाया अगर बीच में कट लगाएगा तो एक टुकड़ा यह बन गया और एक पीस यह बन गया पर यह तो सभी डबल स्टैंडर्ड है इसमें सिंगल स्टैंडर्ड ओवर हैंगिंग पीसे नहीं बनते तो यहां पर यह हेल्प नहीं कर रहा बायोटेक्नोलॉजी में तो इसे बायोटेक में यूज नहीं करते हैं अब हालांकि यह सब नहीं पूछते हैं तो ऐसे भी रिस्ट्रिक्शन एंजाइम्स होते हैं पर बायोटेक में वही यूज होगा जो थोड़ा सा सेंटर से दूर काटे सेंटर से दूर काटेगा तभी तो प्रेशर पड़ेगा तभी तो हाइड्रोजन बॉन्ड टूटेंगे तभी तो टुकड़े अलग-अलग होंगे तभी तो सिंगल स्टैड पीस बनेगा तभी तो वो एक दूसरे को ढूंढेंगे तभी तो वो एक दूसरे से हाइड्रोजन बॉन्ड बनाएंगे तभी तो दोनों टुकड़े पासपास आएंगे तभी तो डीएनए लागेस को हेल्प होगी जोड़कर आर डीएनए बनाने में तो मिडिल वाले भी आते हैं पर वो बायोटेक में यूज नहीं हो मजे आ रहे है राइट वेरी वेरी वेरी इंपॉर्टेंट वेरी इंपॉर्टेंट वेरी इजी बट वेरी इंपॉर्टेंट अगर हमने समझ लिया तो कुछ भी मुश्किल नहीं है अब आइए मैं आपको एनसीआरटी के दो डायग्राम्स यहां पर दिखाती हूं यानी थर्ड एंजाइम जो लगा वो हो गया डीएनए लागेज मैं दोबारा नहीं लिख रही हूं ये फास्फो डाई ईस्टर बॉन्ड बनाएगा एक एंजाइम और लगता है बेटा डीएनए पॉलीमरेस वो कब लगेगा जब डीएनए से डीएनए बनेगा आगे मल्टीप्लिकेशन होगा यानी डीएनए का रेप्ट केशन होगा तो सबसे पहले लाजस लगे फिर रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस लगे फिर जोड़ने के लिए डीएनए लागेज लगेगा और डीएनए पॉलीमरेस मल्टीप्लिकेशन के लिए लगेंगे डीएनए से और डीएनए बनाने आइए आपको एनसीआरटी का डायग्राम दिखाती हूं एक एक वर्ड एक एक लाइन एनसीआरटी की एक्सप्लेन कर दी है यह देखिएगा एंजाइम कट्स बोथ डीएनए स्टंड्स एट सेम साइड जैसे यहां पर जी और a के बीच में कट लग रहा है यहां भी जी और a के बीच में कट लगा रहा है इको r1 इको r1 कट्स डीएनए बिटवीन बेसस जी एंड ए ओनली जब जी ए ए टीटीसी प्रेजेंट है इसी तरह ये तो वेक्टर के डीएनए में कट लगाया इको r1 से ही फॉरेन डीएनए में भी कट लगाया बिटवीन जी एंड ए जी एंड ए के बीच में कट लगाया तो ये सिंगल स्टैंडर्ड वाले स्टिकी एंड्स प्रोड्यूस हुए यहां पर भी ये स्टिकी एंड्स टीटी ए ए प्रोड्यूस हुए अगर वेक्टर डीएनए का एक स्टिकी एंड फॉरन डीएनए के दूसरे स्टिकी एंड जो कम्प्लीनोस बॉन्ड बनेंगे और अब ये डीएनए फ्रेगमेंट्स जॉइन हो जाएंगे विद द हेल्प ऑफ डीएनए लाइ गज और इस तरह से आरडीएनए बन जाएगा राइट एनसीआरटी का डायग्राम ये सारा मैं आपको एक्सप्लेन कर चुकी हूं एकएक वर्ड एकएक लाइन अब आप पढ़ना सेम डायग्राम इस तरह से बनाया है अगेन ये फॉरेन डीएनए है सपोज ये प्लाज्मिड यानी वेक्टर डीएनए है सेम रिस्ट्रिक्शन एंजाइम से कट किया बोथ फॉरन डीएनए एंड वेक्टर डीएनए को पर्टिकुलर पॉइंट पे वही जहां जहां जी ए टीटीसी है वहां जी एंड ए के बीच में ये इसके पीसेज मिले ये इसके पीसेज मिले लाइ गज जॉइन कर देगा फॉरन डीएनए को प्लाज्मिड वेक्टर के साथ तो ये बन गया यह ब्लू कलर का इधर जो है ये फॉरन डीएनए है बाकी ये वेक्टर है यह बन गया आरडीएनए मले अब इस आर डीएनए मॉलिक्यूल को ई कोलाई यानी होस्ट के अंदर डाला और इसके अंदर इसकी मल्टीपल कॉपीज बनेंगी क्लोनिंग होगी तो हम इसे क्लोनिंग होस्ट बोल रहे हैं प्लस ये होस्ट खुद भी डिवाइड करेगा ये सेल मतलब होस्ट डिवाइड कर रहा है तो हमारा जो आर डीएनए है वो भी सारों के अंदर जाएगा यहां पर ट्रांसफॉर्म कौन हुआ है जेनेटिकली मॉडिफाई कौन हुआ है होस्ट हुआ है ये दोनों डायग्राम्स बिल्कुल दिमाग में सेट हो गए तो ये हमने पढ़ा फर्स्ट पार्ट ये सारा हो गया है अब ध्यान से सुनो हमें क्या करना है ध्यान से सुनो देखो मैंने पूरा डीएनए बाहर निकाला और मैंने उसके टुकड़े भी कर दिए लेकिन मुझे अ ये देखना है मेरा वाला टुकड़ा कौन सा है भाई साइंटिस्ट को यह पता है कि ह्यूमन इंसुलिन का जीन जो है वो सपोज इतना बड़ा है उसमें मान लो 100 बेस पेयर लॉन्ग है लेकिन जब मैंने रिस्ट्रिक्शन एंजाइम डाला था उसे तो पूरे डीएनए में जहां-जहां जी टीटीसी मिला था वहां उसने जी और ए के बीच में कट लगा दिया था तो कुछ पीसे बहुत बड़े-बड़े मिले होंगे कुछ पीसे बहुत छोटे-छोटे मिले होंगे तो पहले मुझे उसमें से अपना डिजायर्ड पीस चूज करना है मुझे आईडिया है कि मेरा जीन कितना बड़ा है मुझे उतने साइज के जितने टुकड़े हैं उन्हें अलग करना है फिर मैं वेक्टर डीएनए के साथ उनको डालूंगी डीएनए लागेज डालूंगी ताकि आरडीएनए बने तो पहले मैंने पूरा डीएनए निकाला था वहां पर लाइ यूज हुए थे पर अब मुझे डिजायर्ड डीएनए फ्रेगमेंट को चूज करना है वो निकालना है समझ रहे हो मुझे निकालना क्या है मुझे करना क्या है चलिए आइए बस इस टेक्निक को बोलते हैं जेल इलेक्ट्रो फोसिस तो नेक्स्ट हेडिंग लेगी हमारी जेल इलेक्ट्रो फोरेसिस जेल इलेक्ट्रो इससे हम डीएनए को देखो फिर से कह रही हूं पूरा डीएनए निकालना था टोटल 2.2 मीटर लंबा डीएनए जैसे इंसान की बात करें तो लास एंजाइम डाले थे फिर उसके टुकड़े करे रिस्ट्रिक्शन एंजाइम से अब मैं अपना डिजायर्ड पीस निकालू सेपरेशन एंड आइसोलेशन ऑफ सेपरेशन एंड आइसोलेशन ऑफ डिजायर्ड डीएनए फ्रेगमेंट पहले मैंने पूरा टोटल डीएनए निकाला था अब मैं डीएनए का पीस निकालू टुकड़ा निका लूंगी वेरी क्लियर इज इट वेरी वेरी क्लियर टुकड़ा इसके लिए जो जेल यूज करते हैं क्योंकि नाम ही है जेल वो होता है एरोज जेल एरोज जेल आपने बायोलॉजिकल क्लासिफिकेशन में भी पढ़ा है रेड एलगी से मिलता है बेटा एनसीआरटी लिखती है कि ये एक पॉलीमर है एक्चुअली ये पॉली सकरा इड है बायो मॉलिक्यूल में पढ़ते हैं जैसे स्टार्च है ग्लूकोज है काइट है ऐसे ही एग्रोस पॉली सकरा इड है किससे मिलता है ये ये मिलता है ग्रेसिलेरिया एंजलिय क्या है ये जल्दी से बताओ ये दोनों रेड एलगी है समंदर में मिलते हैं रेड एलगी रेड एलगी यह बात हम बायोलॉजिकल य प्लांट किंगडम में सॉरी पढ़ते जब एलगी पढ़ते हैं तो ये रेड एलगी है ग्रेसिलेरिया एंड जिलीयन इन्हे मिलाकर समुद्री सी वीड्स भी बोलते हैं इनसे मिलता है य नेचुरल पॉलीमर है ये आर्टिफिशियल नहीं है नेचुरल अब इसका सीविंग इफेक्ट होता है इस बात को समझो आपको मालूम है जेल क्यों बोल रहे हैं देखो एक होता है लिक्विड जैसे पानी लिक्विड है एक होता है सॉलिड जैसे पत्थर सॉलिड है पर जेल क्या होता है जैसे चॉकलेट आपने गर्मी में रखी पिघल जाएगी मेल्ट हो जाएगी लिक्विड हो जाएगी और आपने फ्रिज में रखी सॉलिड हो जाएगी तो जेल ऐसा ही होता है तो जब जेल सॉलिड दिख रहा है तब भी एक्चुअली वो सॉलिड नहीं है ऐसे ऐसे पतले पतले छेद होते हैं उसमें जैसे छलनी होती है ना सीव इसे बोलते हैं सीविंग इफेक्ट होता है जेल का आपको दिख सॉलिड रहा है बट एक्चुअली इस तरीके का जेल होता है इज इट क्लियर सीविंग इफेक्ट होता है जेल का सीविंग इफेक्ट चलिए सीविंग इफेक्ट ऑफ जेल ऑफ कोर्स अब आइए हम बात करते हैं एक्चुअली ये प्रोसेस कैसे किया जाता है देखो एक तो हम जेल यूज करेंगे एगोस जेल उसकी डिटेल हमने पढ़ ली और हम इलेक्ट्रिसिटी यूज करने वाले हैं क्या करेंगे इसमें जैसे सपोज करो ये एक प्लेट ली मैंने एक्चुअली बेटा क्या करते हैं एक बर्तन लिया एग्रोस जेल लिया उसे माइक्रोवेव अवन में 37 डिग्री से पर हीट कर लेते गर्म तो पिघल जाता है वो ठीक है उसको इसमें डाल देते हैं इस बर्तन में डाल देते हैं और एक कंगा लगा देते कों बोलते हैं और उसे ठंडा होने देते हैं तो जहां जहां व कंगा लगा है कोम के दांत है चौड़े चौड़े वहां तो जेल नहीं है बाकी सब जगह जेल है हम उसे ठंडा होने देंगे फिर उस कं को निकाल लेंगे तो यहां पर गड्ढे बन जाएंगे बन जाएंगे गड्ढे इन्ह वेल बोलते हैं वेल वेल में हम डीएनए लोड करेंगे इनमें हम डीएनए लोड कर देंगे डीएनए आपको पता है नेगेटिवली चार्जड होता है ये बात मॉलिक्यूलर बायोलॉजी में पढ़ते हैं डीएनए नेगेटिवली चार्जड होता है मालूम है किसके कारण ड्यू टू फॉस्फेट फॉस्फेट ग्रुप के कारण डीएनए नेगेटिवली चार्जड होता है तो हमने डीएनए को लोड कर देंगे हम अभी हम बात करते हैं डीएनए के टुकड़ों को हम लोड कर देंगे और यहां पर नेगेटिव इलेक्ट्रोड लगा देंगे नेगेटिव जहां डीएनए लोड होगा वो नेगेटिव है और दूसरी तरफ पॉजिटिव होगा पॉजिटिव मतलब एनोड और नेगेटिव मतलब कैथोड और हम इस सर्किट को कंप्लीट कर देंगे इलेक्ट्रिसिटी रन कर देंगे अब क्या होगा सपोज करो ये लेन वन है ये लेन टू है ये लेन थ्री है मैंने तीन सैंपल डाले हैं ये लेन फोर है और सपोज लेन थ्री में मैंने कंट्रोल्ड सैंपल डाला है बेटा कंट्रोल्ड सैंपल मतलब एक ऐसा डीएनए जिसके टुकड़े मुझे पता है कितने कितने साइज के हैं और लेन वन लेन टू में मैंने वो डीएनए डाला है जिसमें पीसे तो मिले हैं पर कौन सा पीस कितना बड़ा है मुझे नहीं पता है ठीक है लेन वन लेन टू लेन फोर में मैंने डाल दिया वो और लेन थ्री में कंट्रोल सैंपल डाल दिया मैंने इलेक्ट्रिसिटी रन कर दी इलेक्ट्रो फोसिस कर दिया यहां जेल है जो दिख सॉलिड रहा है पर है सीविंग इफेक्ट अब डीएनए जो नेगेटिवली चार्जड है तो जो डीएनए के फ्रेगमेंट्स है जो नेगेटिवली चार्जड है नेगेटिवली चार्जड दे विल रन टुवर्ड्स पोजिटस अट्रैक्ट सो दे विल रन टुवर्ड्स एनोड यानी पॉजिटिव इलेक्ट्रोड की तरफ वह भागेंगे अब होगा क्या समझो ध्यान से जितना छोटा पीस होगा उतना उन छेद में से होल्स में से निकलता जाएगा दूर तक पहुंचेगा और जितने बड़े बड़ा पीस होगा उतना किसी ना किसी छेद में अटक जाएगा तो सिंपल सी बात है सपोज करो कि मेरे कंट्रोल्ड डीएनए में तीन पीस थे ऐसे यहां पर ऐसे थे यहां पर ऐसे थे और यहां पर एक ही पीस मिला ठीक है मैंने क्या कहा मैंने पहली चीज कही कि डीएनए फ्रेगमेंट्स जो है दे रन टुवर्ड्स एनोड मैं इसे कैसे याद कराती हूं एनोड आ आजा आजा आजा आजा आजा तो डीएनए को कौन बुलाता है आजा आजा यानी एनोड आजा से याद रख लेना आजा तो एनोड बुलाता है तो डीएनए नेगेटिवली चार्जड है पॉजिटिव इलेक्ट्रोड एनोड की तरफ भागना शुरू करेंगे और जितना छोटा पीस है उतना दूर तक भागेगा या जो जितना हल्का है उतना सब गुफाओं में से होता हुआ भाग जाएगा यानी इसम बहुत बार क्वेश्चन आता है जितना छोटा पीस है स्मॉलर द फ्रेगमेंट उतना दूर जाएगा फादर इट मूव्स फादर इट मूव्स जितना छोटा टुकड़ा उतनी दूर जाएगा उतनी दूर जाएगा टुवर्ड्स एनोड जा रहे हैं और जितना छोटा पीस है उतना दूर जा रहा है इतना समझ में आया यानी यहां पर सबसे बड़े पीस इधर है ये लार्जेस्ट है इसके इस में और ये वाले स्मॉलेट है यहां पर हमने डीएनए के टुकड़ों को सेपरेट कर दिया डीएनए फ्रेगमेंट्स सेपरेटेड बोलो किस बेसिस पे सेपरेट किया है बेटा आपने सेपरेटेड ऑन बेसिस ऑफ बोलिए ऑन बेसिस ऑफ साइज वेरी गुड साइज भी बोल सकते हो डेंसिटी भी बोल सकते हो जितना बड़ा होगा उतना भारी हैवी भी होगा क्या मैंने चार्ज के बेस पे सेपरेट किया है नहीं चार्ज तो सारे डीएनए फ्रेगमेंट्स पर नेगेटिव था सारे ही एनोड की तरफ भाग रहे थे सो नॉट चार्ज ऑन द बेसिस ऑफ साइज और डेंसिटी इसके बेस पर ठीक है अब एक बात और मजेदार समझो ले लेन फोर से क्या समझ में आ रहा है लेन फोर जो है अनडाइजेस्टेड यहां पर रिस्ट्रिक्शन एंजाइम ने काम ही नहीं किया तभी तो टुकड़े ही नहीं बने अनडाइजेस्टेड डीएनए है तभी तो एक ही पीस मिलके रह गया यानी यहां पे नो रिस्ट्रिक्शन एंजाइम एक्टिविटी बस एक बड़ा सा पीस है जो पूरा डीएनए है बस वही का वही यानी हमने डीएनए के टुकड़ों को सेपरेट भी कर लिया साइज और डेंसिटी के बेसिस पर और हमने यह भी चेक पता चल जाएगा कि रिस्ट्रिक्शन एंजाइम ने काम किया भी है कि नहीं अगर किया होगा बेटा तो ही टुकड़े मिलेंगे तो ही अलग-अलग मिलेंगे नहीं तो नहीं मिलेंगे अब आपको पता है कि मेरा यह वाला पीस है सपोज तो बस अब ये आप निकाल लोगे एक्चुअली दिखता कुछ नहीं है अभी ये सब ट्रांसपेरेंट होता है इसमें इथरियस ब्रोमाइड डालते हैं कैंसर तक हो जाता है उसे बड़ा ध्यान से यूज करते हैं और फिर भी कुछ नहीं दिखता फिर अल्ट्रावायलेट रेज डालते हैं तब ये ब्राइट ऑरेंज बैंड्स की तरह दिखते हैं तो यहां पर हम क्या करते हैं डीएनए फ्रेगमेंट्स इसमें बहुत क्वेश्चन आता है विजुलाइज्ड विजुलाइज्ड विथ थीडिया ब्रोमाइड थडियूम इड पर इससे भी कुछ नहीं दिखेगा फॉलो बाय फॉलो बाय अल्ट्रावायलेट रेज यूवी रेज फॉलो बाय अल्ट्रावायलेट रेज और तब ये हमें दिखेंगे ब्राइट और रेंज बैंड्स के रूप में हर पॉइंट पर क्वेश्चन आता है ब्राइट ऑरेंज [संगीत] बैंड्स आपने तो डीएनए लिया वेल में डाला इलेक्ट्रिसिटी रन की पीसे मिल गए इथरियस ब्रोमाइड डाला यूवी रेज डाली तो जहां जहां डीएनए के टुकड़े थे ब्राइट ऑरेंज बैंड्स मिले आपको पता है कि आपके इंसुलिन वाला यह साइज था तो इस लेवल पर जितने भी टुकड़े मिले पीसे मिले उनको आप निकालेंगे ठीक है तो मैंने क्या कहा है वेरी इंपॉर्टेंट थडियूम इड फॉलो बाय यूवी रेज एंड ब्राइट ऑरेंज बैंड्स तीनों इंपॉर्टेंट क्वेश्चंस है वेरी वेरी इंपोर्टेंट जब पूरा डीएनए निकालना था तो चिल्ड इथेनॉल डाला था और यहां जब डीएनए के पीसेज को चेक करना है देखना है विजुलाइज करना है तो थेरियम ब्रोमाइड फॉलो बाय यूवी रेज और डीएनए फिंगर प्रिंटिंग अगर आपको याद हो मॉलिक्यूलर बेसेस तो वहां पर एक्सरेज डालकर बैंड्स को देखा जाता था इ इट वेरी वेरी वेरी क्लियर एक एक शब्द समझ आ रहा है यानी हम क्या कह सकते हैं कि जो इलेक्ट्रो फोसिस है जेल इलेक्ट्रो फोसिस उससे हमने एक तो टुकड़ों को सेपरेट कर लिया उसके अलावा हमने वी कैन आल्सो चेक प्रोग प्रेशन ऑफ प्रोग्रेशन ऑफ प्रोग्रेशन ऑफ डाइजेस्टिव एक्टिविटी डाइजेस्टिव एक्टिविटी ऑफ रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस हमने यह भी पता करा है कि रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस ने काम किया कि नहीं किया भाई अगर रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस ने काम किया है तो ही पीसे बनेंगे वरना टुकड़े बनेंगे ही नहीं तो इस फोर्थ लेन में हमें पता चला कि यहां पर रिस्ट्रिक्शन एंजाइम ने काम नहीं किया अब आपको इस पीस को निकालना भी तो है तो क्या करते हैं जैसे इस पीस को निकालना है ना पहले पूरा जेल कट करेंगे इतना टुकड़ा जेल का उसके अंदर डीएनए भी है फिर डीएनए को निकालेंगे उस पीस को इसे इल्यूजन कहते हैं जब पूरा डीएनए निकाला था चिल्ड इथेनॉल डालने के बाद तो उसे स्पूलिंग कहा था यहां पर जेल पीस निकालकर उसमें से डीएनए निकालेंगे उसे इल्यूजन कहेंगे सो सेपरेटेड बैंड्स आर कट आउट सेपरेटेड बैंड्स ये जो बैंड है जो भी अब आपको चाहिए सेपरेटेड बैंड्स आर कट आउट फ्रॉम फ्रॉम क्या लिखू बेटा एरोस जेल फ्रॉम एरोस जेल एंड एंड एक्सट्रैक्टेड फ्रॉम जेल पीस फिर उसमें से डीएनए बाहर भी निकालेंगे एक्सट्रैक्टेड फ्रॉम जेल पीस पहले जेल का टुकड़ा कट किया और फिर उसमें से डीएनए कट किया ये बैंड्स किसके ऑफकोर्स डीएनए की बात कर रहे हैं इस प्रोसेस को कहते हैं इल्यूजन बेटा इनमें बिल्कुल कंफ्यूजन नहीं होना चाहिए कहीं से कहीं तक भी इल्यूजन पूरा जेल कट करके जेल पीस में से डीएनए का टुकड़ा निकालना इल्यूजन है और पूरा डीएनए निकालना स्पूलिंग है पूरे डीएनए के टाइम चिल्ड इथेनॉल डाला था यहां देखने के लिए इथरियस ब्रोमाइड फॉलो बाय अल्ट्रावायलेट रेस और ब्राइट ऑरेंज बैंड्स मिलेंगे और डीएनए फिंगरप्रिंटिंग में एक्स रेज यूज की थी इज इट वेरी क्लियर एनसीआरटी का डायग्राम दिखा दूं आपको एक एक शब्द समझ में आ गया है यहां पर हमारा एंजाइम्स का पार्ट कंप्लीट हुआ है आइए इसका डायग्राम देख लेते हैं हम एक बार थ्योरी तो हमने पूरी कर ली है यह देखिए डायग्राम एनसीआरटी का डाय ्र य देख यहां पर वेल्स है मतलब यहां डीएनए लोड किया होगा मतलब यहां पर पॉजिटिव इलेक्ट्रोड होगा यहां पर नेगेटिव इलेक्ट्रोड होगा यह सबसे बड़े पीस है जो सबसे छोटा पीस है वो सबसे दूर तक जाएगा और इस लेन को देखो लेन वन हमने डायग्राम में लेन फोर बनाई थी कोई बात नहीं है यहां पर एक ही पीस मिला है यानी जो लेन वन है ये अनडाइजेस्टेड है और बाकी जो डाइजेस्टेड है वो है थ 4 मजे आ गए तो यहां पर हमने फर्स्ट टूल को समझा हमने अभी तक समझा बायोटेक्नोलॉजी क्या है यूरोपियन फेडरेशन ऑफ बायोटेक्नोलॉजी की परिभाषा ईएफबी की डेफिनेशन क्या है टू प्रिंसिपल्स जेनेटिक इंजीनियरिंग एंड बायोप्रोसेस इंजीनियरिंग क्या है जीन क्लोनिंग कैसे करते हैं फर्स्ट आर डीएनए कैसे कंस्ट्रक्ट हुआ था कब हुआ था किन्होला समझे लाइजिंग एंजाइम समझे पूरा डीएनए निकाला फिर रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस उसकी वर्किंग उसकी डिस्कवरी उसकी नम म क्लेचर उसका पलिंड्रोम वो सब अंडरस्टैंड किया और फिर हमने समझा कि इन पीसेज में से हम अपना डिजायर्ड पीस कैसे निकालेंगे जेल इलेक्ट्रो फोसिस ऑफकोर्स हमने वेक्टर डीएनए को भी सेम आर से कट करके डीएनए से लागेज से जॉइन करवाएंगे पर उसके पहले हमें समझना है वेक्टर्स कौन-कौन से हैं किस होस्ट के लिए कौन सा वेक्टर यूज करते हैं वेक्टर बनने के लिए क्या-क्या क्वालिफिकेशन होनी चाहिए वो सब यानी अब हम सेकंड हथियार की बात करेंगे क्लोनिंग वेक्टर पहले इतना अच्छे इस एक बार देखो ऑलराइट सो आइए अब हम पढ़ते हैं क्लोनिंग वेक्टर्स के बारे में मजे आ रहे हैं चलिए बहुत इंपॉर्टेंट टॉपिक है सेकंड हथियार सेकंड टूल सेकंड ओजार क्लोनिंग वेक्टर इसे आप जीन टैक्सी भी बोल सकते हो इसी में बिठाकर आप डिलीवर करोगे अपने फॉरन जीन को होस्ट के अंदर तो वेक्टर क्या है वेक्टर एक ऐसा डीएनए है च अ यू कैन से च इ यूज्ड टू ट्रांसफर या डिलीवर जो भी आपका फॉरेन जीन है डिजायर्ड जीन है जीन ऑफ इंटरेस्ट है उसे होस्ट के अंदर पहुंचाना ताकि फिर वहां पर उसकी मल्टीपल कॉपीज बने और हमें वो प्रोडक्ट मिले उस डीएनए को कहेंगे अब वेक्टर बनने के लिए कुछ क्वालिफिकेशन होनी चाहिए तो आइए देखें वेक्टर के क्या-क्या फीचर्स होते हैं पहला फीचर जैसा मैंने आपको बताया वेक्टर में काबिलियत होनी चाहिए अपनी मल्टीपल कॉपीज बनाने की तभी हमारा डिजायर्ड डीएनए की भी मल्टीपल कॉपीज बनेंगी उसे कहते हैं ओराई यानी ओरिजन ऑफ रेप्प यानी ऐसे जीनस होने चाहिए उस डीएनए में उस वेक्टर में जिससे उसकी मल्टीपल कॉपीज बने जब वह होस्ट के अंदर जाए सो सीक्वेंस फ्रॉम वेयर रेप्स स्टार्टस सीक्वेंस फ्रॉम वेयर रेप्स बेटा रेप्स है ये इसे ट्रांसक्रिप्शन कर देंगे गलत हो जाएगा आया हुआ है प्रीवियस ईयर में ऐसी गलती रेप्ट केशन जहां से शुरू होगा ओराई कहते हैं अब यही कंट्रोल्स कॉपी नंबर कॉपी नंबर मतलब कितनी कॉपी बनेंगी मतलब कितनी मल्टीपल कॉपीज बना सकते हैं आपको क्या लगता है दो वेक्टर है मेरे पास में एक जिसका हाई कॉपी नंबर है एक जिसका थोड़ा कम कॉपी नंबर है यानी एक वेक्टर को होस्ट में डालूंगी तो हज कॉपी बना देगा एक जो 12 कॉपी बनाएगा आप किसे प्रेफर करोगे बोलिए डेफिनेटली लॉजिक है रटना नहीं है वेक्टर विद हायर कॉपी नंबर प्रेफर्ड जितनी ज्यादा कॉपी बनाएगा उतना अच्छा है उतना ज्यादा अपना फॉरन डीएनए की भी कॉपीज बनेंगी अब सबसे कॉमनली दो वेक्टर्स होते हैं मोस्ट कॉमन मोस्ट कॉमन एक प्लाज्मिड हमने आज भी बार-बार पढ़ लिया है और एक वायरस बैक्टीरियोफेज अगर आपको होस्ट बैक्टीरिया लेना है आपको पता है वायरस बैक्टीरियोफेज मटेरियल होस्ट में डाल सकता है तो आप अपना फॉरन जीन वायरस के जीन के साथ अटैच कर दो आर डीएनए बना दो ताकि जब उसका डीएनए जाएगा वायरस का इनटू दी बैक्टीरिया तो आपका फॉरन जीन भी चला जाएगा तो जो बैक्टीरियोफेज है ये भी मोस्ट कॉमन वेक्टर्स में आते हैं और इनका काफी अच्छा हाई कॉपी नंबर भी होता है बहुत बढ़िया वेक्टर्स हैं एंड नंबर टू प्लाज्मिड प्लाज्मिड हमें पता है एक्स्ट्रा क्रोमोसोमल डीएनए है बैक्टीरिया के अंदर मिलता है डबल स्ट्रैंडेड है सर्कुलर है और ऑटोनोमस रेप्ट है अब प्लाज्मिड जो होते हैं इनके कॉपी नंबर जो होता है कॉपी नंबर ये कुछ-कुछ प्लाजमिड्स होते हैं जो एक से दो कॉपी ही बनाते हैं सेल के अंदर जाकर लेकिन कुछ-कुछ प्लाजमिड्स जो होते हैं वो 15 से 100 या इवन हायर कॉपी नंबर भी हो सकता है और इवन हायर पर सेल मतलब या तो एक से दो कॉपी बनाएंगे आपने एक डाली तो बस उससे एक और बना दी या 15 से 20 और इवन हायर भी बना सकते हैं यह सारा एनसीआरटी का डाटा है इसीलिए बहुत ज्यादा इंपॉर्टेंट है अब इसके बाद इस राई में एक चीज और होनी चाहिए और उसे बोलते हैं आरओ आरओ क्या है बेटा यह पूरी थ्योरी में कहीं नहीं लिखा है ये सिर्फ डायग्राम में दिया है एक्चुअली जब रेप्प होगा तो उसके लिए कुछ प्रोटींस चाहिए होंगे यानी एंजाइम्स चाहिए एंजाइम्स क्या होते हैं प्रोटीन ही होते हैं तो इस वेक्टर के पास ऐसे भी जीनस होने चाहिए जो इस तरह के प्रोटीन एंजाइम्स बनाए जिनसे रेप्प होता है तो आरओ पी कोड्स फॉर प्रोटींस इवॉल्वड इन रेप्ट केशन ऑफ वेक्टर जो भी वेक्टर है उसके रेप्ट में हेल्प करें अब एक बार ध्यान से सुनो इस पे प्रीवियस ईयर क्वेश्चन आया है क्या क्वेश्चन आया है कि ये कोड कर रहे हैं मतलब बेटा ये खुद जीनस है आरपी प्रोटीन नहीं है आओपी वेक्टर का वेक्टर क्या है एक डीएनए ही तो है उसका कुछ पार्ट जहां से रेप्ट केशन शुरू होगा जो जीनस रेप्ट केशन शुरू करवाएंगे वो ओराई हो गया और उस एरिया में ऐसे जीनस भी हैं जो ऐसे प्रोटीन एंजाइम्स बनवाए जिनसे रेप्ट केशन हो डीएनए से डीएनए बने उस जींस को उस एरिया को जो कोड कर रहा है इस तरह के प्रोटींस के लिए उसे आओपी कहते हैं तो किसी भी वेक्टर में ओराई का होना बहुत जरूरी है अब और क्या होना चाहिए समझो सपोज करो अगर मैंने फॉरन डीएनए को इको r1 से काटा है यानी जीए टीटीसी वाले में कट्स लगे हैं तो वेक्टर के अंदर भी जरूर ये वाली साइड होनी चाहिए ऐसा नहीं कि वेक्टर में कहीं पर जी टीटीसी है ही नहीं अगर हो गई नहीं तो फिर सेम आर से मैं कैसे कट करूंगी यानी वेक्टर के पास रिस्ट्रिक्शन साइट होनी चाहिए फॉर रिस्ट्रिक्शन एंजाइम यानी इसे क्लोनिंग साइट भी कह देते हैं यह भी होना जरूरी है वरना कैसे काम चलेगा अब एक मजेदार बात आपको बताती हूं मान लीजिए यह एक वेक्टर है इसके पास यह वाला एरिया है जो जी एटीटीसी है यानी इको आरव के लिए साइट है जब आप इको आरव डालोगे तो यह पीस कट हो जाएगा यानी इतना बचेगा यहां पर आप अपना फॉरन डीएनए आसानी से जोड़ दोगे डीएनए लागेज की हेल्प से गुड नो प्रॉब्लम मान लो एक और वेक्टर है उसमें इको आव की थ्री साइड्स है तीन जगह हैं इको आरव के लिए जब आप इको आव डालोगे तो इको आरव इन तीनों जगह पे कट लगाएगा यानी आपको ऐसे टुकड़े मिलेंगे क्योंकि ये सब टुकड़े टुकड़े हो गए हैं यहां तो एक ही टुकड़ा हुआ था अलग पर यहां पर ये तीन टुकड़े अलग हुए हैं यानी आपको मल्टीपल फ्रैग मेंट्स मिलेंगे क्या मिलेंगे मल्टीपल फ्रेगमेंट्स और अगर मल्टीपल फ्रेगमेंट्स मिलेंगे तो मुझे यह बताओ कि फिर आप अपना फॉरन डीएनए कहां घुसाओ ग भाई डीएनए लागेज ने मान लो यहां पर घुसा भी दिया इस जगह पर यह पीस हटा यहां लगा दिया तो बाकी तो टुकड़ा टुकड़ा हो गया तो मल्टीपल फ्रेगमेंट्स हो गए ये तो सारी कॉम्प्लिकेट हो गई पूरा जो प्रोसेस है यह तो कॉम्प्लिकेट हो गया कॉम्प्लिकेट हो गया अगर मल्टीपल टुकड़े मिल रहे हैं और मल्टीपल टुकड़े कब मिलेंगे जब मोर देन वन क्लोनिंग साइट होगी फॉर अ स्पेसिफिक रिस्ट्रिक्शन एंजाइम एक पर्टिकुलर रिस्ट्रिक्शन एंजाइम के लिए अगर मल्टीपल क्लोनिंग साइट्स हुई तो यह प्रॉब्लम आ जाएगी इसीलिए वेक्टर के अंदर किसी एक रिस्ट्रिक्शन एंजाइम के लिए एक ही साइट होनी चाहिए हां हो सकता है दूसरे रिस्ट्रिक्शन एंजाइम के लिए भी कोई साइट हो वो प्रॉब्लम नहीं है क्योंकि एक बार में एक ही तरह का रिस्ट्रिक्शन एंजाइम तो यूज करोगे जो भी करोगे वो वाला एक पीस कटेगा और वहां फॉरन डीएनए जुड़ जाएगा यानी क्लोनिंग साइड्स जो है दे शुड बी वेरी फ्यू प्रिफरेबली सिंगल इस पे पी वाई क्य आया है प्रिफरेबली सिंगल फॉर स्पेसिफिक एक रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस एक रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस के लिए वन रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस के लिए वन ही क्लोनिंग साइड होनी चाहिए वाई य असर्शन रीजन का क्वेश्चन भी बन सकता है क्योंकि अगर एक से ज्यादा हुई तो मल्टीपल फ्रेगमेंट्स मिलेंगे और सारा प्रोसेस कॉम्प्लिकेट हो जाएगा इज इट क्लियर वेरी वेरी क्लियर चलिए अब आइए हम देखते हैं और क्या क्वालिटी होनी चाहिए अगर उस डीएनए को वेक्टर बनना है अब समझो उसके अंदर रेप्ट केशन के साइड तो होनी चाहिए ताकि मल्टीपल कॉपीज बने क्लोनिंग साइड भी होनी चाहिए तभी तो कट होगा फॉरन डीएनए वहां जुड़ेगा उसके अंदर कुछ ऐसे जीनस होने चाहिए जिससे हम पता कर सके कि हमारा फॉरन डीएनए होस्ट के अंदर पहुंचा भी है कि नहीं मान लो वो पहुंचा ही नहीं है और हम बिना बात कल्चर कर रहे हैं इतना पैसा इतना समय इतना मैन पावर लगा रहे हैं यानी उसके पास कुछ ऐसे मार्कर्स होने चाहिए जिससे हम सिलेक्ट कर सके कि होस्ट ट्रांसफॉर्म हुआ भी है या नहीं तभी तो हम उसका कल्चर वगैरह करेंगे उन जीनस को कहेंगे सिलेक्टेबल मार्कर ये जीनस ही है सब कुछ क्योंकि ये डीएनए है डीएनए जीनस किसे कहते हैं वो डीएनए जिससे आरएनए और प्रोटीन बनता है तो दिस हेल्प्स अस इन आइडेंटिफिकेशन एंड एलिमिनेटिंग किसे एलिमिनेट करोगे जिसका ट्रांसफॉर्मेशन नहीं हुआ है नॉन ट्रांसफॉर्मेंट्स फ्रॉम ट्रांसफॉर्मेंट अभी और डिटेल में समझाऊ डोंट वरी हमें सिर्फ उसी को कल्चर करना है जिसमें हमारा फॉरन डीएनए पहुंचा है हमें बाकियों को कल्चर करने की कोई जरूरत ही नहीं है क्योंकि चांस की बात है हो सकता है रिस्ट्रिक्शन एंजाइम ने टुकड़े नहीं किए हो सकता है डीएनए लाइज ने जोड़ा नहीं हो सकता है आरडीएनए बना लेकिन अंदर घुसा नहीं यह सब चांस की बात है जब सारे चांस पॉजिटिव आएंगे तब जाकर सक्सेसफुल होता है तभी तो यह सब सुपर स्पेशलाइज चीज हैं और उसके बाद हम सिलेक्टिवली सिलेक्टिवली परमिट करेंगे परमिटिंग ग्रोथ ऑफ ग्रोथ ऑफ किसकी ग्रोथ करवाओ ग जहां पर डी फॉरन डीएनए अंदर घुसा है यानी जहां पर जेनेटिकली मॉडिफाई हुआ है होस्ट यानी ट्रांसफॉर्मेंस और उसमें भी रकम बिनेट उसका क्या मतलब है अभी थोड़ी सी देर में समझ में आएगा थोड़ी सी देर में अभी बहुत मस्त तरीके से समझाऊ कभी कुछ भी नहीं भूलोगे आ जाओ समझो समझो सपोज करो यह होस्ट है ई कोलाई होस्ट ठीक है इसके पास का खुद का डीएनए है जिनोमिक डीएनए जिनोमिक डीएनए अब देखो तीन सिचुएशंस हो सकती है ध्यान से सुनना सपोज करो मैंने r डीएनए बनाया मैंने वेक्टर लिया उसे कट किया अपना फॉरेन डीएनए कट किया वही पहले पूरा डीएनए निकाला होगा रिस्ट्रिक्शन एंजाइम से कट किया होगा जेल इलेक्ट्रो फोरोस से पीस ढूंढा होगा वेक्टर डीएनए को भी सेम आरई से कट किया होगा डीएनए लाइ गज की हेल्प से दोनों को जॉइन किया होगा यह बना आरडीएनए और यह इसके अंदर चला गया यह फर्स्ट सिचुएशन है कि यह इसके अंदर आ गया फिर इसके अंदर मल्टीप्लाई करेगा ठीक है ये ये फर्स्ट सिचुएशन है सपोज चलो सेकंड सिचुएशन सपोज करो आरई ने मेरा फॉरन डीएनए कट ही नहीं किया या डीएनए लागेज ने वेक्टर डीएनए और मेरे डीएनए को जोड़ा ही नहीं कुल मिलाकर कुल मिलाकर कुल मिलाकर पता केवल जो अकेला वेक्टर डीएनए है यह सब दिखता नहीं है क्योंकि यही अंदर गया हमारा फॉरन डीएनए अंदर नहीं गया यह सेकंड सिचुएशन है तो एक में आर डीएनए पूरा अंदर गया है पोरन जीन भी और दूसरे में केवल वेक्टर डीएनए अंदर गया है यह सेकंड सीन है आर डीएनए गया या वेक्टर डीएनए अच्छा ऐसा भी तो हो सकता है कुछ अंदर ही नहीं गया आरडीएनए बना आपने या नहीं बनाया पर जब आप ट्रांसफॉर्म कर रहे हो डाल रहे हो तो डला ही नहीं ऐसा भी तो हो सकता है तो कुछ भी अंदर नहीं गया थर्ड सिचुएशन कुछ भी अंदर गया ही नहीं है कुछ नहीं गया अंदर अब समझो इस केस में बताओ मुझे होस्ट ट्रांसफॉर्म हुआ कि नहीं हुआ क्योंकि बाहर से कुछ नया आया है तो ट्रांसफॉर्म इस केस में इसमें भी तो बाहर से कुछ नया आया है जो होस्ट का खुद का नहीं है यह भी ट्रांसफॉर्म्ड है पर इस केस में तो कुछ भी अंदर नहीं गया ना आरडीएनए गया ना वेक्टर डीएनए गया यानी होस्ट में कोई चेंज ही नहीं आया होस्ट बस खुद के जैसा ही है यानी नॉन ट्रांसफॉर्म तो एक तो अगर नॉन ट्रांसफॉर्म है तो तो खेल ही खत्म हो गया बात ही खत्म हो गई हमें आगे बढ़ना ही नहीं है एक्सपेरिमेंट दोबारा करेंगे अच्छा इनमें से भी आप कौन सा वाला करना चाहोगे ये यहां पे आर डीएनए गया है तो इसे री कॉमिनेशन बोलेंगे क्योंकि रकॉम बिनेट आपका फॉरन जीन भी गया है यहां पर ये ट्रांसफॉर्म तो हुआ है कुछ नया तो आया है पर आर डीएनए नहीं है आपका फॉरेन डीएनए नहीं है डिजायर्ड डीएनए नहीं है तो इसे नॉन र कॉमिनेशन बोलेंगे तो डेफिनेटली हम ट्रांसफॉर्म और नॉन ट्रांसफॉर्म में से नॉन ट्रांसफॉर्म को तो आगे बढ़ाना ही नहीं चाहते पर हम इनमें से भी इसे आगे बढ़ाना चाहते हैं और इसे आगे बढ़ाना नहीं चाहते हमारे का सिर्फ यह है सिर्फ ये तो यह मतलब है कि कुछ वेक्टर के अंदर ऐसे मार्कर ऐसे जीनस होने चाहिए जो हमें हेल्प करें कि नॉन ट्रांसफॉर्म कौन सा है उसे आइडेंटिफिकेशन की हमने बात की है अगर आर डीएनए हो सकता है फॉर्म ही ना हुआ है इज इट वेरी वेरी क्लियर चलिए अब आइए हम बात करते हैं कौन-कौन से सिलेक्टेबल मार्कर्स होते हैं तो आइए हम पहला सिलेक्टेबल मार्कर पढ़ते हैं दैट इज एंटीबायोटिक रेजिस्टेंट जीन ध्यान रखो एंटीबायोटिक मार्कर नहीं है बेटा एंटीबायोटिक रेजिस्टेंट जीन जो है वो हेल्प करेगा हमें पता लगाने में यह जीन है वेक्टर के अंदर तो यह है सिलेक्टेबल मार्कर एंटीबायोटिक नहीं है इ इट वेरी वेरी क्लियर चलिए आइए समझते हैं करें ट्राई आगे बढ़े चलो आइए एग्जांपल से आपको समझाती हं देखो सपोज करो य इ कोलाई ठीक सपोज कोलाई होस्ट होस्ट इसके पास यह खुद का डीएनए है जिनोमिक डीएनए इससे हमें कोई मतलब नहीं है जिनोमिक डीएनए अब मान लीजिए कि जो वेक्टर है ध्यान से सुनना मान लो कि जो वेक्टर है उसके पास एक एरिया है यहां पर टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंट जीन है टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंट जीन का मतलब है कि इस जीन के कारण कुछ ऐसे प्रोटींस बनते हैं जिसके कारण यह प्लाज्मिड जिस भी बैक्टीरिया में होगा वो टेट्रासाइक्लिन में मरेंगे नहीं रेजिस्टेंट रहेंगे ठीक है और इसी जीन के एरिया में सपोज करो एक एग्जांपल की तरह बता रही हूं मैं इको आव की भी साइट है मान लो मतलब अगर आपने इ को आरव डाला तो इसी एरिया में कट लगेगा कट लगेगा तो टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंस देने वाला जीन डैमेज हो जाएगा और अब यह बैक्टीरिया टेट्रासाइक्लिन में मर जाएगा धीरे-धीरे समझ आ रहा है ठीक है चलो अब मैंने क्या किया सपोज इको आव से कट किया इको आव से कट किया टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंस जीन डैमेज हो गया और मैंने अपने फॉरन डीएनए को भी इ को आव से कट कि और यह मैंने अपना फॉरन डीएनए जो भी जीन है इंसुलिन बनाने वाला जीन है मान लो यहां डाल दिया मैंने इ को आरव से किया टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंस जीन इनेटिव हो गया टूट गया मर गया कट गया और फॉरन डीएनए डाल के मैंने आरडीएनए बना लिया ठीक है और मैंने इसे मैंने इसे इस आर डीएनए को इसके अंदर डाल दिया यहां पर क्या हुआ है अब क्या होगा मुझे बताओ यह बैक्टीरिया टेट्रासाइक्लिन में जिंदा रहेगा या नहीं रहेगा फर्स्ट सिचुएशन की बात करते हैं पहले तो मुझे बताओ कि बैक्टीरिया इकोला होस ट्रांसफॉर्म है या नहीं ट्रांसफॉर्म तो है क्योंकि इसके पास बाहर से कुछ आया है ठीक है रिकम बिनेट है या नहीं रिकम बिनेट भी है क्योंकि आर डीएनए आया है ठीक है अब मुझे बताओ अगर मैंने से टेट्रासाइक्लिन में डाला टेट्रासाइक्लिन एंटीबायोटिक में डाला तो यह जिंदा रहेगा या नहीं रहेगा सिर्फ इतना बताओ भाई जहां टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंट जीन था वहां तो आपने उसे कट कर दिया उसमें फॉरन डीएन घुसा दिया वो जीन तो बेकार हो गया यानी अब इस ई कुलाई को टेट्रासाइक्लिन से कोई रेजिस्टेंस नहीं मिलेगा यानी ये टेट्रासाइक्लिन में मर जाएगा इतना समझ आया अच्छा इसी के पास यह भी एक एरिया था ये एमपी सिलिन से रेजिस्टेंस देता था आपने अपना जीन यहां घुसाया है टेट्रासाइक्लिन वाला जीन जो था रेजिस्टेंस वाला वो बेकार हो गया है इन एक्टिव हो गया टूट गया टेट्रासाइक्लिन डालने प रेजिस्टेंस नहीं आएगा वो मर जाएगा पर एमपी सिलन वाला जीन तो अभी भी मौजूद है रेजिस्टेंस देने वाला तो अगर आपने इसे एमपी सिलन के अंदर डाला तो क्या होगा बताओ एमपी सलिन एंटीबायोटिक के अंदर तो उसका रेजिस्टेंट जीन तो मौजूद तो य जिंदा ठीक है अच्छा अगर कॉमिनेशन में डाल दो टेट्रासाइक्लिन प्लस एमसन भाई टेट्रासाइक्लिन के कारण मर रहा है एमसिन के कारण जिंदा रह रहा है पर एक भी चीज से मरेंगे तो मर ही गए ना ऐसा थोड़ी होता है तु मर गया आओ एक सिचुएशन में आपको और देती एक सिचुएशन और देती सेकंड सिचुएशन सपोज करिए अगेन ये था इधर एमपी से रेजिस्टेंट जीन है इधर टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंट जीन है ये इको आरव की साइट है ठीक है और यहां पर पीएसटी व पीएसटी व की साइड है अभी आपने अपने फॉरन डीएनए को इको आरव से काटा था कट किया था तो वेक्टर को भी इको r1 से कट किया था इसीलिए ये वाला इनटिटर आप पीएसटी वन से कट करोगे तो ये एरिया कट हो जाएगा यानी अभी ऐसा कुछ सिचुएशन बनेगी कि टेट्रासाइक्लिन वाला तो मौजूद है यह तो मौजूद है क्योंकि आपने इ को आव से तो कट किया ही नहीं है लेकिन यहां पर आपका फॉरन डीएनए घुसा है इस जगह पर इस जगह पर यानी अभी भी आरडीएन बना है हां बिल्कुल बना है बिल्कुल बना है और इसे आपने अंदर डाल दिया सिचुएशन टू अभी भी होस्ट ट्रांसफॉर्म हो रहा है हां हो रहा है अभी भी होस्ट रिकम बिनेट है हां है क्या होस्ट टेट्रासाइक्लिन में जिंदा रहेगा जिंदा रहेगा एमपी सलिन में मर जाएगा दोनों के कॉमिनेशन में भी मर जाए इतना क्लियर हुआ डन आ रहा है समझ में नोट करो दोनों सिचुएशन समझ में र है ट्रांसफॉर्म रमने दोनों है ट्रांसफॉर्म रमने बेटा दोनों है चलो अब थर्ड सिचुएशन समझो सपोज करो आपको भले ही इ को आव से कट करना था या पीएसटी व से कट करना था पर कट नहीं हुआ जिससे भी कट करना था नहीं हुआ यानी आरडीएनए बना ही नहीं केवल वेक्टर डीएनए ही था आर डीएनए नहीं बना यह वेक्टर डीएनए है आर डीएनए नहीं बना आपने इसे अंदर डाल दिया क्या यहां पे ट्रांसफॉर्म हुआ है हां हुआ है क्योंकि कोई नया डीएनए आया है क्या यहां रकम बिनेट बना है नहीं बना है क्योंकि आरडीएनए नहीं बना है अब बोलो क्या एंपीसिलीन में और टेट्रासाइक्लिन में डालने पे क्या हो अब ये दोनों जीनस एक्टिव है आपने किसी को कट नहीं किया किसी को इन एक्टिव नहीं किया टेट्रासाइक्लिन में भी जिंदा रहेगा एमपी सिलिन में भी जिंदा रहेगा दोनों के मिक्सचर में भी जिंदा रहेगा जिंदा रहेगा ठीक है सिचुएशन समझ आ रही है इन बहुत प्यारे क्वेश्चन आते हैं अब फोर्थ सिचुएशन है कि फोर्थ सिचुएशन कि कुछ भी अंदर नहीं गया फोर्थ कुछ भी अंदर नहीं गया यानी नॉन ट्रांसफॉर्म पहली तीन सिचुएशन में ट्रांसफॉर्म था जिनमें से फर्स्ट टू सिचुएशन में तो रकम बिनेट भी था ऑफकोर्स अगर नॉन ट्रांसफॉर्म होता है तो नॉन रिकम बिनेट भी होगा नेचुरल सी बात है इसमें कोई बड़ी तोप बात नहीं है अब क्या होगा सुनो अब इसके अंदर ना तो टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंस जीन आ रहा है ना एमपी सिलन रेजिस्टेंट जीन आ रहा है और नेचुरली जो इ होता है इसके पास नेचुरली यानी खुद का खुद का कोई रेजिस्टेंस नहीं होता है अगेंस्ट एंटीबायोटिक्स ये जो एंटीबायोटिक्स है एंपीसिलीन टेट्रासाइक्लिन इनके खिलाफ इसके पास कोई जीन नहीं है जो इसे रेजिस्टेंस देता हो तो इसके पास तो कोई रेजिस्टेंस है ही नहीं बाहर से कोई ऐसा जीन आ नहीं रहा यानी आप टेट्रासाइक्लिन में डालोगे तो भी मर जाएगा एमसन में डालोगे तो भी मर जाएगा मिक्सचर में तो मर ही जाए यानी अब कितना आसान है सपोज करो कि मैंने इको आव से कट किया है सपोज तो मुझे मालूम है कि अगर दोनों में डालने पे मर गया है मेरा इ कोलाई होस्ट यानी यह सिचुएशन है एक्सपेरिमेंट फेल है मुझे आगे नहीं बढ़ना अच्छा मुझे ये भी मालूम है कि अगर दोनों में जिंदा रहा तो भी नॉन रिकम बिनेट है एक्सपेरिमेंट फेल मुझे आगे नहीं बढ़ना हां अगर एक में मर रहा है और एक में जिंदा रह रहा है मर उसमें रहा है जो वाला आरई मैंने यूज करा है और जिंदा दूसरे में रह रहा है मतलब यह सक्सेसफुल है तो अगर दोनों में मर रहा है तो नॉन ट्रांसफॉर्म है अगर दोनों में जिंदा है तो ट्रांसफॉर्म बट नॉन रकम बिनेट है हां एक में जिंदा एक में मर रहा है मतलब अपने काम का है तो हमें इससे पता चल गया हमने ट्रांसफॉर्म को नॉन ट्रांसफॉर्म से एलिमिनेट कर दिया और रिकम बिनेट को नॉन रमने से अलग कर दिया इन जीनस ने हमारी हेल्प करी है किसकिस एंटीबायोटिक के लिए जीनस होते हैं एंपसन अभी देखा हमने टेट्रासाइक्लिन क्लोरमेक्वाट [प्रशंसा] एंड क्लोरमेक्वाट यूज करना है पर्टिकुलर इ कोलाई होस्ट अ इधर लिख दूं इ कोलाई होस्ट तो इन चार वालों को यूज किया जाता है एक्चुअली इ कोलाई होस्ट के पास नेचुरली इनके खिलाफ कोई रेजिस्टेंट जीन नहीं होता है अगर मान लो इकोला के पास खुद भी एमपी सिलें रेजिस्टेंट जीन होता तो फिर हम यह सब कुछ इतना अच्छे से पता नहीं कर पाते हैं तो इसीलिए होस्ट वेक्टर सब कुछ देखकर चूज किया जाता है सुपर स्पेशलाइजेशन की ब्रांच है समझ आया दोनों में मर गया नॉन ट्रांसफॉर्म दोनों में जिंदा रहा ट्रांसफॉर्म बट नॉन रकम बिनेट दोनों ही हमारे काम के नहीं है हमारे काम का तब है जब एक में मरे और एक में जिंदा रहे किसम मरेगा जिस वाले जीन के एरिया में आपने आरई वो वाला ही यूज करा है तो आप ने उस पीस को इनक्टो कर दिया पता है इसे क्या बोलते हैं सुनो ध्यान से आपने टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंस जीन को इनक्टो ऑफ फॉरेन जीन आपने यहां पे फॉरेन जीन इंसर्ट करके इसे इन एक्टिव कर दिया इसे ही तो बोलते हैं इंसर्च इनक्टो रेजिस्टेंट जीन को इनक्टो फॉरन डीएनए ये भी क्या है इंसर्च इनक्टो अ नहीं हुआ क्योंकि फॉरन डीएनए इंसर्ट ही नहीं हुआ हो सकता है कि फॉरन डीएनए कट ही नहीं हुआ होगा आरई से या हो सकता है डीएनए लागेज ने नहीं जोड़ा हम नहीं जानते कहां पर क्या हुआ है हम नहीं जानते मजे आए चलिए आइए तो इंसल इन एक्टिवेशन दिस इज व्हाट फर्स्ट एंड सेकंड फर्स्ट एंड सेकंड में हुआ है इंसल इन एक्टिवेशन इंसल इ एक्टिवेशन हो गया समझ अब सुनो बड़ा ध्यान से ये बड़ा कमसम प्रोसेस नहीं है पहले एक एंटीबायोटिक में डालोगे फिर कुछ बैक्टीरिया दूसरी एंटीबायोटिक में डालोगे फिर चेक करोगे इट विल टेक टाइम आपको दोनों एंटीबायोटिक में डाल के देखना पड़ेगा तब पता चलेगा दोनों में मर रहा है नॉन ट्रांसफॉर्म दोनों में जिंदा है ट्रांसफॉर्म बट नॉन रिकॉमिन एक में मर रहा है एक में जिंदा है तो ट्रांसफॉर्म रिकॉमिन यानी इसमें बहुत टाइम लगता है बहुत कंबरसम प्रोसेस है इट्स अ कंबरसम प्रोसेस है तो अच्छा तरीका लेकिन टाइम लेता है कमसम एंटीबायोटिक रेजिस्टेंट जीन सिलेक्टेबल मार्कर जो है ये कमसम प्रोसेस है और इसीलिए साइंटिस्ट ने कोई दूसरा तरीका खोजा और वो दूसरा तरीका है लैक जड जीन दिस इज द सेकंड सेकंड सिलेक्टेबल मार्कर जी जी ये भी है सिलेक्टेबल मार्कर जीन समझे इसको चलिए अब लैक जड जीन क्या होता है आपने मॉलिक्यूलर बेसिस ऑफ इनहेरिटेंस पढ़ा है उसमें आपको याद है जड वा ए तीन जीनस थे जड जीन से बीटा गैलेक्टो साइड एंजाइम बनता था वा से परमस बनता था और ए से ट्रांस एटाइड होता है यह बीटा गैलेक्टो साइड एंजाइम बनवा है य बीटा गैलेक्टो साइड क्या करता है किसको याद है भाई यह क्या करता था जब लैक्टोज आएगी तो यह लैक्टोज को तोड़ता था ग्लूकोज प्लस गैलेक्टोज में ग्लूकोज प्लस गैलेक्टोज क्योंकि लैक्टोज एक डाई सकरा इड है वन ग्लूकोज और वन गैलेक्टोज से मिलकर बनती है तो ये लैक्टोज को तोड़ता था याद आ रहा है ये लैक्टोज को तोड़ता था इनटू ग्लूकोज प्लस गैलेक्टोज इतना तो याद है सबको और जब ये ग्लूकोज गैलेक्टोज में तोड़ता है उस समय पर अगर आपने एक ऐसा कोई सबस्ट्रेट डाला वो इस ग्लूकोज गैलेक्टोज के कारण से ब्लू कलर दे देता था इस बैक्टीरिया को ब्लू कलर कलर दे रहा है कलर देने वाला तो इसे क्रोमोजेनिक सबस्ट्रेट बोलते हैं क्रोमा मतलब कलर मैंने क्या कहा फिर से सुनो ध्यान से मैंने आपसे यह कहा कि मान लीजिए यह इ कोलाई बैक्टीरिया है इ कोलाई बैक्टीरिया है मान लो यह इसके पास लैक जड जीन है ठीक है यह लक जड जीन अगर मौजूद है तो यह लैक्टोज डालने पर बीटा गैलेक्टो साइडेड एंजाइम बनाएगा और लैक्टोज को ग्लूकोज गैलेक्टोज में तोड़ेगा और लैक्टोज जब टूटेगा तो ब्लू कलर आएगा तो अगर बैक्टीरिया के जो कॉलोनी बन रही है जो कॉलोनी बन रही है अगर उस कॉलोनी में ब्लू कलर आ रहा है इसका मतलब लैक्टोज ब्रेक डाउन हुआ है इसका मतलब बीटा गैलेक्टो साइडेड एंजाइम बना है इसका मतलब लैक जड जीन एक्ट इतना समझ में आया बिल्कुल अच्छे से समझ में आया आया समझ में मैंने आपसे क्या कहा मैंने आपसे कहा फर्स्ट सिचुएशन सपोज करो कि आर डीएनए नहीं बना यानी ट्रांसफॉर्म तो हुआ आपने सिर्फ वेक्टर डाला यह सपोज य इलाई हटा देती हूं आप कंफ्यूज हो जाओगे जो भी वेक्टर है जो भी वेक्टर है वेक्टर डीन पलामे है जो भी तो अगर आपने केव केल प्लाज मेंट डाला केवल प्लाज मेंट डाला तो आर डीएनए नहीं बना है यानी इस जीन के साथ कोई छेड़छाड़ नहीं हुई है ओनली वेक्टर ओनली वेक्टर इनटू होस्ट नो आरडीएनए अगर ऐसा हुआ है अगर ऐसा होस्ट अगर ऐसा होस्ट है तो क्या होगा बेटा यह फर्स्ट सिचुएशन होगी यहां पर लैक जड जीन एक्टिव रहेगा और अगर वो एक्टिव रहेगा तो जैसे ही आप लैक्टोज डालोगे लैक्टोज ग्लूकोज गैलेक्टोज में ब्रेक डाउन होगा क्योंकि जीन एक्टिव है बीटा गैलेक्टो साइड एंजाइम बनेगा यानी लैक्टोज एक कलर देने वाले सबस्ट्रेट की तरह बिहेव करेगा और फटाफट फटाफट ब्लू कलर की कॉलोनी बन जाएंगी होस्ट की होस्ट की होस्ट की ब्लू कॉलोनी बन जाएंगी लेकिन सेकंड सिचुएशन मैं आपको देती हूं मान लीजिए कि यहां पर लैक जड जीन था और यहां पर इको आरव की भी साइट थी आपने अपने फॉरेन डीएनए को भी इको आरव से काटा लग जीन इस तरफ वेक्टर को भी इ को आरव से कट किया तो ये लैग जड जीन डिस्ट्रॉय हो गया यानी आपका फॉरन डीएनए यहां पर इंसर्ट हो गया यह बन गय फॉरन डीएनए आ गया यानी ये आर डीएनए बन गया फॉरन डीएनए एंड वेक्टर डीएनए यानी ये आर डीएनए बन गया यहां पर अभी सिर्फ वेक्टर डीएनए था ये फर्स्ट सिचुएशन है य सेकंड सिचुएशन में केवल आर डीएनए बन गया है अब इस आर डीएनए को आपने होस्ट में डाला तो होस्ट ट्रांसफॉर्म्ड भी है और होस्ट रकम बिनेट भी है रकम बिनेट भी है अगर होस्ट र कॉमिनेशन है इसका मतलब है कि लैक जड जीन जो है इसका इंसर्च इन एक्टिवेशन हो गया है यानी फॉरन जीन इंसर्ट करने के लिए इसका एक्टिवेशन हो गया ये कट गया था यहां कट लग गया था यानी अब बीटा गैलेक्टो साइड एंजाइम नहीं बनेगा यानी अब लैक्टोज डालने पर वो ग्लूकोज गैलेक्टोज में नहीं टूटेगा और अगर वो नहीं टूटेगा तो कोई कलर नहीं आएगा यानी वाइट कॉलोनी बनेंगी या कलरलेस कॉलोनी बनेंगी य एक झटके में ही हमने पता कर लिया बेटा मैं फिर कहती हूं देखो कितना आसान है रटना है ही नहीं चीजों को अगर आपने जैसे मैं बोलती हूं होस्ट नॉन र कॉमिनेशन है नॉन रिकॉम बिनेट मतलब आर डीएनए अंदर नहीं पहुंचा है आर डीएनए अंदर नहीं पहुंचा मतलब फॉरन डीएनए इंसर्ट नहीं हुआ है फॉरन डीएनए जब इंसर्ट ही नहीं हुआ है तो लैक्ड जीन भी डैमेज नहीं हुआ है जब लैक्ड जीन मौजूद है एंजाइम बनेगा लैक्टोज डालोगे ब्लू कलर आएगा ब्लू कॉलनी मैं कहती हूं रमने मतलब आरडीएनए बना है आरडीएनए बना है तो यानी फॉरन डीएनए इंसर्ट हुआ यानी लक्ड जीन इनेटिव हुआ है यानी एंजाइम नहीं बनेगा लैक्टोज नहीं टूटेगा वाइट कॉलोनी आ तो कितना इजी तो है रीम बिनेट में वाइट कॉलोनी एंड नॉन रिकम बिनेट में ब्लू कॉलनी इज इट वेरी वेरी क्लियर एक सिंगल स्टेप से ही हमने यहां पर पता कर लिया एक सिंगल स्टेप से पता कर लिया बिल्कुल अच्छे से समझ में आ गया तो यहां पर हमने समझा कि किसी भी डीएनए को अगर वेक्टर की तरह बिहेव करना है यूज होना है तो उसके अंदर एक राई होनी चाहिए हाई कॉपी नंबर होना चाहिए आओपी होना चाहिए क्लोनिंग साइट्स प्रिफरेबली सिंगल फॉर अ स्पेसिफिक आरई होना चाहिए और सिलेक्टेबल मार्कर या तो एंटीबायोटिक रेजिस्टेंट जीन या लगड जीन होना चाहिए डन चलिए आइए तो यह सब मैंने आपको बता दिया है और अब मैं आपको बताऊंगी एक आर्टिफिशियल क्लोनिंग वेक्टर ये सब एक एक वर्ड हमने पढ़ लिया है जो साइंटिस्ट ने बनाया है जो साइंटिस्ट ने बनाया है पीबीआर 322 यह पहला आर्टिफिशियल वेक्टर है भाई प्लाजमेटिक लेबोरेटरी में साइंटिस्ट ने बनाया है इसका नाम है पीबीआर 322 पी मतलब ये प्लाज्मिड बनाया है साइंटिस्ट ने यानी वही डबल स्टैंडर्ड सर्कुलर ऑटोनोमस रेप्ट केटिंग डीएनए बीआर का मतलब है बोलीवर एंड रोड्रिक्स बेटा ये साइंटिस्ट के नाम है जिन्होंने इसे कंस्ट्रक्ट किया है कंस्ट्रक्टेड बाय और ये उस लैब का एक्स नंबर था 322 इसका पूरा नाम है पीबीआर 322 मजे आ गए अब अगर यह एक आर्टिफिशियल प्लाजमिड्स मेंड हमेशा सर्कुलर होता है तो यह भी ऐसे सर्कुलर होगा आपको एक स्टोरी से याद कराऊंगा इतना एक बार बनाइए फिर हम इसे डिकोड करेंगे चलो अब यहां पर सबसे पहले इसको ऐसे याद करो ढ़ सा बजे देखो यह घड़ी है अगर तो यह करीब 6 बजेगा तो ये 7 7:30 बजे ओरिजन हुआ ओरिजन हुआ ओरिजन हुआ मतलब दो लोगों ने चलना शुरू करा कहां चलना शुरू करा एक गैप बना देती हूं एयरपोर्ट पे चलना शुरू करा एयरपोर्ट के लिए चलना शुरू करा एयरपोर्ट मतलब इस एरिया में एमपी सिलन रेजिस्टेंस वाला जीन है कौन थे वो दो लड़के उनके नाम है पवन और प्रशांत यानी पवन पीवीयू वन पीवीयू वन एंड प्रशांत पीएसटी व प्रोटियस वल्गैरिस नाम के बैक्टीरिया से मिलता है प्रोटियस जीनस है वल्गर स्पीशीज है स्ट्रेन कोई नहीं होता है उससे फर्स्ट आइसोलेटेड आ रही है और यह प्रोविडेंट स्टाय अगेन बैक्टीरिया तो 7:30 बजे प्रशांत और पवन ने एयरपोर्ट के लिए चलना शुरू करा वहां पर जाकर उन्होंने क्या किया वहां पर पहुंचकर उन्होंने इकोनॉमी क्लास की टिकट खरीदी इकोनॉमी क्लास की टिकट खरीदी यानी यहां पर इको आरव की साइट है यानी अगर इको आरव को यूज करोगे तो इस एरिया में कट लगाएगा इकोनॉमी क्लास यानी क्लावन और हिंदुस्तान के थर्ड टर्मिनल से उनकी फ्लाइट थी यानी हिंद थ्री वही हिमोफिलस इनफ्लुएंस आरडी स्ट्रेन सो इकोनॉमी क्लास की टिकट खरीदी हिंदुस्तान के थर्ड टर्मिनल से उनकी फ्लाइट थी हिंदुस्तान के थर्ड टर्मिनल से ठीक है क्लियर हो गया इस एरिया में कोई भी सिलेक्टेबल मार्कर जीन नहीं है अब फ्लाइट के बाहर उन्हें मिला सलमान खान मैंने क्या कहा मैंने कहा फ्लाइट के बाद हर बाहर यानी भाम एचव उन्हें मिला सलमान खान यानी सालवन यह सब अलग-अलग बैक्टीरिया है और फ्लाइट कहां जा रही थी फ्लाइट जा रही थी टर्की यानी यहां पर है टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंस वाला सिलेक्टेबल मार्कर जीन इस पूरे एरिए में यहां मैं फिर कहती हूं 7 7:30 बजे ओराई यानी प्रशांत पवन ने चलना शुरू करा एयरपोर्ट के लिए प्रशांत और पवन पीएस टू पी एसटी व प्रशांत पीवीयू वन पवन इकोनॉमी क्लास की टिकट खरीदी हिंदुस्तान के थर्ड टर्मिनल से फ्लाइट थी इको r1 क्लावन हिंद थ्री बाहर सलमान खान मिला फ्लाइट के फ्लाइट टर्की जा रही थी तो बाम एचप साल वन और टेट्रासाइक्लिन वन थोड़ी देर के लिए वो भच के रह गए यानी यहां पर एक गैप बना देती हूं ये मैंने गैप बना दिया यहां पे कोई स्पेशल एंजाइम नहीं है और फिर क्या हुआ फिर प्रशांत जोड़ जो सॉरी पवन जोर-जोर से रोने लग गया पवन जोर जोर से रोने लग गया यानी इस एरिए में रोना रोप यानी वो जीनस है जो वो प्रोटीन बनाएंगे जो रप्ल में हेल्प करते हैं और साथ में पवन तो बहुत ही बड़ा फैन था तो उसने सलमान खान को दो बार छूकर भी देखा बस यह बन गया पीबीआर 322 मतलब अगर आपने इको आरव क्लावन हिंद थ पीवीयू टू से कट किया तो आप पता नहीं कर पाओगे ट्रांसफॉर्म नॉन ट्रांसफॉर्म रिकॉमिन नॉन र ट क्योंकि इन एरियाज में कोई सिलेक्टेबल मार्कर जीन नहीं है हां अगर आपने बाम h1 या सालवन से कट किया है फॉरन डीएनए को और इसको भी तो टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंस वाला जीन जो है ये डैमेज हो जाएगा इनक्टो हो जाएगा टेट्रासाइक्लिन में मर जाएगा होस्ट एंपीसिलीन में जिंदा रहेगा और अगर आपने पीएसटी व या पीवी व में से किसी से फॉरन डीएनए और वेक्टर डीएनए को कट किया तो एमपी सिलिन रेजिस्टेंस वाला इनक्टो हो जाएगा और एमपी सिलिन में होस्ट मर जाएगा और टेट्रासाइक्लिन में जिंदा रहेगा यानी अगर मैं आपसे पूछूं कि इसके अंदर कितनी क्लोनिंग साइट्स है या रिस्ट्रिक्शन साइट्स है क्या कहोगे बोलो कितनी क्लोनिंग साइट्स है टूथ फर 5 6 7 8 8 और कितने सिलेक्टेबल मार्कर जीनस है सिलेक्टेबल मार्कर जीनस कितने है टू एक एमसिन रेजिस्टेंस और एक टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंस इस के अलावा ओराई है और रोप है मजे आ गए सिर्फ पीएसटी व और पीवीयू वन से कट करोगे तो एंपीसिलीन वाला लॉस हो जाएगा उसमें मर जाएगा होस्ट और अगर बाम h1 सालवन से कट करोगे तो टेट्रासाइक्लिन वाला इन एक्टिव हो जाएगा उसमें होस्ट मर जाएगा बिल्कुल अच्छे से समझ में आ रहा है एट रिस्ट्रिक्शन एंजाइम की साइट है और ध्यान से देखो हर एंजाइम के लिए एक ही साइट है हमने यही तो कहा था कि हर एंजाइम के लिए एक साइट होनी चाहिए वही तो है यहां पर देखो सारे वन है केवल ये हिंदुस्तान का थर्ड टर्मिनल है और पवन का टू है भाई पीवीयू वन तो यहां लिख ही चुके हैं तो यहां टू है मैं बड़ा कंफ्यूज होती थी पीवीयू टू है या पीएसटी टू है याद रखना बजरंगी भाईजान में पवन नाम था सलमान खान का पवन नाम बहुतों में है उनका तो यहां पीवी यटू हो जाएगा ठीक है चलो आ जाओ तो ये रहा एनसीआरटी वाला डायग्राम ये देखिए 730 अराउंड ओराई है उसके बाद एयरपोर्ट के लिए प्रशांत और पवन चले इकोनॉमी क्लास की हिंदुस्तान थर्ड टर्मिनल से उनकी टिकट थी बाहर उन्हें सलमान खान मिला फ्लाइट टर्की जा रही थी पवन ने दो बार छूकर देखा और रोने लग गया तो ये एरिया और यह एरिया इंपॉर्टेंट है क्वेश्चन के हिसाब से यह आपको याद होना चाहिए वो बोलेंगे बाम एचव से कट किया वो नहीं बोलेंगे टेट्रासाइक्लिन रेजिस्टेंस वाला जी ने आपको पता होना चाहिए चलिए इतना नोट करो अब हम पढ़ते हैं कि ये तो बैक्टीरिया होस्ट है अगर प्लांट होस्ट है एनिमल होस्ट है आप कहोगे मैम ऐसा भी हो सकता है हां हो सकता है भाई मान लो एक जुगनू है रात को चमकता है मैंने उसका वो रात में चमकने वाला जीन निकाला जिससे ऐसा प्रोटीन बनता है जिससे रात में चमकता है मैंने उसे पेड़ के सेल के अंदर डाल दिया पेड़ के सारे सेल्स में वो रात में चमकने वाला जीन हो गया पेड़ रात में चमकेंगे ऐसे पेड़ों को सड़क किनारे लगा दो स्ट्रीट लाइट की जरूरत ही नहीं पड़ेगी तो प्लांट भी होस्ट हो सकता है एनिमल भी होस्ट हो सकता है वहां कौन से वेक्टर यूज करते हैं अब वो देखते हैं इतना फटाफट से नोट कर लो सब लोग ऑलराइट स्टूडेंट्स मजे आ रहे हैं पढ़ने में चलिए आइए तो अब हम बात करते हैं अगर प्लांट एनिमल यूज करना है एज होस्ट तो क्या करेंगे सो वेक्टर्स अभी वेक्टर्स प ही चल रहे हैं अपन सेकंड हथियार पे वेक्टर्स फॉर प्लांट्स एंड एनिमल ए हो अगर हम इन्ह होस्ट की तरह यूज कर रहे तो कौन से वेक्टर्स प्रेफर्ड होते हैं वहा हर जगह होस्ट हमने कोलाई या बैक्टीरिया लिया है नाउ इसे समझाने के पहले मैं आपको कुछ और समझाती हूं सुनिए ध्यान से एक मिट्टी में मिलने वाला बैक्टीरिया होता है जिसका नाम है एग्रो बैक्टीरियस क्या बोला मैंने एग्रो ट्यूम फेसिन नाम से ही समझ में आ रहा है ये बैक्टीरिया है एग्रो बैक्टीरियस एक्चुअली होता क्या है सपोज करो यह एक पेड़ है यह इसके रूट्स है मिट्टी में मिट्टी में ही यह बैक्टीरिया है यह इस बैक्टीरिया का एग्रो बैक्टीरियस का मान लो नॉर्मल डीएनए है जेनेटिक डीएनए जिनोमिक डीएनए अब इसके पास में कुछ प्लाज्मिड होता है स्पेशल प्लाज्मिड प्लाज्मिड के पास ऐसे जीनस हैं ये बैक्टीरिया जब इसको इफेक्ट करता है तो अपना प्लाज्मिड अंदर भेजता है आपको पता है रूट एक ऑर्गन है ऑर्गन टिश्यू का बना है टिश्यू सेल्स का बना है तो यहां पे जो रूट का सेल है वो ये जब प्लाज्मिड उसके अंदर घुसता है और इसके पास ऐसे जीनस हैं जिनसे ऐसे प्रोटींस बनते हैं जिससे ये सेल्स धड़ाधड़ धड़ाधड़ धड़ाधड़ डिवाइड करने लग जाते हैं यानी ये कैंसरस सेल बन जाते है ट्यूमर बनाने वाले गठान बनाने वाले सेल्स में कन्वर्ट कर देता है और ये सेल्स ऐसे फटाफट फटाफट फटाफट डिवाइड करके ऐसे गठान गठान बना लेंगे लाइक दिस ऐसा क्यों हो रहा है इसकी कोई दुश्मनी नहीं है एक्चुअली जब ये सेल्स इतना मल्टीप्लाई करेंगे तो उन सेल्स के अंदर ऐसे केमिकल्स बनते हैं जो इस बैक्टीरिया को भी ग्रोथ कराते हैं मल्टीप्लाई कराते हैं यानी मैंने आपसे कहा कि इसके पास ट्यूमर इंड्यूस ंग प्लाज्म है ऐसा प्लाज्मिड जो ट्यूमर करवा देगा टीआई का मतलब ट्यूमर करवाने वाला ट्यूमर इंड्यूस प्लाज्मिड पीआई प्लाजमिड्स मेंड और उसमें भी एक पर्टिकुलर पार्ट है जिसे टी डीएनए कहते हैं जो एक्चुअली वो जीनस है यानी ट्रांसफर डीएनए ये ट्रांसफर होगा जब तभी एक नॉर्मल सेल कैंसरस सेल में कन्वर्ट हो जाएगा तो यह ट्रांसफर करेगा इनटू रूट सेल यह बैक्टीरिया केवल और केवल डाकड के पेड़ों को इफेक्ट कर सकता है किसे कर सकता है डाईकोट अगर यह गेहूं का पेड़ हुआ चावल का पेड़ हुआ गन्ने का पेड़ हुआ तो इफेक्ट नहीं होगा तो यह रूट सेल को करता है डाकड पेड़ों को करता है यह है टीआई प्लाज्मिड और उसमें भी पर्टिकुलर टी डीएनए इसने क्या किया है इसने नॉर्मल रूट सेल को कैंसरस सेल में कन्वर्ट कर दिया है ट्यूमर बनाने वाले सेल में कन्वर्ट कर दिया है और क्यों कर दिया है कैंसरस या ट्यूमर सेल में क्योंकि इनसे इनके अंदर ऐसे केमिकल्स बनते हैं जो इस बैक्टीरिया की ग्रोथ कराते हैं दे प्रोड्यूस केमिकल्स फॉर ग्रोथ ऑफ बैक्टीरिया तो अपने फलने फूलने के लिए इसने नॉर्मल सेल को कैंसरस सेल में कन्वर्ट किया ताकि बहुत सारे सेल्स हो बहुत सारा केमिकल बने और बहुत सारी ग्रोथ हो यानी क्या मैं यह बोल सकती हूं कि यह एग्रो बैक्टीरियल ट्यूम फेसिन एक्चुअली बीमारी कर रहा है इट इज पथोजेनिक टू डाकड प्लांट्स बोल सकती हूं ना यह बीमारी कर रहा है ये डिजीज कर रहा है ये रूट्स में नोड्यूल्स गठने बनवा है जिससे पेड़ धीरे-धीरे मर जाएगा पथोजेनिक साइंटिस्ट का दिमाग घूमा साइंटिस्ट ने कहा एक बात तो है कि इसका यह प्लाज्मिड और य टी डीएनए जो है यह प्लांट सेल के अंदर जाता है क्यों ना हम इसके साथ अपना फॉरन डीएनए जोड़कर भेज दे तो जब यह प्लांट सेल के अंदर जाएगा जिसे हमें होस्ट की तरह यूज करना है और अपनी मल्टीपल कॉपीज बनाएगा तो हमारे फॉरन डीएनए की भी मल्टीपल कॉपीज बन जाएंगी यानी इसे कहते हैं नेचुरल जेनेटिक इंजीनियर ये जेनेटिक इंजीनियर है नेचुरल जेनेटिक इंजीनियर जहां पर भी प्लांट होस्ट होगा नेक्स्ट चैप्टर में हम देखेंगे वहां पर हर जगह एग्रो बैक्टीरियल ट्यूम फेसिन ही यूज करते हैं पर प्रॉब्लम यह है मान लो आपने एक नीम के पेड़ के अंदर फॉर एग्जांपल आपका रात में चमकने वाला जीन डालकर इसके साथ भेज भी दिया तो पेड़ तो रात में चमकेगा लेकिन कुछ दिन में तो पेड़ में ट्यूमर बन रहा है तो पेड़ तो मर जाएगा तो क्या करते हैं बेटा इस पूरे टीआई प्लाज्मिड में वो जीनस जो बीमारी करते हैं जो एक्चुअली नॉर्मल सेल को कैंसरस सेल में कन्वर्ट कर रहे हैं उसे साइंटिस्ट काट के फेंक देते हैं यानी इसे डिस आर्म कर देते हैं इसका हथियार हटा देते हैं इसे मॉडिफाई कर देते हैं इस तरह से मॉडिफाई करते हैं कि ये बीमारी ना करें नो मोर पथोजेनिक टू प्लांट बट स्टिल एबल टू डिलीवर आवर डिजायर्ड जीन हमारा डिजायर्ड जीन तो जोड़ दे वो अंदर पहुंचा के मल्टीप्लाई करवा दे और जो बीमारी करने वाला जीन है उसे काट कर फेंक दें ये साइंटिस्ट ने इसका तोड़ निकाला यानी पेड़ों में अब बात करते हैं प्लांट्स के लिए क्या होता है केवल टीआई प्लाज्मिड नहीं लिखूंगी मैं मॉडिफाइड या डिसम नॉर्मल प्लाज्मिड डाल दोगे तो मर जाएगा टीआई प्लाज्मिड ऑफ एग्रो बैक्टीरियल अब पूरा नाम नहीं लिख रही हूं एक बार लिख चुकी हूं क्यूमी पेशियन इस तरह से मॉडिफाई किया है कि नो मोर एनसीआरटी की लाइन है सब नो मोर पथोजेनिक टू प्लांट्स बट बट स्टिल फिर भी स्टिल एबल टू डिलीवर फॉरन जीन बट स्टिल एबल टू डिलीवर फर जीन इनटू प्लांट सेल ऑ कोर्स अभी भी वह फॉरन जीन अंदर घुसा पा रहा है लेकिन वह अब पेड़ के लिए पथोजेनिक नहीं है तो जब भी प्लांट अगर होस्ट है तो मॉडिफाइड टीआई प्लाजमेटिक को यूज किया जाता है इसी तरह एनिमल्स में क्या यूज करते हैं आपको मालूम है रेट्रो वायरस जो होता है रेट्रो वायरस क्या होता है जैसे एचआईवी भी एक रेट्रो वायरस है रेट्रो वायरस मतलब उसमें आरएनए जेनेटिक मटेरियल है वायरस अगर एक एनिमल को अटैक करेगा तो अपना जेनेटिक मटेरियल आरएनए अंदर डालेगा उस आरएनए से डीएनए बनेगा रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन फिर डीएनए से आरएनए प्रोटीन और दूसरे वायरस यानी मल्टीप्लाई करता है साइंटिस्ट ने सोचा अगर एनिमल सेल के अंदर कुछ घुसाना है तो रेट्रो वायरस के साथ जोड़कर भेज देते हैं रेट्रो वायरस को वेक्टर की तरह यूज करते हैं पर अगेन वही पंग कि वो तो बीमारी करता है तो बीमारी करने वाले जीनस काट के फेंक दो यानी वही डिसम या मॉडिफाइड रेट्रो वायरस डिसम या मॉडिफाइड रेट्रो वायरस यूज करेंगे जहां पर भी एनिमल को होस्ट की तरह यूज करना है यानी अब वो नॉर्मल सेल को कैंसरस सेल में चेंज नहीं कर पाएगा नो मोर पथोजेनिक फंडा सेम है यहां पर रेट्रो वायरस यूज करेंगे एनिमल अगर होस्ट है और यहां पर टी आई प्लाजमैक्लस्टर जो है कॉम्पटन होस्ट कॉम्पटन होस्ट अब हमने ये सीख लिया एंजाइम्स कौन से यूज होंगे वेक्टर कौन सा होगा प्रोकैरियोटिक होस्ट में प्लांट होस्ट में एनिमल होस्ट में अब हमें क्या करना है आर डीएनए जो बना है उससे होस्ट को ट्रांसफॉर्म करना यानी आर डीएनए को होस्ट के अंदर घुसाना है अब समझो पहली चीज डीएनए हाइड्रोफिलिक मॉलिक्यूल होता है वाटर लविंग मॉलिक्यूल और आपको पता है प्लाज्मा मेंब्रेन में लिपिड की बाय लेयर है तो वो उसे क्रॉस नहीं कर पाता है वेरी वेरी इंपोर्टेंट हाइड्रोफिलिक इंपोर्टेंट है सो इट कैन नॉट क्रॉस द सेल मेंब्रेन लेकिन आप तो चाहते हो कि होस्ट के अंदर वो घुसे तो क्या करते हैं होस्ट को कंपीट बनाने के लिए पहले उसे ट्रीट करते हैं डाई वेलेंट कटाय से जैसे कैल्शियम ca2 प् बहुत कॉमनली यूज होता है कैल्शियम आयस होगा क्या जब आप डावेन कटाय से ट्रीट करोगे तो उसकी एफिशिएंसी बढ़ जाएगी उसमें छोटे-छोटे छेद आ जाते हैं बेटा जिसके कारण से वो जो डीएनए है वो इजली अब अंदर एंटर कर सकता है सेल वॉल में पहले पोर्स हो जाते हैं तो हुआ क्या पहले हमने उस होस्ट सेल को फॉर एग्जांपल इ कोलाई बैक्टीरिया है उसे डाई वेलेंट कटाय जैसे कैल्शियम क्लोराइड मान लो उसके अंदर डाल दिया उसमें सेल बॉल में छोटे-छोटे पोर्स हो गए छेद हो गए वो अच्छे से अटैच हो गया अब क्या करते हैं हम इस बैक्टीरिया को 42 डिग्री सेल्सियस गर्मी फिर बर्फ आइस फिर 42 डिग्री सेल्सियस गर्मी फिर आइस शॉक देते हैं और इसके कारण वो डीएनए अंदर घुस जाता है क्या कहा मैंने आपसे पहले आइस फिर 42 डिग्री फिर आइस फिर 42 डिग्री ऐसे करते हैं इस तरह से वो अंदर चला जाता है ये एक तरीका है दिस इज वन वे हीट शॉक ट्रीटमेंट दूसरा तरीका होता है अगर एनिमल सेल के अंदर घुसाना है तो इंजेक्शंस आते हैं उसके अंदर हम फॉरेन डीएनए को डायरेक्ट लोड करते हैं और इवन न्यूक्लियस के अंदर तक आप दे सकते हैं पर ये केवल एनिमल सेल में अगर होस्ट है क्योंकि बैक्टीरियल सेल और प्लांट सेल में सेल वॉल होती है सेल वॉल में इंजेक्शन नहीं लगा सकते जैसे अपनी हड्डी में थोड़ी ना इंजेक्शन लगा सकते हैं तो दूसरा तरीका है माइक्रो इंजेक्शन ये सेकंड तरीका का है न्यूक्लियस ऑफ एन एनिमल सेल उसमें आरडीएनए को डायरेक्टली इंजेक्ट कर देंगे पर सिर्फ एनिमल सेल में यूज होगा इसी तरह प्लांट सेल में डीएनए डालने का एक और तरीका है छोटी-छोटी बुलेट्स बनाते हैं गोल्ड और टंगस्टन की और स्पेशल गंस बनाते हैं जीन गन बोलते हैं इसे एनिमल में यूज नहीं कर सकते हो क्योंकि एनिमल में सेल वॉल नहीं है सीधे प्लाज्मा मेंब्रेन डैमेज हो जाएगी और एक पर्टिकुलर हाई वेलोसिटी पर फायर करते हैं बहुत हाई नहीं होनी चाहिए नहीं तो आर पार चला जाएगी गोली बुलेट जिसमें डीएनए लोड करा है बहुत स्लो नहीं होना चाहिए नहीं तो बाउंस बैक कर जाएगी इसे बोलते हैं जीन गन या बायोलिम यह है थर्ड मेथड इस पे भी बहुत क्वेश्चंस आते हैं यह प्लांट्स के लिए सूटेबल है गोल्ड या टंगस्टन जो है उस पर हम डीएनए कोट करेंगे और हाई वेलोसिटी पर इनको बंबा ंग करेंगे ठीक इसके अलावा डिसर्न्ड पैथोली तो मैंने आपको बताया दिए हैं एज वेक्टर्स इसमें डिसम रेट्रोवायरस अगर एनिमल होस्ट है और डिसम एग्रोबैक्टेरियम ट्यूम फेसिन का टीआई प्लाजमेटिक प्लांट होस्ट है इन सब तरीके से भी हम आरडीएनए को होस्ट के अंदर डाल सकते हैं इज इट क्लियर इसके अलावा दो तरीके और होते हैं एक इलेक्ट्रोपोरेशन वहां इलेक्ट्रिसिटी के थ्रू इलेक्ट्रिक अ करेंट्स के थ्रू हम पहुंचाते हैं इलेक्ट्रोपोरेशन छेद करके वही परमीबिलिटी इंक्रीज कर देते हैं और एक पॉलीएथिलीन ग्लाइकोल पॉलीएथिलीन ग्लाइकोल जिसे पीजी बोलते हैं इससे इसके थ्रू भी आप होस्ट को और आरडीएनए को पॉलीएथिलीन ग्लाइकोल में डाल दो तो भी ये हेल्प करता है डीएनए को अंदर जाने में ये केमिकल मेथड है तो ये छह तरीके हैं एक हीट शॉक ट्रीटमेंट इसमें पहले डाई वेलेंट कटाय सच एज कैल्शियम से ट्रीट करेंगे सेल वॉल में ट्रांजियंट पोर्स बनेंगे फिर उसे 42 डिग्री सेल्सियस आइ 42 डिग्री सेल्सियस आइज यानी हीट शॉक देंगे अंदर घुस जाएगा दूसरा एनिमल्स के लिए माइक्रो इंजेक्शन तीसरा प्लांट्स के लिए जीन गन गोल्ड या टंगस्टन की कोटेड विद डीएनए बुलेट्स है माइक्रो बुलेट्स है मैक्रो कर देंगे रॉन्ग हो जाएगा हाई वेलोसिटी पे देते हैं देन डिसम पैथोलैब एंड देन पॉली एथिलीन ग्लाइकोल सो इस तरह से हम अंदर घुसा दे अब आइए हम बात करेंगे प्रोसेसेस की तैयार है चलो तो इतना नोट कर लो फिर हम प्रोसेसेस की बात कर चलिए यह पता है किसका डायग्राम है हालाकि पूरा नहीं दिख रहा ये स्पूलिंग का डायग्राम है यह देखो स्पूलिंग स्पूलिंग और कहीं नहीं लिखी हुई है सिर्फ यहां डायग्राम में बना है ये डीएनए के वाइट वाइट धागे धागे हैं और ये स्पूलिंग से हम निकाल रहे हैं चलिए आइए तो क्या-क्या प्रोसेसेस होंगे हम सीरियल ऑर्डर में लिखते हैं अब आपके लिए ये सब बहुत इजी है क्योंकि मैं ऑलमोस्ट सब कुछ आपको पढ़ा चुकी हूं प्रोसेसेस ऑफ बायोटेक्नोलॉजी जेनेटिक इंजीनियरिंग कुछ भी बोल दो बोलो जी सबसे पहले क्या करोगे इनके स्टेप्स पर भी क्वेश्चन आता है सबसे पहले आप पूरा जेनेटिक मटेरियल बाहर निकालो पूरा डीएनए यानी आइसोलेशन ऑफ जेनेटिक मटेरियल बोलो कैसे निकालो सबसे पहले आप लाजस एंजाइम यूज करोगे लाजस सेल वॉल तोड़ोगे अगर है सेल मेंब्रेन प्लाज्मा न्यूक्लियर मेंब्रेन आरएनए डालोगे आरएनए टूटेगा प्रोटीज डालोगे प्रोटीन टूटेगा फिर आप चिल्ड इथेनॉल डालोगे फाइन थ्रेड्स के रूप में बाहर आएगा डीएनए और फिर स्पूलिंग प्रोसेस से उसको बाहर निकाल लोगे यह है पहला स्टेप आइसोलेशन ऑफ जेनेटिक मटेरियल उसके बाद क्या करोगे उसके बाद रिस्ट्रिक्शन एंजाइम चूज करके उसे डालोगे ताकि डीएनए के टुकड़े हो जाए सो कटिंग ऑफ डीएनए कटिंग ऑफ डीएनए एट स्पेसिफिक साइड्स क्योंकि पर्टिकुलर पैलेडम साइड्स पर ही पर्टिकुलर रिस्ट्रिक्शन एंजाइम कट लगाता है सो दिस विल बी द सेकंड स्टेप एंड दिस विल बी डन बाय रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस ऑफकोर्स वेक्टर के साथ भी सेम रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस पर हम काम करेंगे चलो इसके बाद क्या करोगे इसके बाद आप अपना डिजायर्ड टुकड़ा ढूंढो सो सेपरेट एंड आइसोलेट सेपरेट एंड आइसोलेट डिजायर्ड डीएनए फ्रेगमेंट अब अपन टुकड़ा लेंगे अपना वाला बोलो कैसे ढूंढोगे कौन सी टेक्निक सिखाई है जेल इलेक्ट्रो फोसिस अब इसकी डिटेल में मैं नहीं जा रही हूं यहां पर थडियूम इड भी यूज होगा फॉलो बाय अल्ट्रावायलेट रेज होगी फिर ब्राइट ऑरेंज बैंड्स बनेंगे फिर इल्यूजन टेक्निक से पीस कट कर लेंगे लिखू तो नहीं दोबारा से चलेगा सबको क्लियर है आप चाहो तो यहां लिख लेना भाई इसमें लिख देती हूं थडियूम इड फॉलो बाय यूवी रेस दिखेंगे ब्राइट ऑरेंज बैंड्स ब्राइट ऑरेंज बैंड्स और इल्यूजन टेक्निक से बाहर निकालेंगे इल्यूजन ठीक है चलो लिख भी दिया मैंने आपके लिए अब क्या करोगे बोलो अब आप कहोगे कि मैम बस डीएनए लाइ गज डाल देंगे अब सुनो ध्यान से अगर आपको वो जो डीएनए का पीस मिला है मान लो आपको दो पीस मिले हैं आप उसकी मल्टीपल कॉपीज लैब में बना के रखना चाहते हो आर्टिफिशली आपने डीएनए फिंगर प्रिंटिंग में भी पढ़ी है इन विट्रो यानी आप उसकी मल्टीपल कॉपीज करना चाहते हो यानी जीन ऑफ इंटरेस्ट का एमप्लीफिकेशन करना चाहते हो एमप्लीफिकेशन उसकी मल्टीपल कॉपीज बनाना चाहते हो ऑफ जीन ऑफ इंटरेस्ट अभी सिखाऊंगा ंगी हा फिर उसके बाद में आप डीएनए लाइ गस डाल के दोनों को जोड़ के आर डीएनए बनवा लीजिए यानी नेक्स्ट स्टेप होगा रमने डीएनए फॉर्मेशन वेक्टर डी को भी सेम रिस्ट्रिक्शन एंजाइम से कट किया था हमने तो यहां पर काम करेगा हमारा एंजाइम डीएनए लागेज डीएनए लाइज क्लियर है इतना डीएनए लाइज अब क्या करूं बोलो जल्दी अब क्या करूं अब इस आरडीएनए को अंदर डालूंगी होस्ट के इंसर ऑफ आरडीएनए इनटू होस्ट अंदर भी तो डालना पड़ेगा तभी तो होस्ट ट्रांसफॉर्म होगा बोलो कैसे डालोगे बहुत सारे तरीके हैं भाई आप डि सामड पथोजाइम या हीट शॉक के थ्रू डलवा दो या माइक्रो इंजेक्शन या जीन गन एक्सेट्रा एक्सेट्रा मतलब इलेक्ट्रोपोरेशन भी हो सकता है इसमें केमिकल मेथड भी हो सकता है चलो बोलो अब क्या करें अब चेक करना पड़ेगा इसके बाद में सिलेक्टेबल मार्कर का यूज अब हो सकता है आप लैक जड जीन को अगर कट किया था तो देखो कि ब्लू कॉलोनी आ रही है या वाइट कॉलोनी आ रही है और अगर एंटीबायोटिक रेजिस्टेंस वाली जगह का आरई यूज किया था तो फिर दोनों एंटीबायोटिक में डाल-डाल के देखना पड़ेगा दोनों में जिंदा दोनों में मर रहा है एक में जिंदा एक में मर रहा है क्या हो रहा है वो सारा आपको देखना पड़ेगा इससे आप पहचान लो कि कौन सा ट्रांसफॉर्म है कौन सा नॉन ट्रांसफॉर्म और ट्रांसफॉर्म में भी कौन सा रकम बिनेट है और कौन सा नॉन रिकम बिनेट क्योंकि हमें केवल किससे मतलब है री कम बिनेट वाले से वो बनेगा तो ही हम होस्ट को आगे कल्चर करेंगे वरना समय बर्बाद नहीं करेंगे बिल्कुल अच्छे से सीक्वेंस में समझ में आ रहा है अब मैं अपना प्रोडक्ट निकालू कीी टेन फॉरन जीन प्रोडक्ट होस्ट के अंदर जब वेक्टर आर डीएनए मल्टीप्लाई कर रहा है मेरा जीन भी मल्टीप्लाई कर रहा है और मेरा जीन एक्सप्रेस हो रहा है मेरे जीन से एमआरएनए प्रोटीन बन रहा है तो मुझे उस प्रोडक्ट को चाहिए उस प्रोडक्ट के लिए तो मैं सब कर रही हूं जैसे इंसुलिन बनाने वाला जीन फॉरन जीन मैंने इ कोलाई में डाला है तो इ कोलाई से मुझे इंसुलिन निकालना है ऑब्टेनिंग फॉरन जीन प्रोडक्ट अब भाई इलाई ने खुद भी तो अपनी कई सारी चीजें बनाई होंगी तो वो प्रोडक्ट्स भी तो मुझे मिलेंगे जब इलाई से को मैं प्रोडक्ट तो सारे ही निकलेंगे उसमें से अब मैं अपना प्रोडक्ट निकालू गी फिर मैं उसकी पैकेजिंग करूंगी अगर क्वालिटी कंट्रोल चेक करना है कोई दवाई है उसकी ट्रायल्स करनी है वो सब करूंगी कोई ऐसा प्रोडक्ट है जिसमें कोई प्रिजर्वेटिव डालने की जरूरत है तो वो डालूंगी पैकेजिंग करूंगी मार्केटिंग करूंगी सेल करूंगी ये जो पूरा होगा प्रोडक्ट बना तब से लेके मार्केट में बेचा लास्ट स्टेप सिखाऊंगा स्ट्रीम प्रोसेसिंग तो ये स्टेप्स की फ्लो चार्ट सीरियल ऑर्डर पे क्वेश्चन आते हैं एक बार नोट करो डाउन स्ट्रीम प्रोसेसिंग विल बी द लास्ट स्टेप बिल्कुल अच्छे से समझ में आ रहा है बहुत इजी है अब हमें यहां पर पीसीआर को पढ़ना है हम पीसीआर पढ़ेंगे फर्स्ट स्टेप हम ऑलरेडी पढ़ चुके हैं सेकंड स्टेप हम पढ़ चुके हैं जेल इलेक्ट्रो फोसिस हम पढ़ चुके हैं यह पढ़ चुके हैं यह पढ़ चुके हैं सिलेक्टेबल मार्कर पढ़ चुके हैं आइए देखें सो यह सारा मैंने आपको बता दिया है यह सब बता दिया यह सब हम ऑलरेडी पढ़ चुके हैं हेडिंग डालिए पीसी आर पीसीआर पीसीआर पॉलीमरेस चेन रिएक्शन पॉलीमरेस चेन रिएक्शन बहुत इजी है मस्त समझ लिया कुछ भी मुश्किल नहीं है पॉलीमरेस चेन रिएक्शन फुल फॉर्म प भी क्वेश्चन आया है इसके स्टेप्स के सीरियल ऑर्डर प भी क्वेश्चन आया है यहां पर जो भी हमारा जीन है इंटरेस्ट का फॉरन जीन है उसकी मल्टीपल कॉपीज बनाएंगे यानी उसका एमप्लीफिकेशन करेंगे एमप्लीफिकेशन उसके नंबर को बढ़ाएंगे एक मिला है तो उससे दो च 8 16 32 ढेर सारे बनाएंगे वो डीएनए ही तो है डीएनए से डीएनए बनाना है डीएनए से डीएनए तो बॉडी के अंदर भी बनता है ये तो डीएनए रेप्ट है पर यह बॉडी के बाहर बनाएंगे लेबोरेटरी में बनाएंगे यानी आप क्या बोल सकते हो एमप्लीफिकेशन का मतलब मल्टीपल कॉपीज बनाए हम किसकी मल्टीपल कॉपीज बनाएंगे फॉरेन डीएनए की जीन ऑफ इंटरेस्ट की या डीएन की बट कहां पे बॉडी के बाहर वेरी वेरी इंपॉर्टेंट बॉडी के बाहर क्या बोलते हैं रिप्रोडक्टिव हेल्थ में भी आपने पढ़ा है इन विट्रो बॉडी के अंदर तो बनी जाती है डीएनए रेपकेस पूरा मॉलिक्यूलर बेसस में हमने पढ़ा है इन विट्रो बॉडी के बाहर डीएनए की मल्टीपल कॉपीज बनाना याद है आपको डीएनए फिंगर प्रिंटिंग में भी ये स्टेप पढ़ते हैं मान लीजिए क्राइम साइड से डीएनए मिला है बड़ा कीमती डीएनए हम नहीं चाहते गुम जाए खो जाए कम पड़ जाए जब चेक कर रहे हैं कातिल कौन उस समय भी उस डीएनए का एक सिंगल सेल का भी डीएनए अगर मिला है तो उसकी मल्टीपल कॉपीज बना ली जाती है यह टेक्निक डेवलप करी थी कैरी मुली जी ने हालांकि एनसीआरटी में इनका नाम नहीं है कैरी एक कैरी खाते थे रोज वो और दो दो चार मूली खाते थे तो कैरी मली एक्चुअली एक मशीन होती है पीसीआर की जिसमें हम सैंपल डाल देते हैं डीएनए का और अपने आप उसकी मल्टीपल कॉपी बन जाती है एमप्लीफिकेशन हो जाता है इतनी बड़ी खोज थी है कि इनको नोबल प्राइज मिला था इसके लिए आज तक इतनी रॉयल्टी मिलती है कि यह उससे अरबपति बन चुके हैं चलिए करे स्टार्ट कैसे करते हैं आइए सबसे पहले मान लो ये डीएनए है 5 3 325 और सपोज करो इसका इतना पार्ट है जिसकी मुझे मल्टीपल कॉपी बनानी है यानी दिस इज डीएनए टू बी एमप्लीफाइड डीएनए टू बी एमप्लीफाइड सपोज सबसे पहले अपनी बॉडी के अंदर भी क्या होता है जब डीएनए से डीएनए बनता है दोनों पेरेंट स्ट्रैंड सेपरेट होते हैं क्यों हाइड्रोजन बॉन्ड टूटता है हमारे बॉडी के अंदर यह काम कौन करता है किसको याद है लिकेज एंजाइम जो हेलिक्स के बॉन्ड्स को तोड़ता है यहां लिकेज एंजाइम नहीं है वो बॉडी के बाहर काम नहीं कर सकता है यहां पर हम 9095 डिग्री सेल्सियस टेंपरेचर यानी हाई टेंपरेचर यानी बहुत जबरदस्त हीट देते हैं जिससे यह हाइड्रोजन बॉन्स जो होते हैं ये टूट जाते हैं और दोनों स्टैंड्स जो है बेटा वो सेपरेट हो जाते हैं तो सबसे पहले मैंने क्या किया मैंने क्या किया सबसे पहले ये इस मशीन के अंदर ऑलरेडी फीड है 90 से 95 डिग्री सेल्सियस टेंपरेचर दिया हाइड्रोजन बॉन्ड्स इतने हाई टेंपरेचर पर ऑटोमेटिक ब्रेक हो जाते हैं और जब वो ब्रेक हो जाएंगे तो दोनों स्ट्रैंड सेपरेट हो जाएंगे बोथ स्टैंड्स सेपरेट जैसा हमारी बॉडी के अंदर होता है पर बॉडी के अंदर लिकेज एंजाइम ये काम करते हैं और यहां पर इस टेंपरेचर पर ये काम हो रहा है यह पहला स्टेप है क्या बोलते हैं जब भी डीएनए के दोनों स्ट्रैंड सेपरेट होते हैं तो उसे डी नचरे कहते हैं तो डिनेचुरेशन के अंदर कोई एंजाइम का रोल नहीं है केवल हाई टेंपरेचर चाहिए 9095 डिग्री सेल्सियस जैसे ही यह होगा वैसे ही यह दोनों स्ट्रैंड सेपरेट हो गए सेपरेट हो गए सपोज ये वाला 523 है ये वाला 325 है अब ये अलग-अलग हो गए मैं प्लस लगा देती हूं हमारे बॉडी में इसके बाद क्या होता था बताइए हमारे बॉडी का मेन एंजाइम था डीएनए पॉलीमरेस थ जो कॉम्प्लीयंट छोटा सा पीस ऑफ आरएनए याद आ रहा है ऐसे ही यहां पर भी प्राइमर लगेगा प्राइमर हमेशा बेटा कहां लगता है थ्री प्राइम एंड ऑफ डीएनए पे याद आ रहा है सबको यहां पे भी दो प्राइमर लगेंगे दोनों स्टैंड्स पर अपने-अपने प्राइमर जुड़ जाएंगे यानी यहां पर हो गया प्राइमर एडिशन कितने प्राइमर लगेंगे दो प्राइमर लगेंगे प्राइमर एडिशन हमेशा कहां होता है थ्री प्राइम एंड पर होता है पेरेंट स्ट्रैंड के थ्री प्राइम एंड पर होता है कितने प्राइमर्स लगेंगे टू प्राइमर्स लगेंगे सो एडिशन ऑफ टू प्राइमर एट थ्री प्राइम एंड ऑफ पेरेंट स्टंड क्योंकि डीएनए पॉलीमरेस याद है आपको उसकी जिद है मैं टू फ ही रीड करूंगा तो दो प्राइमर लगेंगे थ्री प्राइम एंड पर इस स्टेप को बोलते हैं सेकंड स्टेप नीलिंग अलिन का मतलब प्राइमर का जुड़ना किसी चीज़ को जोड़ने के लिए बताइए बहुत हाई टेंपरेचर गर्मी चाहिए गुस्सा चाहिए या थोड़ा ठंड चाहिए जी हां थोड़ा ठंडक चाहिए तो इस स्टेप को करने के टाइम पर इस मशीन के अंदर अपने आप 50 से 65 डिग्री सेल्सियस के आसपास टेंपरेचर हो जाता है यह एक प्राइमर है यह दूसरा प्राइमर है मैं लिखवा नहीं रही हूं प्राइमर क्या होता है एक छोटा सा पीस ऑफ आरएनए होता है याद आ सबको जल्दी से नोट करो यह हो गया सेकंड स्टेप तो पहले स्टेप में हाइड्रोजन बॉन्ड्स को तोड़ा और सेकंड स्टेप में दोनों में प्राइमर्स को ऐड कर दिया अब आएगा थर्ड स्टेप अब डीएनए पॉलीमरेस का काम आएगा डीएनए पॉलीमरेस और दूसरा न्यूक्लियोटाइड्स भी तो चाहिए आपको आर्टिफिशली न्यूक्लियोटाइड भी डालनी पड़ेंगी एडिनोसिन ट्रास ग्नोसिस ट्राई फॉस्फेट थाइमेट इ ट्राई फॉस्फेट एंड यूरे यूरिडिन नहीं डीएनए है ना अ साइट साइटेड इन ट्राई फॉस्फेट ठीक है हो गया चलो अब ये क्या करता है जैसे ये हमारे ओरिजिनल पेरेंट स्ट्रैंड थे दोनों अलग-अलग हो गए थे यहां हमने प्राइमर लगाया था ये प्राइमर था प्राइमर था प्राइमर पेरेंट के थर्ड प्राइम एंड पे लगता है और जो डीएनए पॉलीमरेस है वो ऐसे और इनके कम्प्लीनोस बॉन्ड्स ऑफकोर्स बनते जाएंगे इनके बीच में और ये दोनों पेरेंट की कार्बन कॉपी है पेरेंट की कार्बन कॉपी है और फिर से सेम यही स्टोरी चलती जाएगी फिर से डिनेचुरेशन करोगे ये दोनों अलग ये दोनों अलग होंगे अब फोर पेरेंट स्टैंड्स हो गए चारों पे प्राइमर लगेंगे चारों पे डीएनए पॉलीमरेस काम करेगा इन चार से इन मतलब इन चारों पे नया स्ट्रैंड बनेगा यानी फोर डीएनए मॉलिक्यूल बन जाएंगे तो वन से टू टू से फोर फोर से एट इस तरह से ये डीएनए मॉलिक्यूल बनते जाएंगे यानी ऐसा इस थर्ड स्टेप को मैं क्या बोल सकती हूं थर्ड स्टेप को पॉलीमराइजेशन सिंपल या एक्सटेंशन क्योंकि अब पूरा डीएनए बना है या इलोंग्गो मराइन इतना क्लियर हुआ अब ये अराउंड 72 डिग्री सेल्सियस पर पॉसिबल होता है लैबोरेट्री में हमारे बॉडी में तो सब कुछ 37° पर हो रहा है फाइनली आफ्टर 30 साइकल्स अब आपको बैठ के कैलकुलेट नहीं करना एनसीआरटी की लाइन है ये वन साइकिल है ऐसे ही 30 साइकिल्स के बाद में न बिलियन कॉपीज बन जाती है न बिलियन कॉपीज ठीक है अच्छा क्या मैं इन्हें थर्मल साइकिल बोल सकती हूं बेटा क्योंकि ये टेंपरेचर पर डिपेंडेंट है फर्स्ट स्टेप होने पे 9095 डिग्री टेंपरेचर चाहिए सेकंड स्टेप में 50 से 60 65 डिग्री चाहिए और थर्ड स्टेप में 72 डिग्री के आसपास चाहिए अब सोचो इसमें इतना बड़ा क्या है जो कैरी पुलिस जी को नोबल प्राइज मिला समझो देखो ये जो डीएनए पॉलीमरेस है हमारा डीएनए पॉलीमरेस 37 डिग्री सेल्सियस पे काम करता है नॉर्मली आपको पता है 40 42 डिग्री सेल्सियस के बाद में सारे एंजाइम्स फेल हो जाते हैं क्योंकि उनके जो एंजाइम क्या है प्रोटीन है प्रोटीन मतलब पेप्टाइड बॉन्ड है तो बॉन्ड ही टूट जाता है जब बॉन्ड ही टूट जाएगा तो बा खत्म हो जाएगी काम क्या खाक करेगा जब वो बचा ही नहीं यहां कोई एंजाइम नहीं लग रहा यहां कोई एंजाइम नहीं लग रहा इन दो स्टेप्स में कोई एंजाइम नहीं लग रहा पर यहां एंजाइम लग रहा है ये चैलेंज था साइंटिस्ट के लिए इनकी बुद्धि चली बोले वो एक आर्की बैक्टीरिया होता है खोलते हुए लावा में रहता है वहां 100 डिग्री सेल्सियस से भी ज्यादा टेंपरेचर होता है लेकिन वो बैक्टीरिया वहां सरवाइव कर रहा है यानी वो वहां इतने हाई टेंपरेचर पर भी अपने डीएनए से डीएनए डीएनए से आरएनए आरएनए से प्रोटीन बना रहा होगा यानी उसका जो डीएनए पॉलीमरेस होगा वो 100 डिग्री सेल्सियस पर भी काम करता होगा थर्मोस्टेबल होगा उन्होंने उस बैक्टीरिया में से उसका पॉलीमरेस निकालकर मशीन में यूज करवाया ये इस अक्कल के लिए उनको नोबल प्राइज मिला था उस बैक्टीरिया का नाम है थर्मस एक्वाटिकस बैक्टीरिया ये उससे निकाला है तो थर्मस का टी ले लिया एक्वाटिकस का ए क ले लिया इसका नाम हो गया टैक पॉलीमरेस तो एक्चुअली ये कौन सा वाला है ये है ट कक पॉलीमरेस है क्या ये डीएनए पॉलीमरेस ही है यानी डीएनए से डीएनए ही बनवाने वाला बैक्टी एंजाइम है बट पर्टिकुलर नाम हो गया टैक पॉलीमरेस फ्रॉम थर्मस एक्वाटिकस बैक्टीरिया एक्चुअली तो ये आर्की बैक्टीरिया है क्योंकि ये स्टेप बॉडी के बाहर 72 डिग्री पर हो सकता है और 72 डिग्री का मतलब नॉर्मल ऑर्गेनिस्ट म का डीएनए पॉलीमरेस फेल हो जाएगा यह थर्मोस्टेबल है थर्मोस्टेबल कैन वर्क अप टू 110 डिग्री सेल्सियस 110 डिग्री सेल्सियस थर्मोस्टेबल है बेटा डीएनए पॉलीमरेस ही है इट इज अ डीएनए पॉलीमरेस थर्मस एक्वाटिकस से ले रहे हैं तो इसका नाम हो गया टैक पॉलीमरेस क्योंकि जब आप इसे मशीन में डालेंगे तो इसे 72 नहीं 95 डिग्री तक झेलना आना चाहिए तभी तो यह बच पाएगा और यह 100 के ऊपर तक भी झेल लेता है मजे आ गए चलो जल्दी से नोट करो फिर एनसीआरटी का डायग्राम दिखाती हूं आपको पीसीआर स्टेप्स तीनों अच्छा इस पर ऐसे भी क्वेश्चन आए हुए हैं बताइए कि किस स्टेप के बाद डीएनए रेज ऐड करोगे अलंग के बाद किस स्टेप में करोगे एक्सटेंशन स्टेप में किन टू स्टेप्स के बीच में करोगे नीलिंग एंड एक्सटेंशन के बीच में राइट चलिए एनसीआरटी का डायग्राम आपको दिखाती हूं यह देखिए रीजन टू बी एमप्लीफाइड सबसे पहले हीट यानी 9095 डिग्री सेल्सियस डिनेचुरेशन किया दोनों पेरेंट स्टैंड सेपरेट हो गए प्राइमर्स ऐड करेंगे अलंग हो जाएगा थर्ड प्राइम एंड पर प्राइमर लगाते हैं पेरेंट के फिर डीएनए पॉलीमरेस यानी टैक पॉलीमरेस और डीऑक्सी न्यूक्लियोटाइड मैंने न्यूक्लियोटाइड लिखा है डीएनए वाली है तो डीऑक्सी हो जाएंगी ये थर्ड स्टेप है एक्सटेंशन का फिर ये रिपीट होता रहेगा 30 साइकिल्स के बाद में न बिलियन कॉपीज तक बन जाती है क्लियर हो गया चलो सो वन सेकंड यह सारा हमने पढ़ लिया यह पूरा बता दिया है मैंने आपको यह सारा बता दिया है है हां अब हम नेक्स्ट आते हैं तो हमने यहां पर क्या-क्या सीख लिया आ जाओ फिर से एक बार रिवाइज कर लेते हैं हमने यहां पे सीखा सबसे पहले लाजस चिल्ड इथेनॉल स्पूलिंग से पूरा डीएनए निकाला रिस्ट्रिक्शन एंजाइम से कट किया जेल इलेक्ट्रो फोसिस से पर्टिकुलर पीस को आइसोलेट किया इथरियस ब्रोमाइड यूवी रे से देखा ब्राइट ऑरेंज बैंड्स के रूप में इल्यूजन से जेल पीस और जेल पीस से डीएनए निकाल लिया फिर पीसीआर से उसकी मल्टीपल कॉपीज बना ली फिर लाइ गज डालकर डीएनए और फॉरन डीएनए को जोड़ के आर डीएनए बना लिया फिर तरह तरह के मेथड्स के थ्रू आर डीएनए को होस्ट के अंदर डाल दिया सिलेक्टेबल मार्कर से चूज कर लिया कौन सा रकम बिनेट ट्रांसफॉर्म होस्ट अब मुझे बनाना है फॉरेन प्रोडक्ट मजे आ रहे हैं चलो अब समझो जब भी हम एक पीस ऑफ एलियन डीएनए को वेक्टर और उसके बाद होस्ट में डालेंगे कोई भी होस्ट के अंदर तो जो फॉरन डीएनए है वो मल्टीप्लाई होगा यहां पर आपका एम क्या है अल्टीमेट एम बोलो क्या है टू प्रोड्यूस अ डिजायरेबल प्रोटीन जो फॉरन डीएनए जो प्रोटीन बनाता है वो निकालना आपका उद्देश्य है ठीक है इसमें क्या करते हैं इसको कैसे करते हैं देखिए सबसे पहले एक बात समझो जैसे इंसुलिन बनाने वाला जीन मैंने इ कोलाई में डाला है नॉर्मली इंसुलिन इंसान में बनता है इ कोलाई में इंसुलिन नहीं बनता अगर इंसुलिन ई कोलाई में बन रहा है तो इ कुलाई को इसका हेटेरो लगस होस्ट कहेंगे हेट्रो मतलब अदर होस्ट इसका होस है नहीं इसमें बनता नहीं है और इस इंसुलिन को जो बनेगा इ कोलाई के अंदर तो इस इंसुलिन को री कॉमिनेशन प्रोटीन कहेंगे क्योंकि आर डीएनए के थ्रू ये प्रोटीन बना है इस पे क्वेश्चन आता है अगर कोई प्रोटीन एन कोडिंग जीन फॉर एग्जांपल इंसुलिन कोडिंग जीन अपने आप को हेट्रोलॉगआउस अंदर एक्सप्रेस करें जो उसका नॉर्मल होस नहीं है तो इस प्रोटीन को री कॉमिनेशन प्रोटीन बोलते हैं मैंने पता कर लिया कि हां ये वाले इ कोलाई ट्रांसफॉर्म रमने इ कोलाई है एकदम से बायो रिएक्टर में नहीं डालते पहले क्या करते हैं इन्हे लेबोरेटरी के अंदर स्मॉल स्केल पे न्यूट्रिएंट मीडियम देके मल्टीप्लाई करवाते हैं और देखते हैं कि इसके अंदर इंसुलिन बन भी रहा है या नहीं पता पड़ा आरडीएनए तो घुस गया था रमने हो गया लेकिन वो एक्सप्रेस ही नहीं कर रहा होस्ट के अंदर तो भी कोई मतलब नहीं है तो सबसे पहले जो भी सेल्स हैं जिनके अंदर आपके क्लोन जीन ऑफ इंटरेस्ट है उसे स्मॉल स्केल पे लैबोरेट्री के अंदर ग्रो करेंगे और देखेंगे कि हमारा डिजायर्ड प्रोटीन मिल भी रहा है कि नहीं मिल रहा है हां अगर मिल रहा है तब अब हम आगे बढ़ेंगे नहीं मिल रहा तो फिर से बात खत्म फिर से दोबारा से सब करना पड़ेगा अब इसमें हम करेंगे लार्ज स्केल पे लार्ज स्केल में हम करते हैं बेटा बायोरिएक्टर्स के अंदर बायोरिएक्टर बड़े-बड़े टैंक्स है ऐसा समझ लो जहां पर 100 से 1000 लीटर यानी लार्ज क्वांटिटीज में लार्ज वॉल्यूम में हमें अपना प्रोडक्ट मिलेगा ऐसे बर्तन है बड़े-बड़े ऐसा समझ लो इनके अंदर हम क्या करते हैं इस तरह का टेंपरेचर पीएच खाना पीना न्यूट्रिएंट मीडियम देते हैं कि वो जो इकलाई वो जो होस्ट सेल है वो अपने लॉग एक्सपो शियल फेज में रहे आपको पता है हर ऑर्गेनिस्ट म में एक लैग फेज आता है लॉग फेज आता है डिसीलरेशन आता है और फिर स्टेबल फेज आता है हम चाहते हैं वो लॉग फेज में ही बना रहे ताकि धड़ाधड़ धड़ाधड़ मल्टीप्लाई करे ताकि हमें ज्यादा प्रोडक्ट मिले तो हम उसे एक्टिव लॉग या एक्सपो शियल फेज में ही रहने देंगे ताकि हमें बहुत ज्यादा यील्ड मिले क्योंकि उसका मल्टीप्लिकेशन फास्ट हो रहा है और सबके अंदर हमारा डीएनए है राइट इसमें हम क्या करते हैं दो तरीके से होता है एक आप एक बार अपने होस्ट सेल डाल दो दो घंटे के लिए मशीन चालू कर दी और दो घंटे बाद बंद करके जो प्रोडक्ट मिल रहा है वो निकालो या दूसरा एक तरफ से डालते भी जाओ दूसरी तरफ से जो मिल रहा है निकालते भी जाओ डालते जाओ निकालते जाओ इसे कहते हैं कंटीन्यूअस कल्चर सिस्टम जहां एक तरह से यूज्ड मीडियम बाहर भी निकाल रहे हो और फ्रेश मीडियम को ऐड भी करते जा रहे हो फिजियोलॉजिकली एक्टिव फेज में हमें रखना है इस तरह का हम टेंपरेचर पीएच खाना पना सॉल्ट विटामिन ऑक्सीजन सब कुछ उसको प्रोवाइड कराएंगे आइए देखते हैं हम बायोरिएक्टर सबसे कॉमन है स्टन टाइप के बायोरिएक्टर्स देखे चलो बहुत सिंपल है देखिए इसमें क्या करते हैं बायोरिएक्टर में सबसे पहले तो स्टराइल एयर देंगे हवा देंगे ऑक्सीजन चाहिए क्योंकि ग्रो करने के लिए पर स्टराइल ऐसा नहीं हो इसके साथ फंजा बैक्टीरिया दूसरा पहुंच जाए और वो ग्रो कट जाए याद है ना सेकंड प्रिंसिपल बायो प्रोसेस इंजीनियरिंग दूसरी तरफ एक कंट्रोल लगाएंगे एसिड बेस के लिए एसिडिटी ज्यादा हो रही है बेस अल्कली डालेंगे बेस बेसिक ज्यादा हो रहा है एसिड डालेंगे हमें ऐसा एसिडिटी रखनी है कि उसका मैक्सिमम लॉग फेस चले फिर हम स्टीम भी डालेंगे ताकि अगर इस वेसल के अंदर भी कोई दूसरे बैक्टीरिया वगैरह है तो मर जाए वही बायोप्रोसेस इंजीनियरी यहां नहीं बना पर एक्चुअली वाटर जैकेट भी होती है टेंपरेचर कंट्रोल के लिए गर्म ज्यादा हो रहा है ठंडा पानी डाल देते हैं ठंडा ज्यादा हो रहा है गर्म पानी डाल देते हैं इसके बाद इसमें हम न्यू कल्चर ब्राथ डालेंगे यानी न्यूट्रिएंट मीडियम डालेंगे भाई खाना भी तो दोगे तभी जिसमें सल्ट्स हैं विटामिंस है मिनरल्स हैं ग्लूकोज है तभी तो वो बैक्टीरिया उसे यूज करके खाके ग्रो मल्टीप्लाई ग्रो डिवाइड ग्रो डिवाइड ग्रो मल्टीप्लाई करेगा पर इसे पूरा नहीं बढ़ते क्यों नहीं बढ़ते अभी बताती हूं 3/4 तक ही देखो हमने कल्चर ब्रॉथर भरा है अब हम यहां पर एक मोटर लगाते हैं और इस मोटर से जैसे मिक्सर ग्राइंडर में होता है ब्लेडसो काट सकते हैं होगा क्या मैंने इसके अंदर मान लो वो सारे इकलाई बैक्टीरिया जिनके अंदर मेरा आर डीएनए है डाल दिया और मैंने इस मोटर को चालू कर दिया होगा क्या कि ये उस टेंपरेचर पीएच ऑक्सीजन न्यूट्रिएं मीडियम को यूज करके ग्रो मल्टीप्लाई ग्रो मल्टीप्लाई ग्रो मल्टीप्लाई करेंगे और तेजी से ये घूम रहा है तो झाग बनेगा तो अगर पूरा झाग बन गया तो इनको ऑक्सीजन की सप्लाई रुक जाएगी ये मर जाएंगे सारे हम तो मरना नहीं चाहते हम तो चाहते हैं मल्टीप्लाई करें इसीलिए हम झाग को भी काटते जाएंगे और इसीलिए हमने कल्चर ब्राथ को भी फुल नहीं भरा 75 पर ही भरा है दूसरी तरफ इस ब्लेड के कारण वो इ कोलाई बनते भी जा रहे हैं और कचुंबर भी निकलता जा रहा है कटते भी जा रहे हैं इससे क्या होगा समझो होगा क्या कि इनके अंदर जो हमारा इंसुलिन बन रहा है फॉर एग्जांपल वो इस क ब्राथ के अंदर आ जाएगा पर वो इकलाई खुद भी तो अपने कुछ प्रोटींस बना रहा होगा वो सब भी आ जाएंगे तो हमारा फॉरन प्रोडक्ट भी यहां पर आ गया निकल गया और उसके और प्रोटींस जो होंगे वो सब भी आ गए और न्यूट्रिएंट मीडियम जो डाला था वो सब भी आ गया इसके बेस को कर्वड रखते हैं यह भी क्वेश्चन आता है ताकि अच्छे से मिक्सिंग हो सके और हवा खाना सब जगह पर पहुंच सके जैसे हमारी कढ़ाई यां पुराने जमाने में भगोरिया अब तो माइक्रो वेव आ गया तो अलग बात है इंडक्शन आ गया वरना सब कर्वड होती थी ताकि अच्छे से पूरी सब्जी घुमाई जा सके इस पे क्वेश्चन आता है देखिए सिलेंडर कल या कर्वड बेस होती है ताकि सबकी प्रॉपर मिक्सिंग हो सके स्टरर के कारण ये प्रॉपर मिक्सिंग होती है और ऑक्सीजन पूरे बायोरिएक्टर में जाती है इसमें ऑक्सीजन डिलीवरी सिस्टम है फोम कंट्रोल सिस्टम है वही फोम काटने वाले झाक काटने वाले ब्लेडसो सिस्टम मैंने आपको बताया पीए कंट्रोल सिस्टम है सैंपलिंग पोर्ट्स है जहां से हम टाइम टाइम पर होस्ट को डाल भी रहे हैं और इन सब प्रोडक्ट्स को निकाल भी रहे हैं एजिटेटेड सिस्टम है वही ब्लेड फ्लैट ब्लेड जो लगातार इसको सब जगह घुमा रहे हैं यह सब कुछ है कभी-कभी एक दूसरे तरह का भी रिएक्टर यूज करते हैं ध्यान से सुनो यह है सिंपल स्टर्ड टैंक बायोरिएक्टर ये जो मैंने अभी आपको बताया स्टर्ड क्योंकि आप स्टर कर रहे हो बिलो रहे हो और सिंपल एक और थोड़ा और हाई लेवल का होता है जिसे स्पार्जड स्टर्ड टैंक बायोरिएक्टर बोलते हैं स्टर्ड टैंक दोनों है पर ये सिंपल है और यह स्पार्जड है एक्चुअली स्पार्ज का मतलब होता है बचपन में जैसे अपन वो बुलबुले करते थे ना पानी के किसी छोटे से छेद से कोई चीज बबल्स बन के निकलती है यहां पर क्या करते हैं ऐसा ही एक स्पार्जर लगा देते हैं ऐसा कुछ सम समझ लो ये है जैसे इसके थ्रू ऑक्सीजन दोगे तो ऑक्सीजन बबल्स के फॉर्म में निकलती है और बबल्स के कारण इस ऑक्सीजन का जो ट्रांसफर एरिया है ये इंक्रीज हो जाता है ज्यादा अच्छी एयर मिलती है तो ज्यादा तेजी से ग्रोथ होती है बस इतना डिफरेंस है बाकी इसमें भी टेंपरेचर कंट्रोल पीएच कंट्रोल फम कंट्रोल न्यूट्रिएंट मीडियम सैंपलिंग पोर्ट्स एजिटेटर सिस्टम वो सब कुछ इसमें भी होगा बस इसमें ऑक्सीजन ट्रांसफर का जो सरफेस एरिया है वो इंक्रीज हो गया है तो थोड़ा सा और एडवांसड है ऐसा समझ लो बाकी सब कुछ सेम है यह देखिए एयर कैन बी बबल्ड थ्रू द रिएक्टर यह है स्पार्जड वाला अब आप कहोगे मैम चैप्टर खत्म हो गया क्या नहीं क्यों क्योंकि अभी अगर आप इस मशीन को बंद भी कर दोगे तो आपको इंसुलिन प्रोडक्ट नहीं मिला अभी तो उसके अंदर सब मिक्सचर है प्रोडक्ट बन तो गया है आपका बायोसिंथेसिस तो हो गया है लिविंग ऑर्गेनिस्ट म इकलाई बैक्टीरिया के अंदर आपका प्रोडक्ट बन गया है पर उसके साथ और भी प्रोटींस बने हैं वो सब भी है जो इ कोलाई ने खुद ने बनाए थे न्यूट्रिएंट मीडियम भी है सब कचरा है मरे हुए इ कोलाई भी है अब उसमें से यानी जैसे ही प्रोडक्ट बना बायोसिंथेसिस हुआ तब से लेकर आप जब उसे मार्केट में बेचो ग उस बीच में जो कुछ भी होगा लास्ट उसे कहते हैं डाउन स्ट्रीम प्रोसेसिंग आफ्टर कंप्लीशन ऑफ बायोसिंथेटिक स्टेज सिंथेसिस तो हो गया है अब बहुत सारे सीरीज ऑफ प्रोसेसेस होंगे बिफोर इट इज रेडी फॉर मार्केटिंग एज अ फिनिश्ड प्रोडक्ट उन सबको मिलाकर कहते हैं बाय डाउन स्ट्रीम प्रोसेसिंग क्या-क्या स्टेप्स होंगे सबसे पहले आप सेपरेट करोगे अपने प्रोडक्ट को और उसको प्यूरिफाई करो सेपरेशन के अलग-अलग तरीके होंगे से टेशन फिल्ट्रेशन डिपेंड करेगा कौन सा प्रोडक्ट है कैसे सेपरेट करना है अगर कोई प्रिजर्वेटिव की जरूरत है तो वो डाला जाएगा अगर कोई दवाई है वो जैसे हार्मोन इंसुलिन तो पहले क्लिनिकल ट्रायल्स होंगी पहले एनिमल पे ट्रायल्स होती हैं फिर ह्यूमन पे ट्रायल्स होती है तब जाकर आप उसे मार्केट में बेचो बेचने के लिए दोगे क्वालिटी कंट्रोल की टेस्टिंग होगी यानी ये स्टेप्स जो है ये वैरी करेंगे प्रोडक्ट के अकॉर्डिंग प्रोडक्ट के अकॉर्डिंग ये वैरी करेंगे एक्चुअली स्टूडेंट्स आप सुनते हो ना अलग-अलग दवाइयां अलग-अलग कंपनीज में बनती हैं कोई सस्ती है कोई वही कैल्शियम की गोली थोड़ी महंगी बेच रहा है इस क्या डिफरेंस होता है इसी स्टेप का इसके पहले तक की टेक्नोलॉजी तो सबकी सेम होती है डाउन स्ट्रीम प्रोसेसिंग में जिसके पास जितने अच्छे साइंटिस्ट है वो जितना पैसा बचाकर कम पैसों में डाउन स्ट्रीम प्रोसेसिंग करवा देंगे उतना प्रॉफिट मार्जिन उसके पास ज्यादा है तो व आपको थोड़ी सस्ती दवा दे सकता है तो इस तरह से डाउन स्ट्रीम प्रोसेसिंग जो है उसमें में डिफरेंसेस आते डन एवरीवन सो विद दिस वी कंप्लीट बायोटेक्नोलॉजी प्रिंसिपल एंड प्रोसेसेस एक बहुत ही इंपोर्टेंट चैप्टर और हमने बहुत ही मजे से इसे किया है और अब आइए यह रहा आपके लिए इसका फर्स्ट क्वेश्चन आप ट्राई करो और फिर हम देखते हैं इसका आंसर क्या होगा ऑलराइट स्टूडेंट्स सो 2015 री का क्वेश्चन है ये कटिंग ऑफ डीएनए एट स्पेसिफिक लोकेशन किसके कारण पॉबल हुआ कौन तोड़ता है काटता है रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस नाउ 2022 इजली कट यानी पलिंड्रोम पहचानना है यहां पर जी जी टी ए यह पलिंड्रोम नहीं है जी ए पलिंड्रोम नहीं है जी ए ए टीटीसी जी ए ए टीटीसी डायरेक्ट दे रखा है नाउ 2022 व्हिच इज नॉट अ डिजायरेबल फीचर ऑफ क्लोनिंग वेक्टर यानी क्लोनिंग वेक्टर के बारे में फॉल्स पूछा है पॉज करो खुद से ट्राई करो फिर प्ले करके देखो ओरिजिन ऑफ रेप्स होना चाहिए मार्कर जीन होना चाहिए एक एंजाइम के लिए एक साइट होना चाहिए टू या मोर नहीं प्रिफरेबली सिंगल होनी चाहिए नाउ 2022 का ही थर्ड क्वेश्चन रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस स्पेसिफिक सीक्वेंस पलिंड्रोम बिल्कुल ट्रू है और रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस कट्स लिटिल अवे फ्रॉम द सेंटर ये भी बिल्कुल ट्रू है बोथ स्टेटमेंट्स आर करेक्ट स्टेटमेंट नाउ 2021 डीएनए स्टैंड्स ऑन अ जेल थडियूम इड यूवी रेस कैसे दिखते हैं ब्राइट ऑरेंज बैंड्स 2021 करिए ट्राई पीवीआर 322 में पीएसटी व रिस्ट्रिक्शन एंजाइम साइट है जहां पर एंपीसिलीन रेजिस्टेंट का जीन है जो एंपीसिलीन से रेजिस्टेंस देता है अगर इस एंजाइम को यूज कर रहे हैं किसी जीन को इंसर्ट करने के लिए तो जो री कॉमिनेशन डीएनए बना प्लाज्मिड बना उसे जब हम इ कोलाई में डालेंगे तो क्या होगा देखो यहां क्या कह रहे हैं यहां ये कह रहे हैं यह पीबीआर है आपने पीएसटी वन को यूज करा है एज रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस तो यहां पर जो एमपी सिलिन रेजिस्टेंस वाला जीन है वो तो इनटिटर जाएंगे है ना एमपी सिलन में तो मर जाएंगे नॉट एबल टू कन्फर एमपी सिलन रेजिस्टेंस यह तो नहीं हो पाएगा हा बीटा गैलेक्टो साइड बनाने लग जाएगा तो उससे क्या हुआ यार बीटा गैलेक्टो साइड बनाएगा नहीं ऐसा कुछ भी नहीं होगा बीटा गैलेक्टो साइड बनाएगा लेकिन एमपी सिलन रेजिस्टेंस उसको नहीं मिल पाएगा क्लियर है चलो अच्छे से देख लो एक बार इस क्वेश्चन को चलिए आइए नेक्स्ट क्वेश्चन देखते हैं हम सो नेक्स्ट क्वेश्चन 2021 अ स्पेसिफिक रिकॉग्निशन सीक्वेंस जहां पर कट लगाते हैं उसे बोलते हैं पलिंड्रोम साइट पैलेडम नाउ 2020 पहला डिस्कवर्ड रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस जो सिक्स बेस पेयर को कट करता है हिंद टू जीटी में सेंट्रल गवर्नमेंट ने एसी लगाया जीटी सीजी एसी 2020 मैच द कॉलम आ जाओ देखें बेसिलस थ्योरी एंड जेनेसिस नेक्स्ट क्लास में पढ़ेंगे इसमें क्रा प्रोटींस बनते हैं ये लीजिए आंसर आ गया थर्मस एक्वाटिकस से डीएनए पॉलीमरेस मिला है एग्रोबैक्टेरियम ट्यूम फेसिन क्लोनिंग वेक्टर है साल्मोनेला टाइफी यूरियम के अंदर पहला आरडीएनए स्टैनले कोहन एंड हरबर्ट बोयर ने 1972 में बनाया था सीक्वेंस जो कॉपी नंबर कंट्रोल करता है ओराई ओराई कंट्रोल्स द कॉपी नंबर नाउ स्पेसिफिक पलिंड्रोम सीक्वेंस जो इको आरवन पहचानता है जी ए ए टीटीसी जी ए ए टीटीसी आइडेंटिफिकेशन डीएनए लागेस की एक्टिविटी बढ़ जाती है और लेंथ पूरी इंस्पेक्ट करते हैं बेटा ये फॉल्स है क्योंकि वैसे भीय डीएनए लागे के बारे में बात कर रहे हैं डीएनए लाइ स्टिकी एंडस को नहीं जोड़ता सिंगल स्ट्रैंडेड पीसेज को नहीं जोड़ता वो तो अपने आप हाइड्रोजन बॉन्ड से जुड़ जाते हैं ये तो फास्फो डाई ईस्टर बॉन्ड बनाता है 2020 करेक्ट पेयर बताना है पॉलीमरेस ब्रेक नहीं नहीं नहीं दोनों स्टैंड्स को हाइड्रोजन बॉन्ड टूटने से दोनों स्टैंड्स अलग होते हैं विदन नहीं यह बाहर की तरफ लगाता है हां लाइ गज को जॉइन करता है दो डीएनए फ्रेगमेंट्स को जॉइन करेगा नाउ स्टेटमेंट्स दिए हैं रिस्ट्रिक्शन एंजाइम के बारे में फॉल्स बताना है पर्टिकुलर पोजीशन में करता है विद इन डीएनए बिल्कुल सही है ओनली वन ऑफ नहीं बोथ स्टंड्स को कट करता है शुगर फॉस्फेट यानी डाई ईस्टर बॉन्ड को कट करेगा पर्टिकुलर न्यूक्लियोटाइड पलिंड्रोम सीक्वेंस में कट करेगा नाउ 2017 एक जीन जिसका एक्सप्रेशन होगा उसे क्या कहेंगे अ जीन हुज एक्सप्रेशन हेल्प्स टू आइडेंटिफिकेशन है कि नॉन ट्रांसफॉर्म नाउ रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लीज जोड़ने में नहीं काम आते इन विट्रो सिंथेसिस ये तो पीसीआर से होता है हां सिंथेसाइज बाय बैक्टीरिया उनका नेचुरल डिफेंस मैकेनिज्म है नाउ 2016 नाउ ब्लंट एंड अब स्टूडेंट्स मैंने जो पढ़ाया है वो स्टिकी एंड्स है ब्लंट एंड वो था जहां सेंटर में कट हो रहा था यह क्वेश्चन आपसे नहीं बनेगा कोई बात नहीं है इसका आंसर यह है ऐसे क्वेश्चन पूरे पेपर में मुश्किल से एक आता है इसके लिए कभी भी अपने को टेंशन नहीं लेनी क्योंकि 900 से ज्यादा हैं अपन सारे तो याद करने नहीं वाले हैं राइट पानी पीते रहिए सब लोग तो इसके लिए कोई टेंशन नहीं लेनी है नाउ अ फॉरेन डीएनए और प्लाजमेटिक कट किया सेम रिस्ट्रिक्शन एंजाइम से तो जोड़ो ग किससे लाइ गस से नाउ 20161 व्हिच ऑफ द फॉलोइंग इज अ रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस इको आर हिंद टू ये होते हैं नाउ व्हिच इज नॉट अ फीचर ऑफ प्लाज्मिड यानी प्लाज्मिड के बारे में फॉल्स बताना है ऑर्थो नोमस रेप्ट होता है सर्कुलर होता है ट्रांसफर कर सकते हैं बट सिंगल स्टैंडर्ड नहीं होता इट इज ऑलवेज डबल स्टैंडर्ड नाउ डीएनए मॉलिक्यूल टू व्हिच जीन ऑफ इंटरेस्ट इज इंटीग्रेटेड इज कॉल्ड किस डीएनए में जोड़ते हो वेक्टर में जोड़ते हो राइट वेक्टर के साथ जोड़ते हैं ध्यान से देखो क्वेश्चन को पढ़ो क्वेश्चन को समझो देखो वो क्या पूछना चाह रहे हैं नाउ नेक्स्ट क्वेश्चन देखते हैं इंट्रोडक्शन ऑफ टी डीएनए इनटू प्लांट्स इवॉल्व नहीं पीएच कोल्ड नहीं एग्रोबैक्टेरियम ट्यूम फेसियम से इंफेक्शन हुआ है तभी टी डीएनए टीआई प्लाजमेटिक क्लोन ओनली अ स्मॉल फ्रेगमेंट अब बेटा मॉलिक्यूलर बेसिस में पढ़ा था कि ह्यूमन जीनोम प्रोजेक्ट के अंदर बीएसी वाई एसी जॉइन यूज किया था इससे बड़े-बड़े बड़े साइज का फॉरन डीएनए अगर है तो अंदर घुसाया जाता है इवन कॉस्मेट प्लाज्मिड से छोटे-छोटे फॉरन डीएनए का साइज अगर छोटा है कम न्यूक्लियोटाइड्स है तो अंदर डालते हैं नाउ 2013 डीएनए फ्रेगमेंट्स जिन्हें हमने रिस्ट्रिक्शन एंडो न्यूक्लियस से कट करा है उसे सेपरेट कैसे करोगे जेल इलेक्ट्रो फोसिस के थ्रू सेपरेट करेंगे नाउ कॉलोनी ऑफ आर डीएनए अपीयर वाइट इन कंट्रास्ट टू ब्लू बिकॉज ऑफ वाइट दिख रही हैं वाइट का क्या मतलब है बीटा गैलेक्टो साइड ज नहीं बन रहा है यानी लैक जड जीन इन एक्टिव हो चुका है इन एक्टिवेशन हो चुका है इंसर्च इनक्टो साइ डेज इज इट क्लियर कोई डाउट नहीं है यहां तक नेक्स्ट क्वेश्चन पे आ जाऊं मैं नेक्स्ट क्वेश्चन पे आ जाएं ठीक है ग्लाइकोसाइड एंजाइम इन एक्टिव नहीं होता बेटा लैक्स एट जीन इनटिटर यह नहीं बनता है नॉन रिकॉमिन नहीं यह तो आपने अंदर डाला है ना और अल्फा भी नहीं री कॉमिनेशन के अंदर बीटा गैलेक्टो साइडेवाला जो जीन है उसका वो हो गया है इंसल इन एक्टिवेशन चलिए व्हिच इज नॉट ट्रू अबाउट जेल इलेक्ट्रो फोसिस ब्राइट ऑरेंज बैंड्स दिखते हैं यूवी रेज का एक्सपोजर होता है होता है बिल्कुल करेक्ट है पीस को एक्सट्रैक्ट करते हैं जेल से इल्यूजन कहते हैं इथरियस ब्रोमाइड यूज करते हैं क्रोमोजेनिक सबस्ट्रेट से नहीं यहां ब्लू कलर नहीं आता ब्लू कलर लैक जड जीन वाले से रिलेटेड है सिलेक्टेबल मार्कर से रिलेटेड है य ब्राइट ऑरेंज बैंड्स बनते हैं नाउ 2022 करिए ट्राई पीसीआर से डीएनए एमप्लीफिकेशन होता है करेक्ट है एंपसन रेजिस्टेंट जीन को सिलेक्टेबल मार्कर की तरह चेक ट्रांसफॉर्मेशन करते हैं करेक्ट है बोथ करेट है तो ये आंसर्स तो नहीं होंगे अब बोलो ये दो अलग-अलग बातें हैं पीसीआर एक अलग टेक्नीक है डीएनए एमप्लीफिकेशन की एंपसन रेजिस्टेंस एक अलग चीज है ये आपस में रिलेटेड नहीं है तो एक्सप्लेनेशन नहीं है नाउ 2021 जब प्यूरिफाई करो आप फिर अपन देखते हैं इसे ट्राई करिए इस क्वेश्चन को कम ऑन एवरीवन बढ़िया क्वेश्चन है हीट दे रहे हैं आप यह कह रहे हैं इफ वेरी हाई टेंपरेचर इज नॉट मेंटेन इन द बिगिनिंग तो कौन सा स्टेप सबसे पहले अफेक्ट होगा सबसे पहला 9095 डिग्री जो आपको देना था वही मेंटेन नहीं करोगे तो पहला स्टेप ही अफेक्ट हो जाएगा नाउ 2020 जेल इले रोसिस में किससे हेल्प से हम विजुलाइज करते हैं थडियूम इड फॉलो बाय यूवी रेडिएशन ब्राइट ऑरेंज बैंड्स नाउ नेक्स्ट क्वेश्चन 2020 डीएनए फ्रेगमेंट्स को किससे अलग करोगे देखो ध्यान रखो टोटल डीएनए स्कूलिंग से निकलता है पर डीएनए के टुकड़ों को किससे करते हैं इलेक्ट्रो प्रोसेस बेटा इससे तो मल्टीपल कॉपीज बना रहे हैं बॉडी के बाहर इन विट्रो नाउ 2020 कोविड रमने डीएनए टेक्नोलॉजी में एंटीबायोटिक्स को क्यों यूज कि जाता है बताइए एंटीबायोटिक्स को क्यों यूज किया जाता है क्यों यूज किया जाता है एज सिलेक्टेबल मार्कर्स एक्चुअली एंटीबायोटिक्स मतलब एंटीबायोटिक रेजिस्टेंट जीन भाई आपको एंटीबायोटिक में डाल के ही तो चेक करना पड़ेगा तभी तो पता चलेगा नाउ नेक्स्ट क्वेश्चन 2020 कोविड मैच द कॉलम बताइए कहीं से भी शुरू कर सकते हैं पीसीआर से डीएनए का होता है सी का फोर हो जाएगा नाउ बायोरिएक्टर से लार्ज क्वांटिटी ऑफ प्रोडक्ट जनरेट होती है आइए चेक करते हैं इलेक्ट्रो पोरोसिस जो है नहीं सॉरी सॉरी ये फर्स्ट वाला होगा माय मिस्टेक माय मिस्ट यह होगा इलेक्ट्रोफोरस से डीएनए फ्रेगमेंट को सेपरेट करते हैं और अलाइज हम नेक्स्ट क्लास में पढ़ेंगे एंटीजन एंटीबॉडी पर बेस्ड है नाउ नेक्स्ट क्वेश्चन स्पूलिंग का क्या मतलब है जेल पी से डीएनए को अलग करना जेल पीस से नाउ करेक्ट बताना है अगेन देखिए इसको पॉलीमरेस एंजाइम जॉइन करता है नहीं नहीं जॉइन लाइ गज करता है और हमसे करेक्ट पूछा है पीसीआर से हम आइसोलेट एंड सेपरेट करते हैं नहीं नहीं वो तो हम जेल इलेक्ट्रो फोसिस से करते हैं एमप्लीफिकेशन पीसीआर से करते हैं यहां पर प्योर डीएनए को रिस्ट्रिक्शन एंजाइम में डालेंगे बिल्कुल करेक्ट है चलो नेक्स्ट क्वेश्चन करिए ट्राई आप लोग सॉरी सॉरी सॉरी हां हा लार्ज स्केल पर आपको ग्रो करना है मल्टीप्लाई करना है लार्ज स्केल पे बायोरिएक्टर्स यूज करेंगे डीएनए प्रेसिपिटेटर अ मिक्सचर ऑफ बायो मॉलिक्यूल मतलब आरएनए भी था प्रोटीन भी था उसमें से बाहर निकल कर आया है चिल्ड इथेनॉल डाला है ध्यान रखना क्लोरोफॉर्म नहीं चिल्ड इथेनॉल चलिए स्टेप्स बताइए पीसीआर के सबसे पहले डिनेचुरेशन फिर अनिलिंगस सेंशन लोंगे या पॉलीमराइजेशन नाउ 2017 बोलिए क्या क्राइटेरिया है जेल इलेक्ट्रो फोसिस में जितना छोटा पीस होगा उतना दूर जाएगा यह सब कुछ भी नहीं है नेगेटिव पॉजिटिव चार्ज वार्ज का कोई लेना देना नहीं है वो तो सारे डीएनए नेगेटिव है सब एनोड की तरफ जाएंगे प्रोसेस ऑफ सेपरेशन एंड मार्केटिंग मार्केटिंग के पहले जो भी करते हैं आपको हर क्वेश्चन पॉज करो खुद से ट्राई करो फिर चेक करो डीएनए फ्रेगमेंट्स एग्रोस जेल पर जो है उन्हें हम कब देखेंगे इथरियस ब्रोमाइड देन अल्ट्रा वायलेट रेस देन दे अपीयर एज ब्राइट ऑरेंज बैंड्स चलिए ये बताइए नॉट अ कॉम्पोनेंट ऑफ डाउन स्ट्रीम प्रोसेसिंग डाउन स्ट्रीम प्रोसेसिंग में सेपरेशन करते हैं प्यूरीफायर एक्टर के अंदर होस्ट के अंदर ऑलरेडी डिजायर्ड फॉरन प्रोटीन बन चुका है एक्सप्रेस क्या होता है डीएनए से आरन आरएन से प्रोटीन बनना एक्सप्रेशन स्टर्ड बायो टैंक रिएक्टर्स किस तरीके से डिजाइन करे गए हैं कि स्टरर के कारण सब जगह ऑक्सीजन फैले और कर्वड बेस है ताकि प्रॉपर मिक्सिंग हो सारे कंटेंट्स की ट पॉलीमरेस किससे मिलता है थर्मस एक्वाटिकस आर्की बैक्टीरिया से नाउ विट्रो क्लोनल चलो इसको छोड़ो ये अलग ये चैप्टर डिलीट हो गया है यह करिए नॉट करेक्टली मैच 2013 फंजा में काइनेस लगेगा लगेगा लगेगा यह गलत है एल्गे भी तो प्लांट किंगडम है सेलुलोज पेक्टिन की बनी होगी तो सेल्यूले पेक्टिनेट क्वेश्चन ये ओके 2023 का क्वेश्चन है अपन एक्सपोजर टू यूवी रेज थडियूम इड में डाला तो ब्राइट ऑरेंज बैंड्स मिलेंगे नाउ अगेन 2023 जीन गन मेथड में हम क्या यूज करते हैं गोल्ड या टंगस्टन की माइक्रो बुलेट्स बनाते हैं प्यू अगेन 2023 प्यूरिफाई रिपीट पवाई क्य है आप देख रहे हो ये रिपीट पीवा क है आइए चलिए इसे ट्रा करिए बताइए क्या सीक्वेंस लगाएंगे आप ऑलराइट स्टूडेंट्स तो यहां पर हमारी स्लाइड थोड़ी सी चेंज हो गई है कोई बात नहीं है हम पुरानी स्लाइड पर आ जाते हैं जहां हमने क्लास छोड़ी थी अपनी और यह मैंने आपको सीक्वेंस में अरेंज करने के लिए दिया था 2023 का क्वेश्चन है बताइए तो सबसे पहले इसमें से क्या होगा सबसे पहले हम इंसर्ट नहीं करेंगे पहले कट करेंगे रिस्ट्रिक्शन एंजाइम से ठीक है पहले कट करेंगे पहले नहीं पहले कट करोगे तभी तो फ्रेगमेंट मिलेगा तभी तो उसे जेल इलेक्ट्रो फोसिस से आइसोलेट करोगे तो यह पहले नहीं होगा अब देखते हैं बी के बाद स आएगा या डी आएगा पहले एमप्लीफिकेशन करेंगे या पहले आइसोलेट नहीं पहले आइसोलेट करो अपना पीस पहचानो पीस मिलेगा उसके बाद ही तो उसका एमप्लीफिकेशन करेंगे तो बी के बाद सी आएगा ये आंसर आ गया फिर एमप्लीफाई करेंगे और फिर फाइनली उसे पहले आरडीएनए बनाएंगे फिर होस्ट के अंदर डालेंगे राइट चलिए नेक्स्ट क्वेश्चन अगेन 2023 का क्वेश्चन नॉट अ क्लोनिंग वेक्टर यानी क्लोनिंग वेक्टर फॉल्स बीएसी वाईसी ह्यूमन जीनोम प्रोजेक्ट में यूज़ होते हैं मॉलिक्यूलर बेसिस में पढ़ा है ये भी आर्टिफिशियल क्लोनिंग वेक्टर है प्रोब नहीं है प्रोब हम नेक्स्ट क्लास में पढ़ेंगे बायोटेक्नोलॉजी एंड एप्लीकेशंस के अंदर राइट नाउ सो आप यहां पे देख सकते हैं स्टूडेंट्स कि 1 2 3 एंड फोर फोर फोर क्वेश्चंस आए हैं 2023 के अंदर अब आपका होमवर्क यह है कि आपको अच्छे से इस लेक्चर को सुनना है अंडरस्टैंड करना है समझने का ज्यादा है रटने का कम है और उसके बाद एक बार एनसीआरटी रीड करना आपको एकदम इजी हो जाएगा मेरा वादा है आपसे तो मेरे प्यारे नादान परिंदों मुझे पता है कि यह लेक्चर रिकॉर्डेड आ रहा है आप लोग थोड़े से शायद निराश हुए होंगे कोई बात नहीं है हम लाइव सेशंस में दूसरे दूसरे सेशंस में ओबवियसली मिल रहे हैं वहां पर आपकी गुरुमा आपके साथ है इंपॉर्टेंट है पढ़ना और हमने क्रिस्प वे में सब कुछ राइट फ्रॉम बेसिक्स टू ऑल द क्वेश्चंस पॉसिबल डिस्कस कर लिया है अगली क्लास में मिलते हैं और वहां पर हम बायोटेक एंड एप्लीकेशंस पढ़ेंगे जो हमारे 12थ का जूलॉजी का लास्ट चैप्टर भी होगा तो उम्मीद सीरीज के अंदर हमने ह्यूमन रिप्रोडक्शन रिप्रोडक्टिव हेल्थ ह्यूमन हेल्थ एंड डिजीज एवोल्यूशन बायोटेक्नोलॉजी एंड प्रिंसिपल्स एंड प्रोसेसेस उसको कंप्लीट किया आई होप आपको मेरे साथ इस जर्नी में सफर में मजे आ रहे हैं आई होप आप जल्दी ही अपने मंजिल के करीब पहुंचे बस लगातार पढ़ते रहिए प्लान वे में पढ़ते रहिए टाइम बिल्कुल वेस्ट नहीं करना है अपना बेस्ट दीजिए बाकी ईश्वर अच्छा ही करेंगे मेरी ढेर सारी दुआएं ढेर सारी ब्लेसिंग्स आपके लिए गॉड ब्लेस यू बाय एवरीबॉडी