Kuliah Pemisahan dengan Kromatografi

Pengantar

• Penyampaian oleh: Prof. Apotekar Dr. Hernad I. Madiagus Gelgel Wirasuta
• Topik: Metodologi Pemisahan dengan Kromatografi

Sejarah Kromatografi

• Penemu: Ilmuwan Rusia, tertarik mengisolasi warna pigmen tanaman.
• Metode: Kolom kromatografi dengan kalsium karbonat sebagai fase diam.
• Hasil: Berhasil memisahkan komponen warna seperti santofil, antosianin, klorofil.

Prinsip Dasar Kromatografi

• Pemisahan berdasarkan perbedaan afinitas antara fase gerak (mobile phase) dan fase diam.
• Fase gerak bergerak melewati fase diam, memisahkan senyawa berdasarkan afinitasnya.
• Aplikasi: Memisahkan senyawa dari materi biologis, tanaman, darah, dll.

Definisi dan Konsep

• Kromatografi: Metode pemisahan komponen terdistribusi antara dua fase.
• Fase Gerak dan Fase Diam:
  • Fase gerak: bergerak melewati fase diam.
  • Fase diam: tidak bergerak.

Jenis Kromatografi

• Kromatografi Gas: Memisahkan senyawa berbentuk gas dan volatil.
• Kromatografi Cair: Dapat berupa cair-cair, cair-padat, penukar ion, atau eksklusi molekul.
• Kromatografi Padat: Melibatkan sublimasi atau absorpsi.

Fenomena Fisikokimia dalam Pemisahan

• Keseimbangan dan Laju: Proses pemisahan terdiri dari proses keseimbangan dan laju.
• Afinitas: Memengaruhi laju kesetimbangan dan pemisahan senyawa.
• Koefisien Partisi: Menggambarkan distribusi senyawa aktif antara dua fase.

Metodologi Kromatografi Gas

• Instrumen: Sistem kromatografi gas terdiri dari komputer, monitor, gas pembawa, kolom, dan detektor.
• Proses Pemisahan: Berdasarkan koefisien partisi antara fase gas dan fase cair.
• Penggunaan: Digunakan untuk senyawa yang mudah menguap.

Parameter Kunci dalam Kromatografi

• Waktu Retensi: Waktu untuk mengilusi zona, dihitung dari waktu penyuntikan sampel.
• Volume Retensi: Dihitung dari volume retensi waktu dikalikan dengan laju aliran gas.

Faktor Efisiensi Kromatografi

• Plat Teoritis: Menunjukkan efisiensi pemisahan.
• Pengaruh Laju Migrasi: Laju aliran fase gerak memengaruhi plat teoritis.

Ilustrasi Kromatografi Gas

• Sistem injeksi sampel sangat penting.
• Injeksi Split dan Splitless: Metode berbeda untuk memasukkan sampel.
• Jenis Kolom: Terdapat kolom tubing, package, dan kapileri.

Detektor Kromatografi

• TCD (Thermal Conductivity Detector): Mengukur perubahan konduktivitas termal.
• FID (Flame Ionization Detector): Mengukur ionisasi nyala.
• ECD (Electron Capture Detector): Mengukur penangkapan elektron.

Aplikasi dan Studi Kasus

• Farmasi: Pemisahan senyawa dalam materi biologis.
• Contoh: Analisis kuantitatif Aplazolam dalam Revit Plasma oleh GC-MS.

Penutup

• Pengembangan video pembelajaran untuk membantu mahasiswa memahami kromatografi.
• Akses materi lebih lanjut di buku online dan platform pembelajaran.