🧬

Rekayasa Genetik dan Plasmid

Apr 21, 2025

Rekayasa Genetik dan Teknologi Plasmid

Pengenalan

  • Rekayasa genetik (DNA rekombinan) digunakan untuk berbagai aplikasi, termasuk produksi hormon insulin.
  • Pada awalnya, insulin diekstrak dari pankreas sapi dan babi.
  • Saat ini, insulin diproduksi menggunakan bakteri yang telah direkayasa.

Prinsip Dasar DNA Rekombinan

  • Vektor (Plasmid): DNA ekstra kromosomal yang berfungsi sebagai vektor.
    • Plasmid adalah DNA kecil di luar kromosom bakteri.
    • Digunakan untuk mengubah dan membawa gen yang diinginkan.

Proses Rekayasa Plasmid

  1. Pemotongan DNA:

    • Menggunakan enzim restriksi endonuklease untuk memotong plasmid dan gen yang ingin dicangkok.
    • Potongan DNA harus cocok agar bisa digabungkan.
  2. Penggabungan DNA:

    • Menggunakan enzim ligase untuk menyambungkan potongan DNA plasmid dan gen asing.
    • Hasilnya adalah plasmid rekombinan yang mengandung gen asing.
  3. Transformasi ke Bakteri:

    • Bakteri akan mengambil plasmid rekombinan secara alami.

Seleksi Bakteri yang Direkayasa

  • Plasmid biasanya mengandung gen kebal antibiotik (misalnya, gen resistensi ampicillin).
  • Gen laktosa digunakan untuk memetabolisme laktosa.
  • Media seleksi dibuat dengan menambahkan ampicillin dan laktosa:
    • Bakteri tanpa plasmid akan mati.
    • Bakteri dengan plasmid dapat hidup:
      • Bakteri tidak direkayasa: Warna biru (masih bisa memetabolisme laktosa).
      • Bakteri direkayasa: Warna putih (gen laktosa telah rusak).

Proses Rekayasa Genetik Secara Keseluruhan

  1. Isolasi DNA: Mengisolasi DNA dari sumber yang diinginkan dan plasmid.
  2. Pemotongan DNA: Menggunakan enzim restriksi.
  3. Penggabungan DNA: Menggunakan enzim ligase untuk menyambung DNA.
  4. Transformasi: Memasukkan plasmid ke dalam bakteri.
  5. Seleksi: Menggunakan media untuk menyeleksi bakteri yang telah direkayasa.

Kesimpulan

  • Teknologi plasmid rekombinan sangat bermanfaat dalam produksi hormon dan berbagai aplikasi bioteknologi.
  • Proses ini melibatkan beberapa langkah penting mulai dari pemotongan, penggabungan, hingga seleksi bakteri yang direkayasa.