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Pr. M. BOUABDELLAH
2me anne Pharmacie 2022 -2023 1
# Structure
# des pro,des Pro,des : acides amins , pep;des, protines
Protines: macromolcules cons;tues dune ou de plusieurs
cha nes dacides amins
Reprsentent plus de 50% du poids sec des cellules
Rles biologiques importants et divers :
+Structurale: collagne, membranes cellulaires, kra;ne
+Mtabolique : enzymes
+Transmissions de signaux : hormones, neurotransmeUeurs
+Dfense immunitaire : An;corps
+Transporteur : Albumine, Hmoglobine, Apoprotines...
> 2
Les protines sont synth;ses sous
forme de chaines linaires (structure
primaires)
Pour assurer leurs fonc;ons biologiques ,
certaines protines vont subir des
modifica;ons post-traduc;onnelles, en
structure secondaire, ter;aire ou
quaternaire
Lunit cons;tu;ve des protines sont
les acides amins
> 3
# Plan gnral
## Les acides amins
## Les pep;des
## Les protines
> 4
# Les acides amins
I-Donnes gnrales
Dfini;on
Rles biologiques
II-Structures des AA
III-Proprits physiques
Isomrie et ac;vit op;que
Absorp;on de la lumire
Solubilit
Classifica,ons des AA
IV-Proprits et rac,ons chimiques caractrisant les AA
Proprit ionique: Amphotrie ; pHi ; no;on de zwiUerion
Rac;ons chimiques importantes
V-Drivs des AA
VI-Mthodes dtudes des AA
> 5
I-Donnes gnrales
> 1-Dfini,on
Units structurales de base cons;tuant les protines
Sur 300 acides amins (AA) rpertoris actuellement,
seuls 20 AA dits standard intgrent la structure
des protines: protinognes
incorpors dans la chane polypep;dique des protines
lors de la traduc;on de lARNm
Les animaux suprieurs sont incapables de synth;ser la
totalit de ces 20 aminoacides
AA essen;els et AA non essen;els
# Les acides amins (AA)
> 6
I-Donnes gnrales
1-Dfini,on
8 AA doivent tre apports par lalimenta;on car non
synth;ss par lhomme :
Ces 8 AA sont dits essen;els :
Leucine, Isoleucine, Lysine, Mthionine,
Phnylalanine, Thronine, Tryptophane, Valine
Certains AA, bien que synth;ss, le sont des vitesses trs
lentes
considrs comme essen;els chez le nouveau-n ou
lenfant : Arginine, His;dine
# Les acides amins (AA)
> 7
# Les acides amins
I-Donnes gnrales
les autres AA sont dits non protinognes
*soit ltat libre : ornithine , citrulline ,
intervenant dans l urognse
*soit dans des pe;ts pep;des synth;ss par
des micro-organismes ou des vgtaux
> 8
# Les acides amins
I-Donnes gnrales
2-Rles biologiques
structural
Monomres des protines ; leur nature, lordre dans lequel ils
senchanent, leurs rapports spa;aux mutuels sont les
dterminants de la structure et de la fonc;on des protines
nerg,que
Au niveau de la cellule, ils peuvent fournir de lnergie comme le
glucose ou les acides gras
mtabolique
Prcurseurs de molcules dintrt biologique : synthse de
lhistamine ou de base s azotes
fonc,onnel
Proprits biologiques : glutamate, glycine neurotransmeUeurs 9Les acides amins
II-Structure des acides amins
Les acides amins ( amino acids ) : molcules organiques
qui possdent :
-une fonc;on carboxylique : COOH
-une fonc;on amine primaire : NH 2
> 10
# Les acides amins
II-Structure des acides amins
Fonc;ons portes par un mme atome de carbone : atome de
carbone (ou C-2 par rapport au C-1 de la fonc;on carboxylique )
Ce sont des acides -amins
Ils diffrent par la nature de la chane latrale dite radical : R
Les AA sont sexus!!! Le ou La ? 11 1-Les acides amins chane latrale alipha,que
*La Glycine = Le Glycoco ll e = Gly = G
-le plus pe;t AA
- AA sans carbone asymtrique
-confre de la flexibilit aux protines (ex: collagne, las;ne)
-rle de dtoxifiant, neurotransmeUeur
# Les acides amins
II-Structure des acides amins
> 12
*La Valine = Val = V (acide amin essen-el)
1-Les acides amins chane latrale alipha,que
*L Alanine = Ala =A
> 13
1-Les acides amins chane latrale alipha,que
*La Leucine = Leu = L (acide amin essen-el)
*L (Une) Isoleucine = Ile = J (acide amin essen-el)
> 14
2-Les acides amins chane latrale aroma,que
*La Phnylalanine = Ph = F (acide amin essen-el)
NB: Ph catabolis en Tyrosine par la Phnylalanine hydroxylase
> Acido -aminopathie :
phnylctonurie
Dficit gn;que en
> Phnylalanine hydroxylase :
- apparait ds lenfance
- se caractrise par un retard mental 15 2-Les acides amins chane latrale aroma,que
*La Tyrosine = Tyr = Y
*Le Tryptophane = Trp = W (acide amin essen-el)
NB: Dficit enzyma;que Tyrosinmie (I) congnitale qui se caractrise
par une aUeinte hpatornale
> 16
> Noyau indole
3-Acides amins fonc,on alcool
*La Srine = Ser = S
*La Thronine = Thr = T (acide amin essen-el)
> 17
4-Les acides amins dicarboxyliques et leur s amide s
*L (Un) Acide aspar,que = Asp = D (prsence du 2 me carboxyle en )
*L (Une) Asparagine = Asn = N (forme amide de l aspartate )
> 18
4-Les acides amins dicarboxyliques et leur s amide s
*L (Un) Acide Glutamique = Glu = E (prsence du 2 me carboxyle en )
*La (Une) Glutamine = Gln = Q (forme amide du glutamate)
> 19
5-Acides amins dibasiques
*La Lysine = Lys = K (acide amin essen-el )
*L (Une) Arginine = Arg = R
> 20
> Guanidium
5-Acides amins dibasiques
*L (Une) His,dine = His =H
> 21
> Noyau imidazole
6-Acides amins soufrs
*La Cysteine = Cys = C
*La Mthionine = Met = M (acide amin essen-el)
CH3 -S-CH3 : Thio -ther
S-adnosyl mthionine est un donneur de mthyle
> 22
7-Acide amin secondaire
*La Proline = Pro = P
-confre de la rigidit (coude) la protine
-hydroxyproline : cons;tuant majeur du collagne
> 23
# Les acides amins
III-Proprits physiques
1-Isomrie et ac;vit op;que
2-Absorp;on de la lumire
3-Solubilit
> 24
# Les acides amins
III-Proprits physiques
1-Isomrie et ac,vit op,que
Latome de carbone des AA est asymtriquement subs;tu
(sauf la glycine)
4 atomes ou groupement s datomes diffrents :
> -H
> -NH 2
> -COOH
> -R (une chane latrale)
> *
> 25
# Les acides amins
III-Proprits physiques
1-Isomrie et ac,vit op,que
Du point de vue structural, ce carbone est au centre dun
ttradre dont les sommets sont occups par des
subs;tuants diffrents
Latome de carbone est un centre chiral (du grec kheir )
> *
> 26
# Les acides amins
1-Isomrie
Chiralit Stroisomrie
1 Carbone asymtrique C* 2 stroisomres possibles
Si les 2 stroisomres sont images lun de lautre par
rapport un axe de symtrie (plan du miroir) et non
superposables
ce sont des nan;omres
> 27
# Les acides amins
1-Isomrie
Nomenclature des stroisom res
Mme AA en formule dveloppe
Pour dis;nguer les 2 stroisomres , on adopte les conven,ons
suivantes :
-On se rfre au glycradehyde comportant un C*
> 28
Si le groupement OH est droite :
la molcule est dite D
Si le groupement OH est gauche :
la molcule est dite LLes acides amins
Stroisomrie et nomenclature D et L
avec la projec;on de Fischer
Les atomes unis latome de carbone asymtrique par des
liaisons horizontales sont en avant de la page
Les atomes qui sont unis par des liaisons ver;cales sont en arrire
de la page
> 29
# Les acides amins
Stroisomrie et nomenclature D et L
par analogie au glycradhyde , avec la projec;on de Fischer
> 30
Si le grpt NH 2 se situe
droite
les AA sont dits D
Si le grpt NH 2 se situe
gauche
les AA sont dits L Les acides amins
1- Isomrie et ac,vit op,que (d) et ( l )
2 nan;omres
possdent les mmes proprits physiques et chimiques
seule diffre leur proprit op;que de dvier la lumire
polarise: ils sont dits isomres op;ques
un , dvie le plan de polarisa;on droite: il est dextrogyre , (+) ou (d)
lautre le dvie gauche: il est lvogyre , (-) ou ( l )
> 31
# Les acides amins
1- Isomrie et ac,vit op,que (d) et ( l )
nan;omres et isomres op;ques
Lappartenance dun AA la srie D ou L, ne prjuge pas de son
pouvoir rotatoire (d) ou ( l )
Seuls les L-acides amins sont prsents ltat naturel et la
plupart des AA sont dextrogyres (d)
> Mlange racmique :
(d) L 32 Proprit u;lise pour le dosage des pep;des et des protines
# Les acides amins
> 33
III-Proprits physiques
2-Absorp,on de la lumire
les AA aroma;ques absorbent dans l UV
> Spectre dabsorp,on des AA aroma,ques
# Les acides amins
III-Proprits physiques
3-Solubilit
Entre hydrophilie et hydrophobie des AA
La solubilit des AA dans leau dcoule de la structure de la chane
latrale ou radical R
augmente avec la prsence de groupements polaires
supplmentaires sur la chaine latrale
diminue avec la longueur de la chaine latrale
la solubilit dans les solvants organiques est faible
> 34
# Les acides amins
Tableau: Hydrophobicit relative des AA selon leur radical R
Colonne A:
chelle de
Sweet & Eisenberg
(1983)
Colonne B:
chelle de
Weiss et al.
(1982)
> 35
# Les acides amins
Solubilit: hydrophilie et hydrophobie
+ AA chane latrale polaire charge (reprsents pH6)
AA acide s
AA basique s
> 36
# Les acides amins
Solubilit: hydrophilie et hydrophobie
+ AA chane latrale polaire non charge (rep rsents pH6)
> 37
# Les acides amins
Solubilit: hydrophilie et hydrophobie
+ AA chane latrale non polaire (reprsents pH6)
> 38
# Les acides amins
Classifica,ons des AA: de la structure aux proprits physiques
Classifica,on selon la polarit de la charge de R ( pH neutre)
> 39
Polarit du radical Acide amin
Non polaire Gly , Ala , Val, Leu, Ile, Met, Trp , Ph , Pro
Polaire non ionisable Ser , Thr , Tyr , Cys , Asn , Gln
Polaire ionisable charg nga,vement Asp , Glu
Polaire ionisable charg posi ,vement Lys, Arg , His Les acides amins
Classifica,ons des AA: de la structure aux proprits physiques
Classifica,ons selon la nature du radical R (structure )
> 40
Nature du radical Acide amin
Alipha,que Gly , Ala , Val, Leu, Ile
Hydroxyle Ser , Thr , Tyr
Soufre Cys , Met
Cyclique Pro
Aroma,que Ph , Tyr , Trp
Basique His , Lys, Arg
Acide , amide Asp , Glu, Asn , Gln Les acides amins
IV-Proprits et rac,ons chimiques caractrisant les AA
1-Proprits ioniques
Formule gnrale des AA :
En ralit, un AA ne se prsente jamais sous ceUe forme en
solu;on aqueuse :
Un AA possde 2 groupements ionisables (ou plus) 41 Les acides amins
1-Proprits ioniques
a. Le caractre amphotre des AA
A pH acide ,
lexcs dions H + va protoner le groupement amine de lAA
lAA se comporte comme une base: forme ca;onique
> 42
# Les acides amins 1-Proprits ioniques
a. Le caractre amphotre des AA
A pH alcalin ,
lexcs dions OH - va fixer le proton libr par le groupement
acide carboxylique de lAA
lAA se comporte comme un acide : forme anionique
> 43
# Les acides amins
1-Proprits ioniques
a. Le caractre amphotre des AA
Amphotrie
Capacit dun compos, mis en solu;on aqueuse, se comporter
comme acide ou comme base en fonc;on du pH du milieu o il est .
Selon le pH, les AA existent en solu;on aqueuse sous 3 formes
possibles :
> 44
# Les acides amins
1-Proprits ioniques
b. Zwilerion et point isolectrique (pH i)
-1 AA ( au moins 2 fonc;ons ionisables )
-2 rac;ons rversibles (2 K)
-3 formes ioniques possibles
> 45
# Les acides amins
1-Proprits ioniques
b. Zwilerion et point isolectrique (pHi )
> 46
pH acide
Forme majoritaire ca,onique
pH alcalin
Forme majoritaire anionique Les acides amins
1-Proprits ioniques
b. Zwilerion et point isolectrique (pHi )
pHi ou point isolectrique :
pH du milieu pour lequel la charge lectrique neUe de l AA est
nulle : tout lAA est sous forme de zwitterion
Le pHi est une caractristique propre chaque AA
Chaque AA se caractrise par son pHi 47
pH acide
Forme majoritaire ca,onique
> pH neutre
> pHi
Forme majoritair e ionique
dipolaire ou Zwitterion
pH alcalin
Forme majoritaire anionique b. Zwilerion et point isolectrique (pHi )
En rsum:
la charge lectrique dun AA varie suivant le pH du milieu ( pHm ) dans lequel il se
trouve:
Si m.alc: pHm > pHi lAA sera charg nga,vement
Si m. neutr : pHm = pHi la charge globale de lAA est nulle
Si m. ac : pHm < pHi lAA sera charg posi,vement
Amphotrie : Proprit u;lise pour sparer les AA ou les protines dun
mlange par une des techniques de spara;on comme llectrophorse 48 Les acides amins
b. Zwilerion et point isolectrique (pHi )
Le pHi est une caractri s,qu e de lAA Calcul du pHi
Soit: K1 et K2 les constantes de dissocia,on
K1 = [A][H]/[A] K2= [A][H]/[A] 49 Les acides amins
b. Point isolectrique (pHi ) et zwilerion
Calcul du pHi
Au pHi , la charge nele de lespce molculaire en solu,on est
nulle: [A] = [A]
K1 = [A][H]/[A]
[A] = [A][H]/K 1
K2= [A][H]/[A]
[A] = K 2 [A]/[H]
Alors: [A][H]/K 1 = K 2 [A]/[H]
Donc : K1 x K 2 = [H] 2
Or : pH=-log [H] et pK =-log K
Donc -2log [H +] = -log K 1 -log K 2
pHi =1/2 (pK 1 + pK 2) 50 Les acides amins
b. Point isolectrique (pHi ) et zwilerion
Rcapitula,f du calcul du pHi
1-Ecrire tous les quilibres ioniques successifs
2-Reprer la forme ionique correspondant au pHi : zwiUerion
3-Connaissant les pKa (pK 1 et pK 2) entourant ceUe forme ionique:
pHi = moyenne des pKa entourant la forme neutre
pHi =1/2 (pK 1 + pK 2)
> 51
# Les acides amins
c. Pourcentage de dissocia,on et courbe de neutralisa,on
On reprsente la dissocia;on de la fonc;on COOH dun AA selon le pH
> 52
# Les acides amins
c. Pourcentage de dissocia,on et courbe de neutralisa,on
On reprsente la dissocia;on de la fonc;on NH 3+ dun AA selon le pH
> 53
# Les acides amins
c. Pourcentage de dissocia,on et courbe de neutralisa,on
On reprsente la dissocia;on des 2 fonc;ons dun AA selon le pH
> 54
# Les acides amins
c. Pourcentage de dissocia,on et courbe de neutralisa,on
Tracer la courbe de ;tra;on dun AA par une base forte ( NaOH )
visualiser les frac;ons des diffrentes espces ioniques prsentes
dans le milieu en fonc;on de lvolu;on du pH de ce milieu 55 Les acides amins
c. Pourcentage de dissocia,on et courbe de neutralisa,on
Pour dterminer le pKa et les pourcentages des formes ioniques
un pH dtermin
On u;lise lqua;on de Henderson-Hasselbalch pour la
rac;on :
Donneur de H+ Accepteur de H+ + H+
Ka
Ka= [Accepteur de H +] x [H +] /[Donneur de H +]
pH = pKa + log [Accepteur de H +]/[Donneur de H +]
base Acide
pH= pka pH de demi -dissociation
log [Accepteur de H +]/[Donneur de H +]=0
[Accepteur de H +]=[Donneur de H +] = 50% 56 Les acides amins
c. Pourcentage de dissocia,on et courbe de neutralisa,on
Pour dterminer pKa ou des pourcentages des formes ioniques (%)
un pH dtermin
On u;lise lqua;on de Henderson-Hasselbalch pour la
rac;on :
Donneur de H+ Accepteur de H+ + H+
Ka
Ka= [Accepteur de H +] x [H +] /[Donneur de H +]
pH = pKa + log [Accepteur de H +]/[Donneur de H +]
base Acide
pH= pka pH de demi -dissociation
log [Accepteur de H +]/[Donneur de H +]=0
[Accepteur de H +]=[Donneur de H +] = 50% 57 Courbe thorique de neutralisa,on de la glycine par NaOH
Prvoir les frac,ons
des diffrentes formes
ioniques en prsence
un pH donn
On u,lise les
caractris,ques de
lAA:
-pKa1
-pKa2
-pHi
> 58
Courbe thorique de neutralisa,on de la glycine par NaOH
> 59
# Les acides amins
IV-Proprits et rac,ons chimiques caractrisant les AA
2-Rac,ons chimiques importantes caractrisant les AA
A-Rac;ons impliquant le groupement carboxyle COOH
B-Rac;ons impliquant le groupement amin NH 2
C-Rac;ons impliquant le groupement latral R
> 60
# Les acides amins
IV-Proprits et rac,ons chimiques caractrisant les AA
2-Rac,ons chimiques importantes caractrisant les AA
A-Rac;ons impliquant le groupement carboxyle COOH
Rac-on de rduc-on par le borohydrure de lithium
Rac-on de dcarboxyla-on
> 61
# Les acides amins
Rac&on de rduc&on par le borohydrure de lithium
> (in vitro )
Borohydrure de lithium
On ob;ent la forma;on dun alcool amin
> 62
Rac&on de dcarboxyla&on
> (in vivo )
> 63
Dcarboxyla;on de l his,dine en histamine
scrte lors de rac;ons allergiques et inflammatoire s.
Dcarboxyla;on de la srine en thanolamine
prcurseur de la choline des phospholipides.
Dcarboxyla;on du glutamate en acide gamma amino -butyrique (GABA)
neurotransmeUeur impliqu dans les crises pilepsies Les acides amins
IV-Proprits et rac,ons chimiques caractrisant les AA
2-Rac,ons chimiques importantes caractrisant les AA
B-Rac;ons impliquant le groupement amin NH 2
Rac-on avec le formol
Rac-on de synthse dune base de Schiff
Rac-on avec la ninhydrine
Rac-on de carbamyla-on (Rac-on dEDMAN)
Rac-on de dansyla-on
Rac-on daryla-on (Mthode de SANGER)
Rac-on de dsamina-on
Rac-on de conjugaison de la glycine 64 Rac&on avec le formol
> (in vitro )
> 65
Rac;on qui permet de bloquer la fonc;on amine
Le compos qui en rsulte conserve sa fonc;on acide dose facilement
par une base en prsence dun indicateur color
Cest la formol -;tra;on de Sorensen Rac&on de synthse dune base de Schiff
avec un carbonyle
> (in vitro )
> 66
Rac;on avec le 1,2 dialdhyde benznique
une base de Schiff trs fluorescente.
Un des procds les plus sensibles pour la dtec;on des acides amins 67
Rac;on colore permeUant de rvler la prsence des AA dans un
milieu
Si lAA est une proline ou une hydroxy-proline
le complexe est de couleur jaune
Rac&on avec la ninhydrine
> (in vitro )
Carbamyla&on
Edman (in vitro )
La rac;on des AA avec le Phnyliso Thio Cyanate (PTC)
des composs PTC-AA facilement sparable s par chromatographie
et absorbant dans lUV
> 68 69
Carbamyla&on (suite)
Permet liden;fica;on de lAA N terminal dun pep;de
Dans le cas dun pep;de n AA, le compos PTC-pep;de form va
subir une cyclisa;on au niveau d e l AA N-terminal qui permet de
librer: -le PTH-AA N terminal et
-le reste du pep;de (n 1) AA
cest la mthode dEDMAN Dansyla&on
> (in vitro )
La dansyla;on des AA
des composs fluorescents facilement dtectables
La dansyla;on (puis hydrolyse) dun pep;de permet la dtermina;on
de son acide amin N terminal
> 70
Dansyla&on (Engl )
> 71
La dansyla;on des AA
des composs fluorescents facilement dtectables
La dansyla;on (puis hydrolyse) dun pep;de permet la dtermina;on
de son acide amin N terminal Aryla&on avec le Di
nitro Fluoro Benzne (DNFB)
> (in vitro )
Rac;on dun AA avec le DNFB DNP AA absorbe 360 nm
Pour un pep;de , rac;on u ;lise (aprs hydrolyse) pour
iden;fier lacide amin N terminal
cest l a mthode de SANGER
> 72
Rac&ons de dsamina&on
> (in vivo )
> 73
Gnre nt des molcules du mtabolisme intermdiaire 74
Conjugaison un toxique
> (in vivo )
La glycine permet dliminer des composs toxiques
Ex: acide benzoque conservateur alimentaire E210
hyperac;vit, allergie ... potentiellement cancerigne
La conjugaison la glycine par son groupement NH 2
amida;on de COOH limina;on par voie urinaire Les acides amins
IV-Proprits et rac,ons chimiques caractrisant les AA
2-Rac,ons chimiques importantes caractrisant les AA
C-Rac;ons impliquant le groupement latral R
Rac-on de phosphoryla-on
Rac-on de carboxyla-on de lac .
glutamique
Rac-on dhydroxyla-on
> 75
Rac&on de phosphoryla&on
> (in vivo )
Fixa;on dun acide phosphorique (H 3PO 4) possible sur le
groupement OH dun AA Forma;on d ester phosphorique
- une srine (souvent)
- une thronine
- une tyrosine
> 76 77
Rac&on de phosphoryla&on
> (in vivo )
La phosphoryla;on des AA (donc des protines)
la rgula;on de leur ac;vit : ON /OFF
Une phosphoryla;on peut ac;v er une protine
Une phosphoryla;on peut inhiber une protine
Mcanisme essen;el dans la rgula;on de lac;vit enzyma;que Rac&on de carboxyla&on
> (in vivo )
CeUe modifica;on post-traduc;onnelle survient sur des
rsidus glutamate de protines
ac;va;on des protines de la coagula;on
matura;on des protines de lossifica;on
> 78
Rac&on de lhydroxyla&on
> (in vivo )
CeUe transforma;on touche la proline et la lysine
Pro hydroxyproline : cons;tuant essen;el du collagne
Lys hydroxylysine : cons;tuant essen;el du collagne
Lhydroxyla;on protge les protines de lac;on catabolique des
protases 79 V-Drivs des AA
1-Cra,ne
forme par;r de la Gly , Arg et S-adnosyl mthionine
La cra;ne phosphate est une rserve nerg;que du muscle stri
> 80
# Les acides amins 2-Cra,nine
Dchet mtabolique limin au niveau rnal
Cratininmie (concentra;on sanguine de la cra;nine ) reflte ltat
de la fonc;on rnale
Augmenta;on de sa concentra;on est un indicateur de laltra;on de la
fonc;on rnale. 81 3-Neurotransmeleurs
NeurotransmeUeurs du SNC et du SNA sympathique impliqus dans la
douleur, la rgula;on du rythme circadien, le contrle de lagressivit
La tyrosine Catcholamines
> 82 83
3-Neurotransmeleurs
Le tryptophane Srotonine 4-S-adnosylmthionine
Agent donneur de groupement mthyle
Il agit avec les transmthylases pour assurer la mthyla;on de lADN
sur une cytosine ou une adnine dans le cadre de rgula;on de la
transcrip;on
> 84
VI-Mthodes dtude des acides amins
Dtec;on de tous les AA par des rac;ons colores : p.e: ninhydrine
Dosage des AA aroma;ques par photomtrie (absorbent dans l UV)
Dosage par formol-;tra;on de Sorensen
Electrophorse
Chromatographie
> 85
# Les acides amins 86
VI-Mthodes dtude des acides amins
1-Electrophorse
Technique base sur la migra;on des AA sous leffet dun champs
lectrique ( ddp )
Dans deux compar;ments
dis;ncts:
-Solu;on tampon (conducteur
du courant)
-Support imbib de
ceUe solu;on ( pHm )
-Dpt d u mlange
analyser
-Applica;on dune ddp
-Migra;on des AA selon le ur pHi
-Schage
-Rvla;on la ninhydrine VI-Mthodes dtude des acides amins
2-Chromatographie
> 87
La phase mobile migre par capillarit le long de la phase sta;onnaire
entrainant avec elle des vitesses diffrentes les diffrents AA du
mlange analyser. 88
2-Chromatographie
La plaque est re;re de la cuve, sche puis on lasperge dune
solu;on rvlatrice (ninhydrine chaud)
Les acides amins du mlange apparaissent diffrents endroits de la
plaque 2-Chromatographie
La plaque est re;re de la cuve, sche puis on lasperge dune
solu;on rvlatrice (ninhydrine chaud)
Les acides amins du mlange apparaissent diffrents endroits de la
plaque 89 90
2-Chromatographie
Dtermina;on du rapport frontal : Rf = a/s grandeur caractris;que
pour chaque AA
a : distance parcourue par lAA et
s : distance parcourue par le solvant
Iden;fica;on dAA par comparaison aux rapports frontaux dj connus