la inmunofluorescencia de mosto químicas son dos técnicas que se basan en el principio de unión específica que existe entre un anticuerpo y su antígeno específico estas técnicas se utilizan tanto en laboratorios de biología celular de investigación como laboratorios de análisis clínicos en una fluorescencia como les comenté es una técnica que se basa entre la unión específica que existe entre un anticuerpo y su antígeno los anticuerpos que vamos a utilizar para realizar estas técnicas se encuentran conjugados a son dos fluorescentes los cuales nos permiten visualizar la presencia de moléculas blanco tanto en células fluidos o tejidos para visualizar esta técnica vamos a utilizar microscopía de fluorescencia poco enfocar como se muestra una figura de arriba a la derecha vamos a tener una célula que va a expresar un antígeno vamos a utilizar un anticuerpo específico otra estrategia no conjugados a un flor o foro y cual se muestra en verde y luego a través de la emisión de luz de este flor o foro vamos a poder visualizar su presencia existen diferentes flor o foros como se muestra en la tabla de la derecha los principales son citó vitrina flores e inna psp los cuales se emiten a diferentes longitudes de onda que se van a visualizar de diferentes colores como el naranja el verde cual rojo a través de la utilización de diferentes anticuerpos o cuadros a diferentes flor o foros en la misma muerte muestra es posible identificar la presencia de varios antígenos incluso incluso ver su localización y ver si ccoo localizan y esto es posible salvar otra vez del march de las imágenes como se muestra en la figura de debajo podemos ver la presencia un color amarillo que indica la localización del marcaje rojo y verde la técnica que recién me sacaba comentar se conoce como presencia directa ya que directamente nuestro anticuerpo contra el antígeno de interés se encuentra conjugado a un biológico en este caso le presenta una técnica alternativa que se llama ciencia indirecta que es la más utilizada la más común en los laboratorios y en este caso se utiliza un anticuerpo primario el cual va a reconocer al antígeno de interés y un anticuerpo secundario el cual se encuentra conjugado en flor o foro que que reconoce inmunoglobulinas en este caso a nuestro anticuerpo primario de esta manera es posible incluso amplificar la señal ya que varios anticuerpos secundarios conjugados afloró foros se pueden unir a nuestro anticuerpo primaria en este caso les traigo unos ejemplos de inmunofluorescencia esta es una figura tomada de lengua y se utilizan dos anticuerpos uno con marca roja que marca células medulares químicas y uno con marca con una sonda fluorescente en verde donde se va a marcar el anticuerpo es contra el factor de transcripción aire de esta manera es posible visualizar que en la zona medular del timo hay células que expresan el gen aire en este otro ejemplo se muestra un centro germinal en verde se marcan células proliferantes principalmente de linfocitos b que van a ocupar la zona oscura en rojo se marcan células dendríticas foliculares que se van a se van a ver en la zona clara y además en azul se enmarca a las células cd4 positivas bueno en este caso vamos a hablar de alguna esto química como les comenté anteriormente la nuestra química también es una técnica se basa en la especificidad de unión que existe entre un anticuerpo y su antígeno específico pero a diferencia de la inmunofluorescencia la inmunohistoquímica no va a tener flor o foros conjugados a los anticuerpos sino que se va a tener enzimas conjugados a los anticuerpos estas enzimas que principalmente son las velocidades al rábano picante y las fuertas alcalina son capaces de catalizar una reacción que transforma un sustrato incoloro en un producto coloreado la visualización de este producto coloreado que se va a depositar en la región cercana donde se encuentra nuestros anticuerpos va a poder ser observado a través de microscopía óptica como muestra la figura vamos a tener células o tejidos fijados vamos a utilizar un anticuerpo primario específico contrastar nuestras antígeno interés un anticuerpo secundario anti inmunoglobulinas que va a reconocer a nuestro anticuerpo primario el cual se va a encontrar conjugado a una enzima que puede ser la experiencia de rábano picante las faltas alcalina la cual va a catalizar la transformación de sustratos en el producto coloreado bueno y en este caso les traje unos ejemplos de molesto química en donde se trata de visualizar en diferentes muestras de cáncer de pulmón la presencia del antígeno pl1 este es vamos a decir una técnica se utiliza para poder predecir si los tratamientos inmunoterapia utilizando anti pl1 van a ser efectivos en diferentes pacientes y aquí como pueden ver existen diferentes intensidades de marcado incluso especificidad por la zona ya que vemos en algunas figuras como hay solamente algunas de estas células se encuentran marcadas con nuestro anticuerpo revelando la presencia del antígeno pl ahora