Lezione 1 di Istologia: Microscopia e Preparazione dei Campioni Istologici

Introduzione all'Istologia

• Istologia: Studio dei tessuti
• Organizzazione dei viventi: Cellula -> Tessuti -> Organi -> Sistemi e Apparati -> Organismo

Microscopia

Caratteristiche Essenziali dei Microscopia

• Potere d'Ingrandimento: Massimo ingrandimento permesso
• Potere di Risoluzione: Distanza minima tra due punti ancora visibili come separati

Tipi di Microscopia

1. Microscopio Ottico
   • Risoluzione: 0,2 micrometri
2. Microscopia a Contrasto di Fase
   • Osservazione di cellule in vivo
3. Microscopi a Fluorescenza
   • Uso di caratteristiche fluorescenti dei corpi
4. Microscopia Confocale
   • Osservazione di campioni in tutte le sezioni
5. Microscopio Elettronico
   • Risoluzione: 0,4 nanometri
6. Microscopia a Forza Atomica
   • Risoluzione: 0,2 nanometri
   • Studio degli atomi
7. Microscopia in Campo Scuro
   • Usato quando non si può colorare un campione
8. Microscopia a Luce Polarizzata
   • Utilizzo nello studio delle rocce

Microscopio Ottico

Componenti e Funzionamento

• Oculari: Lenti per l'osservazione e primo ingrandimento
• Obiettivo: Collaborano con gli oculari per l'ingrandimento totale
• Tavolino Porta Preparati: Struttura per appoggiare e spostare il vetrino
• Condensatore: Condensa la luce per l'osservazione ottimale
• Fonte Luminosa: Lampada a led o incandescenza
• Viti Macrometrica e Micrometrica: Avvicinamento e allontanamento del vetrino
• Terzo Occhio per Telecamera: Proiezione dell'immagine

Preparazione dei Campioni Istologici

Fasi di Preparazione

1. Fissazione
   • Prevenzione del degrado del tessuto
   • Tipi: Chimica (uso di fissativi chimici come alcol etilico, formaldeide) e Fisica (congelamento con azoto liquido)
2. Disidratazione
   • Eliminazione dell'acqua mediante soluzioni di alcol etilico con concentrazioni crescenti
3. DIAFANIZZAZIONE
   • Rende il campione trasparente tramite immersione in xilolo
4. Inclusione
   • Immersione del campione in sostanza che permette il taglio (es. paraffina fusa, resina epossidica)
5. Sezionamento
   • Taglio del campione in sezioni sottili (3-10 micron) per l'osservazione
6. Reidratazione
   • Preparazione del campione per la colorazione
7. Colorazione
   • Utilizzo di coloranti idrofili per l'osservazione al microscopio ottico